(2S)-2-[(5-Гидроксипиридин-3-карбонил)амино]пентандиоат кальция гидроксид.

Содержит не менее 98,0% и не более 101,0% гидроксиникотиноилглутамата кальция C₁₁H₁₂CaN₂O₇ в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте разведенной 8,3%, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксиникотиноилглутамата кальция.

2. Качественная реакция. В 10 мл воды растворяют 0,1 г субстанции. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на кальций (ОФС "Общие реакции на подлинность").

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном Y₆ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH. От 5,5 до 7,5 (0,5% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. Растворяют 2,8 г калия дигидрофосфата и 1,6 г тетрабутиламмония гидросульфата в 900 мл воды, прибавляют 2 мл триэтиламина и доводят значение pH фосфорной кислотой до 3,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл водорода пероксида раствора 3% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор кипятят на водяной бане в течение 15 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками гидроксиникотиноилглутамата и примеси с относительным временем удерживания около 0,9 должно быть не менее 2.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (A_S) гидроксиникотиноилглутамата должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика гидроксиникотиноилглутамата должно быть не более 2,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гидроксиникотиноилглутамата, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Вода. Не более 8,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,1% (ОФС "Сульфаты", метод 1). В 50 мл воды растворяют 0,5 г субстанции. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,02% (ОФС "Хлориды"). В 50 мл воды растворяют 0,5 г субстанции. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 14 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 5 мг субстанции в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 250 мл воды, прибавляют 10 мл аммония хлорида буферного раствора pH 9,5 и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до сине-фиолетового окрашивания (индикатор - 50 мг хромового темно-синего индикаторной смеси).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 16,22 мг гидроксиникотиноилглутамата кальция C₁₁H₁₂CaN₂O₇.

В защищенном от света месте.