Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 27 июня 1985 г. N 2043 срок действия установлен

Разработан Министерством заготовок СССР.

Исполнители: И.П. Дьяков, Н.В. Лисицына, Р.А. Пухова, Л.А. Николенко, К.И. Уралов, В.Е. Маевский, Э.Г. Нечаева, Г.К. Юсупова, Г.А. Таланов, К.Н. Сон, А.М. Немцова.

Внесен Министерством заготовок СССР.

Зам. министра М.Л. Тимошишин.

Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 27 июня 1985 г. N 2043.

Настоящий стандарт устанавливает методы потенциометрического и объемного титрования для определения кислотного числа жира в комбикормах, а также в комбикормовом сырье.

1.1. Отбор проб - по ГОСТ 13496.0-80, ГОСТ 13979.0-86, ГОСТ 17681-82 и ГОСТ 8285-91.

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

Сущность метода заключается в потенциометрическом титровании свободных жирных кислот, извлеченных из продукта экстрагированием смесью хлороформа и этилового спирта.

2.1. Аппаратура, материалы, реактивы

Для проведения испытания применяют:

мельницу лабораторную марки ЛЗМ;

(в ред. Изменения N 1, введенного Постановлением Госстандарта СССР от 12.12.1986 N 3818)

сито металлическое с отверстиями диаметром 1 мм;

весы лабораторные по ГОСТ 24104-88 не ниже 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 и 500 г или другие весы того же класса точности;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

аппарат для встряхивания жидкости в сосудах типа АВУ-1;

вакуум-насос Комовского;

мешалку магнитную типа ММ-3М;

pH-метр типа pH-673 или мономер универсальный типа ЭВ-74;

электрод стеклянный ЭСЛ-43-07;

электрод вспомогательный хлорсеребряный ЭВЛ-1МЗ;

баню песочную или лампу инфракрасную мощностью 500 Вт;

эксикатор по ГОСТ 25336-82;

бюксы металлические диаметром 50 мм высотой 38 мм;

бюретки исполнений 1, 2, 3 вместимостью 10 и 25 см³ 2-го класса точности по ГОСТ 29251-91;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

колбу с тубусом вместимостью 250 см³ по ГОСТ 25336-82;

колбы конические вместимостью 250 см³ по ГОСТ 25336-82;

стаканы стеклянные вместимостью 50 см³ по ГОСТ 25336-82;

колбы мерные исполнений 1, 2, 3, 4 вместимостью 100 и 1000 см³ 2-го класса точности по ГОСТ 1770-74;

пипетки исполнений 2, 3 вместимостью 50 см³ 2-го класса точности по ГОСТ 29251-91;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

воронки Бюхнера 4 или 5 по ГОСТ 9147-80;

ступку фарфоровую с пестиком по ГОСТ 9147-80;

бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026-76;

калия гидроокись по ГОСТ 24363-60, раствор концентрации c(KOH) = 0,1 моль/дм³ (0,1 н.), или фиксанал;

кислоту серную по ГОСТ 4204-77, раствор концентрации c(1/2H₂SO₄) = 0,1 моль/дм³ (0,1 н.), готовят по ГОСТ 25794.1-83, или фиксанал;

хлороформ технический по ГОСТ 20015-88;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

спирт этиловый технический по ГОСТ 17299-78 или спирт этиловый для бутадиена по ОСТ 38.02386-85, или спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300-87;

(в ред. Изменения N 2, утв. Постановлением Госстандарта СССР от 21.06.1991 N 956, в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

фенолфталеин по ТУ 6-09-5360-88, раствор с массовой долей 1%, готовят по ГОСТ 4919.1-77;

(в ред. Изменения N 2, утв. Постановлением Госстандарта СССР от 21.06.1991 N 956)

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

(в ред. Изменения N 2, утв. Постановлением Госстандарта СССР от 21.06.1991 N 956)

Примечание. Допускается использовать мерную посуду и другие средства измерения, имеющие такие же или лучшие метрологические характеристики.

2.2. Подготовка к испытанию

2.2.1. Подготовка проб

Из объединенной пробы комбикормов или сырья выделяют среднюю пробу, масса которой должна быть не менее 500 г. Пробу измельчают на мельнице и просеивают через сито. Трудноизмельчаемый остаток на сите после измельчения ножницами или в ступе добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

(в ред. Изменения N 1, введенного Постановлением Госстандарта СССР от 12.12.1986 N 3818)

Подготовленные для испытаний пробы хранят в стеклянной таре или пластмассовой банке в сухом месте.

2.2.2. Приготовление раствора гидроокиси калия концентрации c(KOH) = 0,1 моль/дм³ (0,1 н.)

Навеску гидроокиси калия массой 5,611 г переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, растворяют в этиловом спирте и доводят объем спиртом до метки.

Коэффициент поправки спиртового раствора гидроокиси калия устанавливают по раствору серной кислоты концентрации c(1/2H₂SO₄) = 0,1 моль/дм³. Для этого в колбу приливают 20 см³ серной кислоты, добавляют 2 капли фенолфталеина и титруют приготовленным раствором гидроокиси калия до бледно-розовой окраски. Объем раствора гидроокиси калия, израсходованный на титрование раствора серной кислоты, вычисляют как среднее арифметическое результатов трех определений.

Коэффициент поправки раствора гидроокиси калия (K) вычисляют по формуле

где V₁ - объем раствора серной кислоты, взятый для титрования, см³;

K₁ - коэффициент поправки раствора серной кислоты;

V - объем раствора гидроокиси калия, израсходованный на титрование 20 см³ раствора серной кислоты, см³.

2.2.3. Приготовление экстрагирующей смеси

Смешивают 1 часть этилового спирта и 2 части хлороформа. В смесь добавляют пять капель раствора фенолфталеина и для устранения примесей, возможных в экстрагирующей смеси, нейтрализуют раствором гидроокиси калия до слабо-розовой окраски, не исчезающей в течение 30 с.

2.3. Проведение испытания

2.3.1. При испытании комбикормов или шротов берут навеску массой 25 г, при испытании мясо-костной муки - массой 10 г, при испытании белково-жирового концентрата или рыбной муки - массой 2 г. Навеску переносят в колбу вместимостью 250 см³, приливают 80 см³ спирто-хлороформной смеси. Полученную суспензию встряхивают в течение 5 мин на аппарате для встряхивания, затем фильтруют с помощью вакуумного насоса, используя при этом воронку Бюхнера с бумажным фильтром и колбу с тубусом.

Профильтрованный экстракт переносят в колбу вместимостью 100 см³. В нее же добавляют остатки экстракта со стенок колбы с тубусом, смывая их два раза 10 см³ спирто-хлороформной смеси. Содержимое колбы тщательно перемешивают. Для титрования в стакан вместимостью 50 см³ пипеткой вносят 30 см³ экстракта и опускают туда же смесительный стержень. Стакан устанавливают на магнитную мешалку, включают ее и затем опускают в стакан электроды pH-метра.

Титрование экстракта раствором гидроокиси калия проводят до эквивалентной точки в интервале pH от 10 до 12.

После каждого определения электроды обмывают спирто-хлороформной смесью.

2.3.2. Для определения массы жира одновременно с отбором экстракта для титрования отбирают еще 15 см³ экстракта и помещают его в предварительно высушенную до постоянной массы металлическую бюксу. Бюксу с экстрактом помещают на песочную баню, нагретую до 200 °C, и выпаривают до полного исчезновения запаха хлороформа (8 - 10 мин). Наружную поверхность бюксы тщательно очищают от песка, бюксу охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

Для сушки жира используют также инфракрасную лампу. Для этого бюксу с экстрактом помещают на асбест под центр лампы на расстоянии 90 мм от нее и сушат в течение 15 мин. Затем бюксу закрывают крышкой, выдерживают в эксикаторе в течение 10 - 15 мин и взвешивают.

Массу жира, содержащегося в 30 см³ экстракта, взятого для титрования, вычисляют по разности массы бюксы с высушенным жиром и пустой бюксы и умножают на 2.

2.4. Обработка результатов

Кислотное число жира (X) в миллиграммах гидроокиси калия на 1 г жира вычисляют по формуле

где 5,611 - массовая концентрация гидроокиси калия в растворе молярной концентрации 0,1 моль/дм³, мг/см³;

K - коэффициент поправки раствора гидроокиси калия;

V - объем раствора гидроокиси калия, пошедший на титрование, см³;

m - масса жира, г.

За результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений.

Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений (d) при вероятности P = 0,95 не должны превышать

где - среднее арифметическое результатов двух параллельных определений.

Вычисления производят с точностью до второго десятичного знака и округляют до первого десятичного знака.

Погрешность методики выполнения измерений составляет +/- 0,4 мг.

Сущность метода заключается в объемном титровании свободных жирных кислот, извлеченных из продукта экстрагированием эфиром или хлороформом в стеклянной колонке.

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

3.1. Аппаратура, материалы, реактивы

Для проведения испытания применяют:

мельницу лабораторную марки ЛЗМ;

(в ред. Изменения N 1, введенного Постановлением Госстандарта СССР от 12.12.1986 N 3818)

сито металлическое с отверстиями диаметром 1 мм;

абзац исключен с 1 июля 2000 года. - Изменение N 3, введенное Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст;

весы лабораторные по ГОСТ 24104-88 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 и 500 г;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

стеклянную колонку вместимостью 250 - 500 см³, диаметром 50 мм, высотой 230 - 250 мм с оттянутым концом;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

микробюретки 1-1/2, 3/-2-5-0,02 по ГОСТ 29251-91, исполнения 1, 1, 3, 2-го класса точности, вместимостью 5 см³, с ценой деления 0,1 см³;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

колбы конические вместимостью 100 - 150 см³ по ГОСТ 25336-82;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

цилиндр мерный исполнений 1, 3 вместимостью 50 см³ или мензурка вместимостью 50 см³ по ГОСТ 1770-74;

(в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

баню водяную;

абзац исключен с 1 июля 2000 года. - Изменение N 3, введенное Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст;

колбы мерные исполнений 1, 2, 3, 4 вместимостью 100 и 1000 см³ 2-го класса точности по ГОСТ 1770-74;

палочки стеклянные;

бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026-76;

вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556-81;

чашки фарфоровые выпарительные по ГОСТ 9147-80;

абзац исключен с 1 июля 2000 года. - Изменение N 3, введенное Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст;

калия гидроокись по ГОСТ 24363-80, раствор концентрации c(KOH) = 0,1 моль/дм³, или фиксанал;

натрия гидроокись по ГОСТ 4328-77, раствор концентрации c(NaOH) = 0,1 моль/дм³, или фиксанал;

кислоту серную по ГОСТ 4204-77, раствор концентрации c(1/2H₂SO₄) = 0,1 моль/дм³ (0,1 н.) готовят по ГОСТ 25794.1-83, или фиксанал;

эфир серный;

спирт этиловый технический по ГОСТ 17299-78 или спирт этиловый для бутадиена по ОСТ 38.02386-85, или спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300-87;

(в ред. Изменения N 2, утв. Постановлением Госстандарта СССР от 21.06.1991 N 956, в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

фенолфталеин по ТУ 6-09-5360-88 или тимолфталеин; раствор с массовой долей 1% готовят по ГОСТ 4919.1-77;

(в ред. Изменения N 2, утв. Постановлением Госстандарта СССР от 21.06.1991 N 956)

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72;

(в ред. Изменения N 2, утв. Постановлением Госстандарта СССР от 21.06.1991 N 956)

хлороформ технический по ГОСТ 20015-88.

(введено Изменением N 2, утв. Постановлением Госстандарта СССР от 21.06.1991 N 956)

Примечание. Допускается использовать мерную посуду и другие средства измерения, имеющие такие же или лучшие метрологические характеристики.

3.2. Подготовка проб - по п. 2.2.1.

3.2.1. Приготовление водного раствора гидроокиси калия концентрации c(KOH) = 0,1 моль/дм³ по п. 2.2.2 с использованием в качестве растворителя вместо этилового спирта дистиллированной воды.

3.2.2. Приготовление раствора гидроокиси натрия концентрации c(NaOH) = 0,1 моль/дм³

Навеску гидроокиси натрия массой 4 г переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем воды до метки.

Коэффициент поправки раствора гидроокиси натрия устанавливают по раствору серной кислоты концентрации c(1/2H₂SO₄) = 0,1 моль/дм³.

В колбу приливают 20 см³ серной кислоты, добавляют 2 капли фенолфталеина и титруют раствором гидроокиси натрия до бледно-розовой окраски.

Объем раствора гидроокиси натрия, израсходованный на титрование раствора серной кислоты, вычисляют как среднее арифметическое результатов трех определений.

Коэффициент поправки раствора гидроокиси натрия вычисляют, как указано в п. 2.2.2.

3.2.3. Исключен с 1 июля 2000 года. - Изменение N 3, введенное Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст.

3.2.4. Приготовление спирто-эфирной смеси

(в ред. Изменения N 1, введенного Постановлением Госстандарта СССР от 12.12.1986 N 3818)

Смешивают 2 части эфира и 1 часть спирта, тщательно перемешивают.

3.2.5. Подготовка установки для экстракции

В стеклянную колонку вместимостью 250 - 500 см³ последовательно помещают ватный тампон, два кружка, вырезанных из фильтровальной бумаги диаметром, несколько превышающим диаметр колонки, затем снова ватный тампон. Общая высота фильтра должна быть около 50 мм. Налитый в колонку эфир или хлороформ должен вытекать из нее со скоростью 40 - 80 капель в минуту.

(п. 3.2.5 в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

3.3. Проведение испытания

При испытании мясокостной и рыбной муки, белково-жирового концентрата берут навеску массой 20 - 30 г, при испытании комбикормов и кормов растительного происхождения - массой 100 г. Навеску переносят в стеклянную колонку, подготовленную по п. 3.2.5, слегка уплотняют (постукиванием пальцами по колонке), на выровненную поверхность исследуемого продукта помещают небольшой кусок ваты. Колонку закрепляют в штативе и под нее устанавливают фарфоровую выпарительную чашку.

В колонку постепенно приливают серный эфир или хлороформ. При испытании мясокостной и рыбной муки, белково-жирового концентрата приливают около 80 см³ эфира или хлороформа, при испытании комбикормов и кормов растительного происхождения - 200 см³. Завершение экстракции жира контролируют, смачивая фильтровальную бумагу вытекающей каплей. Экстракция считается законченной при отсутствии на бумаге жирового пятна. Чашку с экстрактом ставят на водяную баню и выпаривают до полного удаления запаха применяемого экстрагирующего вещества или оставляют чашку с экстрактом в вытяжном шкафу на ночь для самопроизвольного его испарения.

Из чашки берут навеску жира массой 0,2 - 0,3 г и переносят в сухую коническую колбу вместимостью 100 - 150 см³, предварительно взвешенную, после внесения жира колбу вновь взвешивают. Разница между первым и вторым взвешиванием дает величину навески. Взвешивание проводят на аналитических весах 2-го класса точности. Погрешность взвешивания не более 0,002 г.

Затем в колбу приливают 50 см³ спирто-эфирной смеси, причем вначале приливают 25 см³ смеси и стеклянной палочкой растирают, размешивают навеску жира до полного его растворения, оставшейся частью смеси смывают стеклянную палочку, содержимое колбы взбалтывают, добавляют несколько капель соответствующего индикатора (раствор фенолфталеина - при испытании жиров, имеющих светлую окраску, раствор тимолфталеина - при испытании жиров, имеющих темную окраску) и быстро титруют водным раствором гидроокиси калия или гидроокиси натрия до отчетливого изменения окраски индикатора (фенолфталеина - в розовую, тимолфталеина - в синюю).

(п. 3.3 в ред. Изменения N 3, введенного Постановлением Госстандарта России от 17.11.1999 N 412-ст)

3.4. Обработка результатов

Обработка результатов проводится по п. 2.4.