1. Разработан и внесен Министерством пищевой промышленности СССР.

Разработчики: А.Б. Белова, канд. техн. наук; Л.М. Заводцова, канд. техн. наук, М.А. Великоростова.

2. Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 15.05.78 N 1295.

3. Введен взамен ГОСТ 13979.7-69.

4. Ссылочные нормативно-технические документы

5. Ограничение срока действия снято по Протоколу N 3-93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 5-6-93).

6. Издание с Изменениями N 1, 2, утвержденными в декабре 1983 г., декабре 1988 г. (ИУС 3-84, 4-89).

Настоящий стандарт распространяется на жмыхи, шроты и горчичный порошок, получаемые при переработке масличных семян горчицы, и устанавливает метод определения аллилизотиоцианатов (аллилового масла).

Метод основан на ферментативном расщеплении синегрина, отгонке выделившегося аллилизотиоцианата в раствор гидроокиси аммония и титровании образовавшихся производных тиомочевины раствором марганцовокислого калия.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

1.1. Отбор проб проводят по ГОСТ 13979.0.

Разд. 2. (Исключен, Изм. N 2).

3.1. Аппаратура, реактивы и материалы

Весы лабораторные по ГОСТ 24104 <*> 2-го класса точности с погрешностью взвешивания 0,0001 г.

--------------------------------

<*> С 1 июля 2002 г. вводится в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).

Весы лабораторные по ГОСТ 24104 4-го класса точности с погрешностью взвешивания не более 0,01 г.

Шкаф сушильный лабораторный с терморегулятором, обеспечивающим погрешность температуры не более 3 °C.

Мельница лабораторная.

Плитка электрическая.

Сито с отверстиями диаметром 0,25 мм.

Термометр лабораторный 1-А(Б) 2 по ГОСТ 28498.

Термометр контактный.

Реле.

Колбы конические КН-1-500-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

Колбы мерные 2-500-2; 2-1000-2 по ГОСТ 1770.

Бюретка 6-1(2)-5 по НТД.

Бюретка 1(2)-1(2)-25(50) по НТД.

Пипетки 1-1-2; 6(7)-1(2)-5; 2-1-50 по НТД.

Цилиндры 1(3)-2(50, 100) по ГОСТ 1770.

Воронки В-36(56)-80 ХС по ГОСТ 25336.

Ступка фарфоровая с пестиком.

Фильтр ФКП-40 пор 100 ХС по ГОСТ 25336.

Шарики стеклянные диаметром 5 мм или фарфоровые осколочки.

Стаканчики СВ-14/8, 19/9 по ГОСТ 25336.

Вата стеклянная.

Установка для определения, состоящая из:

колбонагревателя с закрытым обогревом;

колбы круглодонной К-1-500-29/32 ТХС по ГОСТ 25336;

переходной трубки;

холодильника ХПТ-1-300(400)-14/23 ХС по ГОСТ 25336;

насадки;

колб конических КН-1-250-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

Аммиак водный по ГОСТ 3760, раствор с массовой долей 15%.

Кислота серная, х.ч. или ч.д.а., по ГОСТ 4204.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, раствор .

Натрий фтористый по ГОСТ 4463.

Калий йодистый по ГОСТ 4232.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат натрия), х.ч., ч.д.а., по ГОСТ 27068, раствор .

Йод по ГОСТ 4159.

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, растворы с массовой долей 0,5, 1%.

Натрий углекислый по ГОСТ 83.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор с массовой долей 40%.

Натрий щавелевокислый, х.ч., по ГОСТ 5839, перекристаллизованный.

PH-бумага универсальная индикаторная по ТУ 6-09-1181.

Спирт этиловый, ректификованный, технический по ГОСТ 18300.

Спирт амиловый по ТУ 6-09-3467.

Асбест.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Фильтры бумажные с красной полосой по ТУ 6-09-1676.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

3.2. Подготовка к анализу

3.2.1. Для приготовления водного раствора марганцевокислого калия , 3,16 г , взвешенного на весах 2-го класса точности, растворяют в 1000 см3 дистиллированной воды, доводят раствор до кипения и оставляют на 1 ч при температуре, близкой к кипению, закрыв горло колбы конической воронкой.

При выпадении осадка его отделяют фильтрованием через пористый фильтр или стеклянную вату и устанавливают массовую концентрацию раствора по щавелевокислому натрию или по тиосульфату натрия, как описано ниже.

3.2.2. Для перекристаллизации щавелевокислого натрия навеску массой 15 г, взвешенную на весах 4-го класса точности, растворяют в 500 см3 дистиллированной воды, затем подщелачивают (доводя до pH 9 - 10) 100 см3 раствора гидроокиси натрия и дают осесть не растворимым в воде веществам. Затем раствор фильтруют и выпаривают до 1/10 первоначального объема; при этом выпадают кристаллы оксалата натрия. Осадок отделяют фильтрацией через бумажный фильтр, помещают в ступку и, растерев в порошок, промывают прямо в ступке два раза дистиллированной водой. Осадок щавелевокислого натрия подсушивают между листами фильтровальной бумаги и высушивают при температуре 240 - 250 °C в сушильном шкафу.

3.2.3. Для определения массовой концентрации марганцевокислого калия по щавелевокислому натрию на весах 2-го класса точности взвешивают навеску перекристаллизованного щавелевокислого натрия массой 0,2 - 0,25 г в коническую колбу вместимостью 250 см3. Навеску растворяют в 100 см3 дистиллированной воды, нагретой до 80 - 90 °C, добавляют 10 см3 раствора серной кислоты 1:1 и медленно титруют раствором марганцевокислого калия до слабо-розового окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин.

Поправку к массовой концентрации раствора K вычисляют по формуле

где m - масса щавелевокислого натрия, г;

V - объем раствора , израсходованный на титрование щавелевокислого натрия, см3;

0,0067 - масса щавелевокислого натрия, эквивалентная 1 см3 раствора , г.

3.2.4. Для приготовления раствора тиосульфата натрия концентрацией на весах 2-го класса точности берут навеску тиосульфата натрия массой 25 г и растворяют при комнатной температуре в 1000 см3 свежепрокипяченной и охлажденной дистиллированной воды. К полученному раствору добавляют 0,2 г углекислого натрия (соды), взвешенного на весах 4-го класса точности, и оставляют стоять 10 - 15 дней, после чего определяют его массовую концентрацию.

3.2.5. Для определения массовой концентрации тиосульфата натрия на весах 2-го класса точности берут навеску йодистого калия (не содержащего йодата) массой 2 - 2,5 г в маленькую стеклянную бюксу с пришлифованной пробкой. К навеске приливают 0,5 см3 дистиллированной воды. Так как растворение йодистого калия в воде сопровождается сильным понижением температуры, то перед взвешиванием бюксу выдерживают 15 мин в весовом шкафу. Если снаружи бюкса покроется влагой, влагу снимают фильтровальной бумагой и затем взвешивают. Отдельно на весах 4-го класса точности взвешивают около 0,4 - 0,5 г йода и осторожно переносят его во взвешенную бюксу с раствором йодистого калия. Бюксу закрывают крышкой и снова взвешивают. Массу внесенного йода рассчитывают по разнице между массой бюксы с раствором йодистого калия и иода и массой бюксы с раствором йодистого калия. Взвешенную бюксу переносят в коническую колбу вместимостью 500 см3 с пришлифованной пробкой. Для этого закрытую бюксу вводят в горло наклоненной колбы, содержащей 200 см3 дистиллированной воды и около 1 г йодистого калия, взвешенного на весах 4-го класса точности. В момент опускания бюксы на дно колбы снимают крышку с бюксы, которую также опускают в колбу. Полученный таким образом раствор йода титруют раствором тиосульфата натрия до соломенно-желтой окраски. Затем добавляют 1,5 - 2,0 см3 раствора крахмала с массовой долей 1% и титруют до полного обесцвечивания раствора.

Коэффициент поправки раствора тиосульфата натрия вычисляют по формуле

где m - масса навески йода, г;

V - объем раствора тиосульфата натрия , см3;

0,01269 - масса йода, соответствующая 1 см3 раствора тиосульфата натрия , г.

3.2.6. Для определения массовой концентрации марганцовокислого калия по тиосульфату натрия на весах 2-го класса точности берут навеску йодистого калия около 2 г и помещают в коническую колбу вместимостью 500 см3 с пришлифованной пробкой. В колбу добавляют 15 см3 дистиллированной воды, 10 см3 серной кислоты (1:5), из бюретки приливают 25 - 30 см3 раствора марганцевокислого калия, разбавляют дистиллированной водой до 200 см3 и выделившийся йод титруют тем же раствором тиосульфата натрия до соломенно-желтого окрашивания раствора. Затем добавляют 1 см3 раствора крахмала с массовой долей 1% и продолжают титрование до обесцвечивания раствора.

Параллельно проводят холостое титрование. Для этого в коническую колбу с притертой пробкой помещают 25 - 30 см3 дистиллированной воды, 5 см3 раствора серной кислоты (1:5), 2 г йодистого калия, взвешенного на весах 2-го класса точности. Смесь хорошо перемешивают, разбавляют водой до 200 см3 и выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия в присутствии раствора крахмала с массовой долей 0,5% так же, как пробу.

Коэффициент поправки к массовой концентрации раствора марганцевокислого калия вычисляют по формуле

где - объем раствора тиосульфата натрия , израсходованный на титрование пробы, см3;

- объем раствора тиосульфата натрия , израсходованный на титрование холостой пробы, см3;

- коэффициент поправки раствора тиосульфата натрия;

V - объем раствора марганцевокислого калия, израсходованный на титрование, см3.

3.2.7. Из средней пробы образца на весах 4-го класса точности взвешивают 50 - 60 г исследуемого продукта, измельчают на лабораторной мельнице и просеивают через сито с диаметром отверстий 0,25 мм до прохода 80% от массы пробы. В пробе предварительно определяют массовую долю влаги и летучих веществ по ГОСТ 13979.1.

3.3. Проведение анализа

3.3.1. В круглодонную колбу вместимостью 500 см3 помещают навеску измельченного по п. 3.2.6 продукта, массой около 5 г, взвешенную на весах 4-го класса точности. К навеске добавляют 300 см3 дистиллированной воды, 20 см3 этилового спирта и 1 г фтористого натрия, взвешенного на весах 4-го класса точности.

При анализе горчичного порошка или жмыха, прошедших тепловую обработку, этиловый спирт вносят после гидролиза синегрина.

3.3.2. При анализе шрота в колбу к навеске шрота добавляют 300 см3 дистиллированной воды, 1 г фтористого натрия, 20 см3 этилового спирта и 2,5 г семян горчицы с известным содержанием аллилизотиоцианата.

3.3.3. Горло колбы плотно закрывают пробкой, содержимое колбы перемешивают взбалтыванием и проводят ферментативное расщепление тиоглюкозидов в течение 2,5 - 3 ч при температуре 18 - 22 °C.

По окончании ферментирования колбу 2 ставят на колбонагреватель 1 в соответствии с чертежом, укутывают асбестом и присоединяют к холодильнику 4 установки с помощью переходной трубки 3.

При анализе жмыхов и шротов в колбу, во избежание вспенивания и перебросов, добавляют несколько стеклянных шариков и 0,5 см3 амилового спирта.

К нижнему концу трубки холодильника через насадку 5 присоединяют последовательно две колбы вместимостью 250 см3, приемную 6, контрольную 7. В приемную колбу приливают 30 см3, а в контрольную 15 см3 водного раствора аммиака плотностью 0,942 кг/м3.

На приемной колбе делают отметку, соответствующую объему жидкости 200 см3. Концы присоединенных с помощью шлифов к колбам 6 и 7 трубок насадки 5 должны быть погружены в раствор аммиака.

3.3.4. Включают колбонагреватель и отгоняют около 170 см3 воды вместе с летучими изотиоцианатами в приемную колбу. Затем продолжают отгонку еще 2 - 3 мин.

Летучие изотиоцианаты в приемной колбе связываются с аммиаком с образованием нелетучих тиопроизводных.

3.3.5. По окончании отгонки отсоединяют вместе с насадкой приемную и контрольную колбы, а затем выключают колбонагреватель. Это необходимо для предотвращения обратного засасывания дистиллята в холодильник и реакционную колбу.

Холодильник промывают 2 - 3 см3 дистиллированной воды, собирая промывные воды в приемную колбу.

Содержимое приемной и контрольной колб переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3, колбы ополаскивают водой и промывные воды приливают в ту же колбу. Доводят объем жидкости в мерной колбе дистиллированной водой до 500 см3, тщательно перемешивают и используют для определения изотиоцианатов.

3.3.6. Из мерной колбы отбирают 50 см3 дистиллята, вносят в коническую колбу вместимостью 250 см3 и добавляют 2,5 см3 концентрированной серной кислоты. Подготовленную пробу титруют раствором марганцевокислого калия до появления слабо-розовой, не исчезающей в течение 3 - 5 с окраски.

3.4. Обработка результатов

3.4.1. Массовую долю аллилизотиоцианата (АИТЦ) в горчичном порошке в процентах рассчитывают на абсолютно сухое вещество по формуле

где 0,002479 - масса аллилизотиоцианата, эквивалентная 1 см3 раствора , г;

- объем раствора , израсходованный на титрование пробы, см3;

- объем дистиллята, израсходованный на титрование, см3;

- исходный объем дистиллята, см3;

K - поправка к концентрации раствора ;

m - масса анализируемого образца, г;

W - массовая доля влаги и летучих веществ в анализируемом образце, %.

3.4.2. При анализе жмыха или шрота сначала вычисляют массовую долю аллилизотиоцианата, (X) в процентах, содержащегося в семенах, внесенных в жмых и шрот, при фактической масличности и влажности по формуле

Затем количество аллилизотиоцианата (A) в граммах, внесенное с этими семенами в анализируемую пробу, вычисляют по формуле:

где P - масса семян, г;

m - массовая доля аллилизотиоцианата в семенах, использованных для анализа, рассчитанная при фактической масличности и влажности, %.

Массовую долю аллилизотиоцианата в жмыхе и шроте (АИТЦ) в процентах рассчитывают на абсолютно сухое вещество по формуле

где 0,002479 - масса аллилизотиоцианата, эквивалентная 1 см3 раствора , г;

- объем раствора , израсходованный на титрование пробы, см3;

- исходный объем дистиллята, см3;

- объем дистиллята, израсходованный на титрование, см3;

K - поправка к концентрации раствора ;

A - масса аллилизотиоцианата, внесенного с семенами в качестве фермента, г;

m - масса анализируемого образца, г;

W - массовая доля влаги и летучих веществ в анализируемом образце, %.

3.4.3. За окончательный результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений.

Расхождение между двумя параллельными определениями не должно превышать 0,05%.

Все вычисления проводят с точностью до третьего десятичного знака и округляют до второго десятичного знака.

Разд. 3. (Измененная редакция, Изм. N 2).

Разд. 4. (Исключен, Изм. N 2).