ОПРЕДЕЛЕНИЕ

[(2R,3S)-3-Метилоксиран-2-ил]фосфонат динатрия.

Фосфомицин динатрия продуцируется некоторыми штаммами Streptomyces fradiae или может быть получен другим способом.

Содержит не менее 95,0% и не более 101,0% фосфомицина динатрия C₃H₅Na₂O₄P в пересчете на безводное и свободное от примеси A и остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

<*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в спирте 96% и метиленхлориде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фосфомицина динатрия.

Хлорной кислоты раствор 25%. К 45 мл воды прибавляют 25 мл хлорной кислоты и перемешивают.

Натрия гидрокарбоната насыщенный раствор. К 10,0 г натрия гидрокарбоната прибавляют 100 мл воды и перемешивают.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 3 мл хлорной кислоты растворе 25%, прибавляют 1,0 мл 0,1 М раствора натрия перйодата, нагревают на водяной бане в течение 30 мин, охлаждают и прибавляют 50 мл воды. Полученный раствор нейтрализуют натрия гидрокарбоната насыщенным раствором и прибавляют 1,0 мл свежеприготовленного калия йодида раствора 40%.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Испытуемый раствор должен быть бесцветным, раствор в контрольном опыте должен быть оранжевого или желто-оранжевого цвета.

3. Качественная реакция. К 8 мг субстанции прибавляют 2 мл воды, 1 мл хлорной кислоты и 2 мл 0,1 М раствора натрия перйодата, нагревают на водяной бане в течение 10 мин, прибавляют 1 мл аммония молибдата раствора в 15% серной кислоте и 1 мл аминогидроксинафталинсульфоновой кислоты раствора и оставляют на 30 мин; раствор должен окраситься в синий цвет.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию A на натрий (ОФС "Общие реакции на подлинность").

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -13,0 до -15,0 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (5% раствор субстанции в воде, ОФС "Оптическое вращение"). Определение проводят при длине волны 405 нм, используя ртутную лампу.

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды, свободной от диоксида углерода, должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен быть окрашен не более эталона B₉ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH раствора. От 9,0 до 10,5 (5% раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Примесь A. Не более 1,0% в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество. Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

0,005 М раствор натрия перйодата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл 0,1 М раствора натрия перйодата и доводят объем раствора водой до метки.

0,0025 М раствор натрия арсенита. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 25 мл 0,1 М раствора натрия арсенита и доводят объем раствора водой до метки.

В колбу с притертой пробкой помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 100 мл воды, прибавляют 50 мл 0,5 М фталатного буферного раствора pH 6,4 и 5,0 мл 0,005 М раствора натрия перйодата, закрывают, встряхивают и оставляют в защищенном от света месте на 90 мин. Прибавляют 10 мл свежеприготовленного калия йодида раствора 40%, закрывают колбу и перемешивают в течение 2 мин. Полученный раствор титруют 0,0025 М раствором натрия арсенита до слабо-желтой окраски, прибавляют 2 мл крахмала раствора 1%, содержащего 0,01% ртути (II) йодида, и медленно титруют до исчезновения синей окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание примеси A в субстанции в процентах в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где V₁ - объем 0,0025 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;

V₀ - объем 0,0025 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;

a₁ - навеска субстанции, мг;

K - поправочный коэффициент 0,0025 М раствора натрия арсенита;

0,25 - количество примеси A, мг, соответствующее 1 мл 0,0025 М раствора натрия арсенита, мг/мл;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

Примечание

Примесь A: (2,3-дигидроксипропил)фосфоновая кислота [84954-80-3].

Вода. Не более 1,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь пиридин - этиленгликоль 1:3.

Тяжелые металлы. Не более 0,002% (ОФС "Тяжелые металлы", метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Аномальная токсичность. Препарат должен быть нетоксичным (ОФС "Аномальная токсичность"). Тест-доза - 15 мг фосфомицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно в течение 30 с. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг фосфомицина (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС "Стерильность").

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Хлорной кислоты раствор 50%. К 20 мл воды прибавляют 50 мл хлорной кислоты.

В колбу с притертой пробкой помещают 0,12 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл 0,1 М раствора натрия перйодата, прибавляют 5 мл хлорной кислоты раствора 50%, перемешивают. Нагревают на водяной бане при температуре 37 °C в течение 105 мин, прибавляют 50 мл воды и немедленно доводят pH раствора натрия гидрокарбоната насыщенным раствором до 6,40. К полученному раствору прибавляют 10 мл свежеприготовленного калия йодида раствора 40%, закрывают колбу и перемешивают в течение 2 мин. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором натрия арсенита до слабо-желтой окраски, прибавляют 2 мл крахмала раствора 1%, содержащего 0,01% ртути (II) йодида, и титруют до исчезновения синей окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание фосфомицина динатрия C₃H₅Na₂O₄P в процентах в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Y) вычисляют по формуле:

где V₁ - объем 0,1 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;

V₀ - объем 0,1 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;

a₁ - навеска субстанции, мг;

K - поправочный коэффициент 0,1 М раствора натрия арсенита;

9,1 - количество фосфомицина динатрия, мг, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия арсенита, мг/мл;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

X - содержание примеси A в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной стерильной упаковке в защищенном от света месте.