Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГБУ "ВГНКИ") и Федеральным государственным унитарным предприятием "Курская биофабрика - фирма "БИОК" (ФГУП "Курская биофабрика")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации (ТК 454)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 сентября 2013 г. N 59-П)

За принятие стандарта проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 октября 2013 г. N 1169-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32306-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2015 года.

5 Взамен ГОСТ 16739-88 и ГОСТ 23881-79

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Настоящий стандарт распространяется на туберкулины очищенные (ППД) для животных, применяемые для диагностики туберкулеза у животных в реакции гиперчувствительности замедленного типа (далее - туберкулины).

(раздел 2 в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.0.004 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения

ГОСТ 12.1.005 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.008 Система стандартов безопасности труда. Биологическая безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.4.011 Система стандартов безопасности труда. Средства защиты работающих. Общие требования и классификация

ГОСТ 177 Водорода перекись. Технические условия

ГОСТ 244 Натрия тиосульфат кристаллический. Технические условия

ГОСТ 1277 Реактивы. Серебро азотнокислое. Технические условия

ГОСТ 1770 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия

ГОСТ 4160 Реактивы. Калий бромистый. Технические условия

ГОСТ 4204 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4232 Реактивы. Калий йодистый. Технические условия

ГОСТ 4328 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 4457 Реактивы. Калий бромновато-кислый. Технические условия

ГОСТ 4459 Реактивы. Калий хромово-кислый. Технические условия

ГОСТ 4919.1 Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов

ГОСТ 6709 <*> Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 7933 Картон для потребительской тары. Общие технические условия

ГОСТ 9142 Ящики из гофрированного картона. Общие технические условия

ГОСТ 12026 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 14192 Маркировка грузов

ГОСТ 14261 Кислота соляная особой чистоты. Технические условия

ГОСТ 17527 Упаковка. Термины и определения

ГОСТ 18300 <**> Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

ГОСТ 18481 Ареометры и цилиндры стеклянные. Общие технические условия

ГОСТ 22967 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28083 Средства лекарственные биологические лиофилизированные для ветеринарного применения. Метод контроля вакуума в ампулах и флаконах

ГОСТ 28085 Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Методы контроля стерильности

ГОСТ 29230 (ИСО 835-4-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 4. Пипетки выдувные

ГОСТ 29251 (ИСО 385-1-84) Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 31926 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Методы определения безвредности

ГОСТ 31929 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Правила приемки, методы отбора проб

ГОСТ 33781 Упаковка потребительская из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия

ГОСТ ISO 7218 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям

ГОСТ ISO 7864 Иглы инъекционные однократного применения стерильные

ГОСТ ISO 7886-1 Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования

ГОСТ ISO/IEC 17025 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

--------------------------------

<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 58144-2018.

<**> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 55878-2013 "Спирт этиловый технический гидролизный ректификованный. Технические условия".

3.1 В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 17527, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1.1 туберкулин очищенный (ППД) для животных: Лекарственный препарат, представляющий собой очищенную белковую фракцию, выделенную из культурального фильтрата возбудителей туберкулеза бычьего или птичьего видов, выращенных на синтетической питательной среде и инактивированных термически.

3.1.2 Bacille de Calmette et de Guerin, BCG: Вакцинный штамм микобактерий туберкулеза M. bovis со сниженной вирулентностью, полученный в результате многолетнего культивирования на глицериново-картофельной среде с желчью.

3.1.3 международная единица активности, МЕ: Единица активности Международного стандарта туберкулина, принятого Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ).

3.1.4 стандарт туберкулина очищенного (ППД) для животных (эталонный образец): Серия туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих или туберкулина очищенного (ППД) для птиц в лиофилизированной форме, откалиброванная по активности относительно принятых Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) действующих международных стандартов туберкулина очищенного PPD bovine или туберкулина очищенного PPD avium соответственно, и оформленная паспортом с указанием содержания в ампуле международных единиц активности.

3.2 В настоящем стандарте применены следующие сокращения:

ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа;

ППД - protein purified derivative (PPD);

ТХУ - трихлоруксусная кислота.

Туберкулины выпускают в двух видах: туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих и туберкулин очищенный (ППД) для птиц.

Туберкулины выпускают в жидкой и лиофилизированной формах.

5.1 Условия выполнения испытаний

5.1.1 Общие требования проведения микробиологического анализа и работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности - по ГОСТ ISO 7218.

5.1.2 Общие требования к помещениям - по ГОСТ ISO 7218.

5.1.3 Требования к персоналу - по ГОСТ ISO 7218, ГОСТ ISO/IEC 17025.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

К проведению испытаний допускаются квалифицированные сотрудники, имеющие опыт работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности, изучившие методики микробиологических работ.

5.2 Требования безопасности

5.2.1 По биологической безопасности туберкулины должны соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.008.

5.2.2 Требования к обучению персонала безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5.2.3 Средства защиты работающих - по ГОСТ 12.4.011, воздух рабочей зоны должен соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.005.

5.2.4 Утилизация туберкулинов с истекшим сроком годности и серий, не выдержавших контрольных испытаний, а также туберкулина во флаконах, оставшихся после испытаний по показателям качества, и архивных образцов после истечения срока хранения не требует специальных мер безопасности.

6.1 Туберкулины должны соответствовать требованиям настоящего стандарта и изготавливаться в соответствии с технологическим регламентом производства, утвержденным организацией-производителем в порядке, действующем на территории государства, принявшего стандарт.

6.2 Туберкулины по органолептическим, физико-химическим, химическим и биологическим свойствам должны соответствовать требованиям и нормам, указанным в таблице 1.

6.3.1 Туберкулин в жидкой форме расфасовывают по 1 - 20 см³ в стерильные флаконы или ампулы соответствующей вместимости. Флаконы укупоривают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками. Ампулы запаивают.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

6.3.2 Для лиофилизации туберкулин расфасовывают в стерильные флаконы или ампулы вместимостью 1 - 20 см³ с таким расчетом, чтобы при растворении туберкулина (ППД) для млекопитающих в прилагаемом растворителе активность составляла 10000 МЕ/см³, при растворении туберкулина (ППД) для птиц - 25000 МЕ/см³. После лиофилизации флаконы укупоривают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками. Ампулы запаивают под вакуумом.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

6.3.3 Флаконы (ампулы) с туберкулином маркируют несмываемой краской по стеклу или наклеивают этикетки.

6.3.3.1 На флаконах (ампулах) с туберкулином хорошо читаемым шрифтом должно быть указано:

- наименование и адрес организации-производителя;

- товарный знак организации-производителя;

- наименование лекарственного препарата;

- номер серии;

- дата выпуска (месяц, год);

- надпись: "годен до";

- количество доз;

- количество туберкулина во флаконе: для жидкой лекарственной формы - в см³, для лиофилизированной лекарственной формы - в МЕ;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- активность, МЕ/см³ (для туберкулина в лиофилизированной форме - после растворения в рекомендуемом объеме растворителя);

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- надпись: "Для ветеринарного применения".

6.3.4 Флаконы (ампулы) с туберкулином упаковывают в картонные коробки или пачки по ГОСТ 33781 с разделительными перегородками из картона по ГОСТ 7933, обеспечивающими сохранность флаконов (ампул).

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Допускаются другие виды упаковки, обеспечивающие сохранность флаконов (ампул).

6.3.5 На каждую коробку (пачку) с туберкулином наклеивают этикетку, на которой хорошо читаемым шрифтом указывают:

- наименование и адрес организации-производителя;

- товарный знак организации-производителя;

- наименование лекарственного препарата;

- номер регистрационного удостоверения;

- номер серии;

- дату выпуска (месяц, год);

- надпись: "годен до";

- способ применения;

- количество туберкулина во флаконе: для жидкой лекарственной формы - в см³, для лиофилизированной лекарственной формы - в МЕ;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- количество доз во флаконе;

- активность, МЕ/см³ (для туберкулина в лиофилизированной форме - после растворения в рекомендуемом объеме растворителя);

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- количество флаконов (ампул) в коробке;

- лекарственную форму;

- условия отпуска;

- условия хранения;

- надпись: "Для ветеринарного применения";

- штриховой код.

В каждую коробку вкладывают от одной до пяти инструкций по применению.

6.3.6 К каждой коробке (пачке) с туберкулином в лиофилизированной форме прилагают коробку (пачку) с таким же количеством флаконов (ампул) с растворителем или в коробку (пачку) с туберкулином в лиофилизированной форме упаковывают равное количество флаконов (ампул) с растворителем. Объем растворителя в каждом флаконе (ампуле) должен быть таким, чтобы активность после растворения лиофилизированного туберкулина (ППД) для млекопитающих составляла 10000 МЕ/см³, лиофилизированного туберкулина (ППД) для птиц - 25000 МЕ/см³.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

6.3.7 Коробки (пачки) с туберкулином упаковывают в ящики из гофрированного картона по ГОСТ 9142 (с прокладками из картона) массой брутто не более 15 кг.

6.3.7.1 Внутрь каждого ящика вкладывают упаковочный лист с указанием:

- наименования организации-производителя;

- наименования лекарственного препарата;

- номера серии;

- числа упаковочных единиц в ящике;

- фамилии или номера упаковщика.

Примечание - Допускается не вкладывать упаковочный лист в ящик.

6.3.8 На этикетке транспортной упаковки должно быть указано:

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- наименование и адрес (с указанием страны) организации-производителя;

- товарный знак организации-производителя;

- наименование лекарственного препарата;

- номер серии;

- дата выпуска (месяц, год);

- количество коробок (пачек);

- надпись: "годен до";

- условия хранения и перевозки;

- надпись: "Для ветеринарного применения".

6.3.9 На каждый ящик наносят транспортную маркировку по ГОСТ 14192 с нанесением манипуляционных знаков: "Хрупкое. Осторожно", "Беречь от солнечных лучей", "Пределы температуры", "Верх".

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

6.3.10 Совмещение транспортной маркировки и маркировки, характеризующей данные об упакованной продукции, на одной стороне транспортной упаковки не допускается.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

7.1 Каждая серия туберкулина должна быть принята (проверена) в организации-производителе отделом, отвечающим за контроль качества готовой продукции в соответствии с ГОСТ 31929.

7.2 Серией туберкулина считают определенное количество лекарственного препарата, произведенное за один технологический цикл и оформленное одним документом о качестве.

7.3 В документе о качестве указывают:

- наименование и адрес организации-производителя;

- наименование лекарственного препарата;

- номер серии;

- объем серии;

- дату изготовления (месяц, год);

- результаты анализа по показателям качества;

- надпись: "годен до";

- обозначение настоящего стандарта;

- номер документа о качестве и дату его выдачи;

- подпись уполномоченного лица организации-производителя, выдавшего документ о качестве.

7.4 После проверки внешнего вида, качества упаковки и маркировки методом случайного отбора из серии туберкулина отбирают контрольные образцы (пробы), количество которых должно быть достаточным для проведения не менее чем двукратного полного аналитического контроля в соответствии с требованиями, установленными при государственной регистрации. Одновременно отбирают архивный образец, то есть образец в окончательной упаковке, который может служить для подтверждения идентичности. Контрольные и архивные образцы считаются идентичными, являются единицами продукции в окончательной упаковке и могут рассматриваться как взаимозаменяемые.

Образцы препарата отправляют для хранения в архив после проведения испытаний по показателям качества, установленным настоящим стандартом. Контрольные и архивные образцы хранят в архиве отдела, отвечающего за контроль качества готовой продукции организации-производителя, в течение срока годности серии и одного года после истечения срока годности.

Условия хранения контрольных и архивных образцов должны соответствовать требованиям 9.2.

(п. 7.4 в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

7.5 При получении неудовлетворительных результатов испытания хотя бы по одному из показателей, проводят повторные испытания по этому показателю на удвоенном количестве проб туберкулина, отобранных из той же серии. Результаты повторной проверки распространяются на всю серию. При получении неудовлетворительных результатов повторной проверки, серию туберкулина считают несоответствующей требованиям настоящего стандарта и выбраковывают.

Для проведения испытаний применяют:

- фотоэлектроколориметр с цифровой индикацией результатов измерений и рабочей длины волны, спектральным диапазоном длин волн 315 - 990 нм, диапазонами измерений: коэффициента пропускания от 0,1% до 100%, оптической плотности A от 0 до 3 ед., пределом допускаемой абсолютной погрешности установки длины волны - 3 нм, погрешностью измерений +/- 0,5%, температурным режимом работы от 10 °C до 40 °C;

- pH-метр, обеспечивающий измерение с точностью до 0,05 ед. pH, с разрешением 0,01 ед. pH, оснащенный ручным или автоматическим определителем температуры;

- холодильник бытовой, обеспечивающий поддержание температуры от 4 °C до 6 °C;

- калий хромовокислый по ГОСТ 4459, 10%-ный раствор;

- серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- воду дистиллированную по ГОСТ 6709;

- кислоту серную по ГОСТ 4204, раствор молярной концентрации 0,05 моль/дм³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- натрия гидроокись по ГОСТ 4328, 30% - 33%-ный раствор и раствор на прокипяченной дистиллированной воде молярной концентрации 0,1 моль/дм³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- водорода перекись по ГОСТ 177;

- метиловый оранжевый по ГОСТ 4919.1;

- ТХУ, раствор с массовой долей 20%;

- туберкулин с известной концентрацией белка, определенной методом Кьельдаля;

- калий бромноватокислый по ГОСТ 4457;

- калий бромистый по ГОСТ 4160, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- стандарт-титр калий бромид-бромат, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- калий йодистый по ГОСТ 4232, 20%-ный раствор;

- кислоту соляную по ГОСТ 14261, 10%-ный раствор;

- натрия тиосульфат по ГОСТ 244, раствор молярной концентрации 0,05 моль/дм³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 18300, 70%-ный раствор;

- метиловый красный по ГОСТ 4919.1;

- метиленовый синий по ГОСТ 4949.1;

- индикатор крахмал, 1%-ный раствор;

- краску на метки;

- фенол 0,3%-ный раствор в дистиллированной воде;

- раствор натрия хлорида стерильный физиологический, pH 6,5 - 7,5;

- патогенный штамм микобактерий птичьего вида, суспензированный в физиологическом растворе;

- стандарт (эталонный образец) туберкулина сухого очищенного (ППД) для млекопитающих;

- стандарт (эталонный образец) туберкулина сухого очищенного (ППД) для птиц;

- вакцину BCG,

или убитые нагреванием высушенные микобактерии бычьего вида, суспензированные в стерильном жидком парафине,

или живые микобактерии бычьего вида патогенного штамма, суспензированные в физиологическом растворе;

- морских свинок альбиносов или с белыми боками клинически здоровых массой не менее 250 г и не менее 400 г;

- колбу Кьельдаля вместимостью 50 и 100 см³ по ГОСТ 25336;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- аппарат перегонный Кьельдаля или автоматический аппарат для определения азота по Кьельдалю;

- пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 см³ по ГОСТ 29230;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- бюретки по ГОСТ 29251;

- колбы конические вместимостью 250 и 1000 см³ по ГОСТ 25336;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- капельницу по ГОСТ 25336;

- пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;

- цилиндры вместимостью 100, 250 и 500 см³ по ГОСТ 1770;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- ареометры по ГОСТ 18481;

- колбы мерные с притертой пробкой вместимостью 100 и 1000 см³ по ГОСТ 1770;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- шприцы вместимостью 1 см³ по ГОСТ 22967 или ГОСТ ISO 7886-1;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- иглы инъекционные по ГОСТ ISO 7864;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- бумагу индикаторную по ГОСТ 4919.1;

- фильтры бумажные обеззоленные;

- бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026.

Допускается применение других средств измерений, аппаратуры, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.

8.2 Определение внешнего вида

Для определения внешнего вида каждый флакон (ампулу) с туберкулином просматривают визуально в прямом свете, а флакон (ампулу) с туберкулином в жидкой форме и в проходящем свете.

8.3 Определение наличия вакуума в ампулах

Наличие вакуума в ампулах определяют согласно ГОСТ 28083.

8.4 Определение растворимости и однородности раствора

Три флакона (ампулы) с туберкулином в лиофилизированной форме растворяют растворителем микобактериальных аллергенов до активности 10000 МЕ/см³ [туберкулин (ППД) для млекопитающих] и 25000 МЕ/см³ [туберкулин (ППД) для птиц].

Содержимое флаконов (ампул) встряхивают и просматривают в проходящем свете.

8.5 Определение концентрации водородных ионов

Определение концентрации водородных ионов (pH) туберкулина проводят потенциометрическим методом с помощью pH-метра. pH-метр используют в соответствии с инструкцией производителя.

Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в соответствии с 8.4.

8.6 Определение количества белка

Количество белка в туберкулине определяют методом Кьельдаля или фотоэлектроколориметрическим методом. Испытания проводят не менее чем в трех повторностях.

Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют по 8.4.

8.6.1 Определение белка по белковому азоту методом Кьельдаля

8.6.1.1 Проведение испытания

В пробирку пипеткой вносят от 1 до 5 см³ пробы туберкулина, добавляют равный объем 20%-ного раствора ТХУ и помещают в холодильник не менее чем на 4 ч при температуре от 4 °C до 6 °C. Коагулированный белок фильтруют через обеззоленный фильтр, смывая остатки белка из пробирки 5%-ным раствором ТХУ. Белок на фильтре трижды промывают 5%-ным раствором ТХУ для удаления остаточного азота. Фильтр с коагулированным белком слегка просушивают на воздухе, помещают в колбу Кьельдаля, добавляют 2 - 5 см³ концентрированной серной кислоты (плотность 1,84 г/см³) и минерализуют при температуре от 300 °C до 400 °C. Минерализацию проводят в присутствии катализатора - перекиси водорода, которую добавляют по 0,5 см³ через каждые 1,5 - 2,0 ч до полного обесцвечивания раствора. По окончании минерализации колбу с пробой охлаждают при комнатной температуре, содержимое колбы переносят в колбу для отгона, остатки раствора смывают порциями дистиллированной воды общим объемом не менее 20 см³. Полноту переноса проверяют по индикатору метиловому оранжевому. Последняя порция смывных вод должна остаться желтой.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

В коническую колбу наливают 10 - 20 см³ раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/см³ и 10 - 15 капель индикатора Таширо. Индикатор Таширо готовят смешиванием в равных объемах 0,2%-ного спиртового раствора метилового красного и 0,1%-ного спиртового раствора метиленового синего.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Содержимое колбы нейтрализуют 30% - 33%-ным раствором гидроокиси натрия, который добавляют из расчета примерно 6 см³ на 1 см³ серной концентрированной кислоты, взятой для минерализации. Отгонную колбу подсоединяют к холодильнику и парообразователю. Затем содержимое колбы отгоняют. Отгон аммиака проводят до тех пор, пока в приемной колбе соберется не менее 20 см³ раствора. Окончание отгона проверяют по индикаторной бумаге.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Содержимое приемной колбы титруют раствором гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/см³ до перехода окраски раствора от лиловой к зеленой (индикатор реактив Таширо).

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Параллельно определяют содержание азота в обеззоленном фильтре (аналогично определению в испытуемой пробе).

8.6.1.2 Обработка результатов

Количество белка X, мг/см³, вычисляют по формуле

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

или

где - объем раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм³, см³;

V_кф - объем раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм³, израсходованный на титрование обеззоленного фильтра (контроль), см³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

V_ис - объем раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм³, израсходованный на титрование испытуемой пробы, см³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

- поправочный коэффициент к титру раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм³;

K_NaOH - поправочный коэффициент к титру раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

1,4 - коэффициент пересчета на азот (1 см³ раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм³ эквивалентен 1,4 мг азота);

6,25 - коэффициент пересчета на белок (молекула белка содержит примерно 16% азота);

n - объем пробы, взятой для испытания, см³.

8.6.2.1 Подготовка к испытанию

Определение концентрации белка проводят по градуировочной кривой. Для построения градуировочной кривой готовят в пробирках разведения туберкулина с известной концентрацией белка от 0,01 до 0,20 мг/см³ с шагом разведения 0,01 мг/см³ с использованием дистиллированной воды. К полученным разведениям добавляют равный объем 20%-ного раствора ТХУ и перемешивают. Взвесь коагулированного белка из каждой пробирки переносят в кювету и определяют оптическую плотность на фотоэлектроколориметре при длине волны (540 +/- 20) нм (зеленый светофильтр). В качестве контрольного раствора используют дистиллированную воду с добавлением равного объема 20%-ного раствора ТХУ. Измерение оптической плотности проводят через 2 - 3 мин после добавления ТХУ. По полученным данным строят градуировочную кривую, откладывая по горизонтальной оси концентрацию белка, а по вертикальной - соответствующее значение оптической плотности.

8.6.2.2 Проведение испытания

Готовят разведения испытуемой пробы с примерным содержанием белка 0,02 - 0,20 мг/см³. Добавляют равный объем 20%-ного раствора ТХУ, через 2 - 3 мин взвесь коагулированного белка переносят в кювету и определяют оптическую плотность. Используя градуировочную кривую, определяют концентрацию белка в разведенной пробе. С учетом разведения испытуемой пробы вычисляют содержание белка.

Сухой цилиндр вместимостью 250 см³ наполняют физиологическим раствором и замеряют его плотность ареометром. Отсчет по делениям шкалы ареометра ведут по нижнему мениску жидкости в цилиндре.

Таким же способом определяют плотность пробы туберкулина.

Для определения плотности глицерина в пробе туберкулина от показателя плотности пробы туберкулина вычитают показатель плотности физиологического раствора, взятого для контроля. Полученный результат сопоставляют с данными таблицы 2 и определяют массовую долю глицерина.

10 см³ пробы туберкулина разбавляют до 40 см³ дистиллированной водой, приливают 5 - 10 капель 10%-ного раствора хромовокислого калия в качестве индикатора и титруют раствором азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм³ до оранжево-красного окрашивания.

Содержание хлорида натрия Y, %, вычисляют по формуле

где V₁ - объем раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм³, пошедший на титрование, см³;

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

K - коэффициент поправки раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм³;

V₂ - объем пробы, взятой для испытания, см³;

0,005845 - коэффициент пересчета на массу хлорида натрия (1 см³ раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм³ эквивалентен 0,005845 г хлорида натрия).

Приготовление раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм³

Для приготовления раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм³ из стандарт-титра содержимое ампулы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³. Перед применением стандарт-титра снимают этикетку с ампулы и обмывают наружную поверхность ампулы дистиллированной водой. В мерную колбу вместимостью 1000 см³ вставляют коническую воронку диаметром 9 - 10 см, ампулу вскрывают, переворачивают и ее содержимое переносят в колбу через воронку, затем ампулу тщательно промывают изнутри дистиллированной водой в количестве шестикратного объема ампулы. Промывные воды переносят через воронку в мерную колбу с содержимым ампулы. После растворения содержимого ампулы объем жидкости доводят до метки дистиллированной водой.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Или в колбе вместимостью 1000 см³ растворяют 2,7837 г чистого бромноватокислого калия, высушенного в сухожаровом шкафу при температуре 110 °C до постоянной массы, и 10 г бромистого калия в 1000 см³ дистиллированной воды.

2 см³ раствора пробы туберкулина вносят в колбу с притертой пробкой, добавляют 2 см³ 10%-ного раствора соляной кислоты и 25 см³ раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм³. Сразу же начинают выделяться кристаллы трибромфенола. Реакция окисления фенола в трибромфенол продолжается при комнатной температуре в течение 15 мин. По истечении этого времени в колбу добавляют 4 см³ 20%-ного раствора йодистого калия. Выделившийся йод оттитровывают раствором тиосульфата натрия молярной концентрации 0,05 моль/дм³. Индикатором служит 1%-ный раствор крахмала.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Массовую долю фенола Z, %, вычисляют по формуле

где 25 - объем бромистого калия, см³;

K - коэффициент поправки раствора бромистого калия;

T - объем тиосульфата натрия, израсходованный на титрование, см³;

K₁ - коэффициент поправки раствора тиосульфата натрия;

0,001568 - коэффициент пересчета на фенол (1 см³ раствора тиосульфата натрия молярной концентрации 0,05 моль/дм³ эквивалентен 0,001568 г фенола);

2 - объем испытуемой пробы, см³.

Стерильность туберкулина определяют методом прямого посева в соответствии с ГОСТ 28085 или методом мембранной фильтрации [1].

У трех морских свинок массой не менее 400 г, не использованных ранее в опытах, удаляют с боков волосяной покров, дезинфицируют кожу 70%-ным раствором этилового спирта и внутрикожно вводят по 500 МЕ испытуемой пробы туберкулина в объеме 0,1 см³ растворителя. Учет результатов проводят через 24 ч.

Общие принципы определения безвредности по ГОСТ 31926.

Двум морским свинкам, не подвергавшимся ранее действию агентов, которые могут помешать тестированию, вводят подкожно 0,5 см³ испытуемой пробы туберкулина. За животными наблюдают в течение 7 сут.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Туберкулин считают безвредным, если в течение наблюдаемого периода не появляется аномальных эффектов (воспалительные реакции, гибель животных).

Испытанию подвергают каждую пятую серию туберкулина. Для определения остаточной инфекционности используют морских свинок массой не менее 250 г, не реагирующих на введение туберкулина.

Не менее чем двум клинически здоровым морским свинкам внутрибрюшинно вводят 5 - 10 см³ испытуемой пробы туберкулина (не менее 5 мг сухого вещества на одну морскую свинку).

Примечание - С целью повышения вероятности выявления возможного присутствия живых микобактерий допускается концентрирование испытуемой пробы туберкулина объемом 50 - 100 см³ методом мембранной фильтрации [1] или центрифугированием при 2000g [2] - [3].

За животными наблюдают не менее 42 сут, отмечая случаи гибели или признаки заболевания.

Животных, павших в период срока наблюдения, вскрывают и обследуют макроскопически, а ткани и органы с видимыми патологоанатомическими изменениями - микроскопически и культуральными методами для выявления возможного присутствия микобактерий.

Оставшихся в живых морских свинок, после эвтаназии вскрывают и обследуют макроскопически. В случае видимых патологоанатомических изменений дополнительно проводят микроскопические и культуральные исследования.

Примечание - Организация-производитель может проводить контроль концентрированного материала туберкулина непосредственно перед его разведением и расфасовкой (объем испытуемой пробы концентрата - 5 см³ на одну морскую свинку) [1].

Туберкулин считают свободным от живых микобактерий, если все морские свинки остаются живыми и клинически здоровыми в течение периода наблюдения, а в случае проведения дополнительных микроскопических и культуральных исследований живые микобактерии не выявляются.

Исследованию подвергают каждую пятую серию туберкулина.

Группе из трех морских свинок массой не менее 400 г, не использованных ранее в опытах, удаляют с боков волосяной покров, дезинфицируют кожу 70%-ным раствором этилового спирта и трехкратно с интервалом 5 сут вводят внутрикожно по 500 МЕ испытуемой пробы туберкулина в 0,1 см³ растворителя. Через 15 - 21 сут после третьей инъекции подопытным животным и группе из трех контрольных морских свинок с той же массой тела, ранее не вакцинированных, вводят внутрикожно по 500 МЕ испытуемой пробы туберкулина в 0,1 см³ растворителя.

Реакцию учитывают через 24 - 48 ч после последней инъекции туберкулина. Реакции в двух группах морских свинок не должны визуально отличаться.

Активность испытуемой пробы туберкулина устанавливают в международных единицах (МЕ) сравнением с активностью стандарта туберкулина очищенного (ППД) (эталонного образца) на морских свинках, сенсибилизированных микобактериями соответствующего вида M. bovis или M. avium. Каждая организация-производитель должна использовать свой стандарт туберкулина очищенного (ППД) (эталонный образец) [3].

8.15.1.1 Подготовка к испытанию

За четыре - шесть недель до проведения испытаний сенсибилизируют морских свинок массой не менее 400 г. Сенсибилизированные свинки могут быть использованы в течение 6 мес с интервалом не менее 30 сут между исследованиями.

Для сенсибилизации десяти морским свинкам внутрикожно вводят по 0,2 мг вакцины BCG в 0,1 см³ стерильного физиологического раствора или внутримышечно вводят 1 - 2 мг убитых нагреванием, высушенных микобактерий бычьего вида, суспензированных в стерильном жидком парафине, или внутрибрюшинно (внутримышечно) вводят суспензию, содержащую 0,0001 мг (сырой массы) живых микобактерий бычьего вида патогенного штамма в 0,5 см³ стерильного физиологического раствора.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) с туберкулином испытуемой серии с использованием стерильного физиологического раствора готовят три разведения: 1:1000; 1:200; 1:40, что должно соответствовать 1,0; 5,0 и 25,0 МЕ в 0,1 см³. Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 10000 МЕ/см³ по 8.4.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Для приготовления разведений стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонного образца) используют три ампулы. К содержимому ампулы добавляют 1 см³ 0,3%-ного раствора фенола в дистиллированной воде, получая при этом раствор туберкулина с активностью, указанной в паспорте стандарта (эталонного образца). Содержимое трех ампул стандарта (эталонного образца) смешивают и с использованием стерильного физиологического раствора готовят разведения, соответствующие активности 1,0; 5,0 и 25,0 МЕ в 0,1 см³.

8.15.1.2 Проведение испытания

У морских свинок удаляют волосяной покров на боках, дезинфицируют места инъекций 70%-ным раствором этилового спирта и в условные точки (по методу латинского квадрата) вводят внутрикожно отдельными шприцами по 0,1 см³ каждого разведения испытуемой пробы туберкулина и стандарта (эталонного образца). Морских свинок метят несмываемой краской.

8.15.1.3 Учет результатов

Реакцию у морских свинок учитывают через 24 - 28 ч путем измерения продольного и поперечного диаметров ответных реакций, образующихся в месте введения туберкулина, и вычисления среднего диаметра каждой ответной реакции.

Для расчета активности используют результаты только у тех свинок, которые к моменту учета имеют диаметр ответных реакций не менее 8 мм и не более 25 мм и реагируют на все разведения туберкулина испытуемой серии и стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонного образца). Количество таких свинок должно быть не менее восьми.

Относительную активность R туберкулина испытуемой серии вычисляют, исходя из того, что между выраженностью ответной реакции и логарифмом дозы введения аллергена существует линейная зависимость [2].

Для вычисления логарифма относительной активности туберкулина lgR применяют формулу

где - средний диаметр ответной реакции у морских свинок на одну дозу каждого введения;

ис - испытуемый туберкулин;

ст - стандарт туберкулина очищенного (ППД) (эталонный образец);

K - сумма слагаемых в числителе;

b - усредненный тангенс угла наклона прямых зависимости диаметра ответной реакции от логарифма дозы туберкулина при графическом изображении результатов находят по формуле

где D - доза введения туберкулина.

В случае определения активности туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих логарифм относительной активности туберкулина lgR формула (5) принимает вид

где ис - испытуемый туберкулин;

ст - стандарт туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонный образец);

K - сумма слагаемых в числителе (для данного случая K = 3);

b - для данного случая находят по формуле

где - средний диаметр на дозу 25 МЕ стандарта (эталонного образца);

- средний диаметр на дозу 1 МЕ стандарта (эталонного образца);

- средний диаметр на дозу 25 МЕ испытуемого туберкулина;

- средний диаметр на дозу 1 МЕ испытуемого туберкулина.

Средний диаметр реакции находят по формуле

где N - число животных в опыте;

d_i - отдельный диаметр ответной реакции.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Относительную активность R определяют по формуле

Величина относительной активности туберкулина должна равняться 1,00. Допускается отклонение величины R от 0,66 до 1,50 при доверительных границах эксперимента 50% - 200% (P = 0,95) [1]. За доверительные границы условно принимают +/- 2 стандартные ошибки при P = 0,95. Стандартную ошибку m определяют по формуле

где - среднее квадратичное отклонение опыта, рассчитываемое по формуле

где n - число инъекций;

- среднее квадратичное отклонение для величины каждого среднего диаметра , при этом

Для выражения активности туберкулина в МЕ коэффициент относительной активности R умножают на предполагаемое значение активности (10000 МЕ/см³).

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Активность туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих должна быть не менее 66% (6600 МЕ/см³) и не более 150% (15000 МЕ/см³) от предполагаемой активности (10000 МЕ/см³). Активность туберкулина в лиофилизированной форме определяют после добавления растворителя микобактериальных аллергенов.

8.15.2.1 Подготовка к испытанию

За четыре - шесть недель до проведения испытаний сенсибилизируют морских свинок. Сенсибилизированные свинки могут быть использованы в течение 6 мес с интервалом не менее 30 сут между исследованиями.

Для сенсибилизации морским свинкам внутримышечно вводят 3 - 4 мг влажной массы живых микобактерий птичьего вида патогенного штамма, суспензированных в 0,5 см³ стерильного физиологического раствора.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) с туберкулином испытуемой серии с использованием стерильного физиологического раствора готовят три разведения: 1:500; 1:100; 1:20, что должно соответствовать 5,0; 25,0 и 125,0 МЕ в 0,1 см³. Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 25000 МЕ/см³ по 8.4.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

Для приготовления разведений стандарта туберкулина очищенного (ППД) для птиц (эталонного образца) используют три ампулы. К содержимому ампулы добавляют 1 см³ 0,3%-ного раствора фенола в дистиллированной воде, получая при этом раствор туберкулина с активностью, указанной в паспорте стандартного (эталонного) образца. Содержимое трех ампул стандарта (эталонного образца) смешивают и с использованием стерильного физиологического раствора готовят разведения, соответствующие активности 5,0, 25,0 и 125 МЕ в 0,1 см³.

8.15.2.2 Проведение испытания

Испытания проводят по 8.15.1.2.

8.15.2.3 Учет результатов

Учет и обработку результатов проводят по 8.15.1.3.

Величина относительной активности туберкулина должна равняться 1,00. Допускается отклонение величины R от 0,75 до 1,33 при доверительных границах эксперимента 50% - 200% (P = 0,95) [1]. За доверительные границы условно принимают +/- 2 стандартные ошибки при P = 0,95.

Для выражения активности туберкулина в МЕ коэффициент относительной активности R умножают на предполагаемую активность (25000 МЕ/см³).

Активность туберкулина очищенного (ППД) для птиц должна быть не менее 75% (18750 МЕ/см³) и не более 133% (33250 МЕ/см³) от предполагаемой активности (25000 МЕ/см³). Активность туберкулина в лиофилизированной форме определяют после добавления растворителя микобактериальных аллергенов.

Исследованию подвергают каждую пятую серию туберкулина.

Специфичность туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих устанавливают в процентах относительно активности туберкулина очищенного (ППД) для птиц на морских свинках, сенсибилизированных живыми M. avium.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

8.16.1.1 Подготовка к испытанию

Сенсибилизацию морских свинок проводят по 8.15.2.1.

Для приготовления разведений туберкулина (ППД) для млекопитающих туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 10000 МЕ/см³ по 8.4.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) испытуемой пробы туберкулина с использованием стерильного физиологического раствора готовят два разведения с 25-кратным интервалом. Дозы испытуемого туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих 1000 и 40 МЕ в 0,1 см³ стерильного физиологического раствора дают хорошо читаемые кожные реакции у морских свинок, сенсибилизированных M. avium.

Инъекционные дозы эталонного образца [стандарта туберкулина очищенного (ППД) для птиц] - в 20 раз ниже доз испытуемого туберкулина [туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих]: соответственно 50 и 2 МЕ в 0,1 см³ стерильного физиологического раствора.

8.16.1.2 Проведение испытания

Испытания проводят по 8.15.1.2.

8.16.1.3 Учет результатов проводят по 8.15.1.3.

Специфичность S, %, рассчитывают по формуле

где R - относительная активность испытуемого туберкулина;

20 - коэффициент кратности доз введения испытуемого туберкулина и эталонного образца туберкулина, относительно которого проводится определение специфичности.

Специфичность туберкулина очищенного (ППД) для птиц устанавливают в процентах относительно активности туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих на морских свинках, сенсибилизированных живыми M. bovis.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

8.16.2.1 Подготовка к испытанию

Сенсибилизация морских свинок по 8.15.1.1.

Для приготовления разведений туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 25000 МЕ/см³ по 8.4.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) испытуемой пробы туберкулина с использованием стерильного физиологического раствора готовят два разведения с 25-кратным интервалом. Дозы испытуемого туберкулина очищенного (ППД) для птиц 500 и 20 МЕ в 0,1 см³ стерильного физиологического раствора дают хорошо читаемые кожные реакции у морских свинок, сенсибилизированных M. bovis.

Инъекционные дозы эталонного образца [стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих] - в 20 раз ниже доз испытуемого туберкулина [туберкулина очищенного (ППД) для птиц]: соответственно - 25 и 1 МЕ в 0,1 см³ стерильного физиологического раствора.

8.16.2.2 Проведение испытания по 8.15.1.2.

8.16.2.3 Учет результатов проводят по 8.16.1.3.

9.1 Транспортируют туберкулины всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозок, действующими на данном виде транспорта. Транспортируют туберкулин при температуре от 2 °C до 25 °C. Допускается транспортировать туберкулин при более высокой температуре, но не выше 30 °C, при этом срок транспортирования должен быть не более 20 сут.

9.2 Туберкулины хранят в упаковке производителя в защищенном от света месте: в жидкой форме - при температуре от 2 °C до 8 °C; в лиофилизированной форме - при температуре не выше 25 °C в пределах срока годности.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

9.3 Срок годности туберкулина в жидкой форме - два года с даты выпуска, в лиофилизированной форме - три года с даты выпуска. Датой производства туберкулинов считают дату расфасовки, а датой выпуска считают дату подписания документа о качестве.

(в ред. Изменения N 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 19.07.2021 N 635-ст)

[1] European Pharmacopoeia, 7^th Edition, Strasbourg, 2010

[2] OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, 7^th Edition, 2012

[3] World Health Organization Expert Committee on Biological Standardization. Thirty-sixth Report. - Technical Report Series 745. World Health Organization, Geneva, 1988