(2S)-2-Амино-4-({[(2S,3S,4R,5R)-5-(6-амино-9H-пурин-9-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метил}(метил)сульфанийил)бутаноат - бутан-1,4-дисульфоновая кислота (1:1,65).

Содержит не менее 95,0% и не более 105,0% адеметионина бутандисульфоната C₁₅H₂₂N₆O₅S·1,65C₄H₁₀O₆S₂ в пересчете на безводное вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок с характерным запахом.

<*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в формамиде, практически нерастворим в спирте 96%.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика адеметионина на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната (раздел "Количественное определение").

3. Ионообменная хроматография (ОФС "Ионообменная хроматография"). Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика 1,4-бутандисульфоновой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца динатрия бутандисульфоната.

Все растворы хранят при температуре 5 °C и используются свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 191 мг натрия карбоната безводного, 143 мг натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 20 мг фармакопейного стандартного образца динатрия бутандисульфоната, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 37 мг натрия сульфата безводного, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 мл полученного раствора и доводят объем раствора стандартным раствором до метки.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. 1,4-бутансульфонат - 1 (около 13 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R) между пиками 1,4-бутансульфоната и сульфат-иона должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (A_S) 1,4-бутансульфоната должен быть не менее 0,8 и не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика 1,4-бутандисульфоновой кислоты должно быть не более 3,0% (6 введений).

Прозрачность раствора. Раствор 1,52 г субстанции в 10 мл L-лизина растворе 6,8% должен выдерживать сравнение с эталоном II (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

L-Лизина раствор 6,8%. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,4 г L-лизина, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном Y₄ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH. От 1,0 до 3,0 (0,4% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

S,S-Изомер адеметионина. Не менее 55%. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы хранят в защищенном от света месте и используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 189,2 г аммония формиата в 700 мл воды, доводят значение pH раствора муравьиной кислотой безводной до 5,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. S,S-изомер адеметионина - 1 (около 19 мин); R,S-изомер адеметионина - около 1,15.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками S,S- и R,S-изомеров адеметионина должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (A_S) S,S-изомера адеметионина должен быть не более 2,0;

- фактор асимметрии пика (As) R,S-изомера адеметионина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика S,S-изомера адеметионина должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание S,S-изомера адеметионина в препарате в процентах (Xi) вычисляют согласно методу нормирования (ОФС "Хроматография").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы хранят в защищенном от света месте при температуре 2 - 8 °C и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 12,612 г аммония формиата и 1,0 г натрия октансульфоната в 700 мл воды, доводят значение pH раствора муравьиной кислотой безводной до 2,8. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил - метанол - буферный раствор 5:250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца аденина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аденина, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор метилтиоаденозина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) метилтиоаденозина, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, 1,0 мл раствора стандартного образца аденина, 1,0 мл раствора стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина, 4,0 мл раствора метилтиоаденозина и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Адеметионин - 1; аденин - около 0,67; S-аденозил-L-гомоцистеин - около 0,74; метилтиоаденозин - около 2,0; S-аденозилметионинамин - около 3,0.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика адеметионина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (R_S) между пиками аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (A_S) адеметионина 1,4-бутандисульфоната должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната должно быть не более 5,0% (6 введений).

Содержание метилтиоаденозина в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца метилтиоаденозина, мг;

P - содержание метилтиоаденозина в фармакопейном стандартном образце метилтиоаденозина, %.

W - содержание воды в субстанции, %;

Содержание аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина, соответственно, мг;

P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце соответствующей примеси, %;

W - содержание воды в субстанции, %.

Содержание S-аденозилметионинамина и любой другой примеси в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика S-аденозилметионинамина или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика адеметионина на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг;

P - содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната, %;

W - содержание воды в субстанции, %.

- S-аденозил-L-гомоцистеин - не более 0,5%;

- метилтиоаденозин - не более 2,0%;

- S-аденозилметионинамин - не более 1,75%;

- аденин - не более 0,5%;

- любая другая примесь - не более 0,1%;

- сумма примесей - не более 5,0%.

Вода. Не более 5,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь формамид - метанол 1:1.

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

<**> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг адеметионина 1,4-бутандисульфоната (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<**> Проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси. Другие примеси" со следующими уточнениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната:

- фактор асимметрии пика (A_S) адеметионина 1,4-бутандисульфоната должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната должно быть не более 1,0% (6 введений).

Содержание адеметионина бутандисульфоната C₁₅H₂₂N₆O₅S·1,65C₄H₁₀O₆S₂ в субстанции в пересчете на безводное вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг;

P - содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната, %;

W - содержание воды в субстанции, %.

В плотно укупоренной упаковке, при температуре 2 - 8 °C.