Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

1 ПОДГОТОВЛЕН Акционерным обществом "Инновационный научно-производственный центр текстильной и легкой промышленности" (АО "ИНПЦ ТЛП") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 13 декабря 2022 г. N 62)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 декабря 2022 г. N 1581-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 17234-2-2022 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июня 2023 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 17234-2:2011 "Кожа. Химические испытания для определения содержания некоторых азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоазобензола" ("Leather - Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers - Part 2: Determination of 4-aminoazobenzene", IDT).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 Некоторые элементы настоящего стандарта могут являться объектами патентных прав

Настоящий стандарт дополняет ISO 17234-1 и устанавливает специальный метод обнаружения в продукции некоторых азокрасителей, способных высвобождать 4-аминоазобензол. Данный метод также позволяет обнаружить 4-аминоазобензол (краситель сольвентный Желтый 1), уже присутствующий в качестве свободного амина в продукции, не прошедшей восстановительное расщепление.

Азокрасители, способные образовывать 4-аминоазобензол, генерируют в условиях, установленных в ISO 17234-1 для аминов, анилина и 1,4-фенилендиамина. Наличие красителей на основе 4-аминоазобензола невозможно надежно установить без дополнительной информации (например, химического состава использованного красителя) или без специальной методики.

Данным методом невозможно определить количественное содержание использованных азокрасителей, способных выделять в процессе восстановительного расщепления азогрупп(ы) один или несколько других ароматических аминов, приведенных в приложении XVII к Регламенту ЕС 1907/2006 Европейского парламента и Совета по регистрации, оценке, санкционированию и ограничению применения химических веществ [Council on the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (Регламент REACH)], за исключением 4-аминоазобензола.

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты [для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения)].

ISO 2418, Leather - Chemical, physical and mechanical and fastness tests - Sampling location (Кожа. Химические, физические и механические испытания и испытания на устойчивость. Установление места отбора образцов)

ISO 4044, Leather - Chemical tests - Preparation of chemical test samples (Кожа. Химические испытания. Подготовка образцов для химических испытаний)

Некоторые азокрасители способны высвобождать при восстановительном расщеплении азогрупп(ы) вещество 4-аминоазобензол, которое запрещено согласно приложению XVII Регламента (ЕС) N 1907/2006 Европейского Парламента и Совета, касающегося правил регистрации, оценки, санкционирования и ограничения химических веществ (REACH).

После обезжиривания образец кожи обрабатывают дитионитом натрия в щелочном растворе при температуре 40 °C в закрытом сосуде. 4-аминоазобензол, который высвобождается в процессе, с помощью жидкостной экстракции переводят в фазу трет-бутилметилового эфира. Аликвоту фазы трет-бутилметилового эфира используют для анализа.

Обнаружение и определение 4-аминоазобензола выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии [ВЭЖХ (HPLC)] с использованием фотометрического детектора на диодной матрице [ФДМД (DAD)] или масс-селективного детектора [ВЭЖХ/МСД (HPLC/MS)], методом капиллярной газовой хроматографии с помощью масс-селективного детектора [КГХ/МСД (GC/MS)] или методом капиллярного электрофореза с помощью фотометрического детектора на диодной матрице [КЭ/ФДМД (CE/DAD)], качественно с помощью метода тонкослойной хроматографии или высокоэффективной тонкослойной хроматографии [ТСХ, ВЭТСХ (TLC, HPTLC)].

Если 4-аминоазобензол обнаруживают одним хроматографическим методом, то подтверждение выполняют, используя один или несколько альтернативных методов. Количественное определение аминов проводят методом [ВЭЖХ/ФДМД (HPLC/DAD)].

5.1 Соединения 4-аминоазобензола относят к потенциальным канцерогенам для человека.

Взаимодействие с этими веществами, их утилизацию необходимо проводить в строгом соответствии с национальными правилами по здравоохранению и безопасности.

5.2 Пользователь несет ответственность за соблюдение техники безопасности при использовании данного метода испытаний и сопутствующих материалов. Необходимо проконсультироваться с изготовителями относительно получения дополнительной информации, например паспорта безопасности материалов, а также прочих рекомендаций.

5.3 Рекомендуется следовать правилам надлежащей лабораторной практики. В любом из помещений лаборатории при работе с порошкообразными красителями и 4-аминоазобензолом необходимо пользоваться защитными очками, противопылевыми респираторами и одноразовыми перчатками.

5.4 Пользователи должны соблюдать требования национальных и местных правил техники безопасности.

Используют стандартное лабораторное оборудование, в частности следующее.

6.1 Подходящий для реакции сосуд из термостойкого стекла с газонепроницаемой пробкой.

6.2 Нагреватель, обеспечивающий температуру (40 +/- 2) °C.

6.3 Сепаратор со скоростью вращения более 3000 об/мин.

6.4 Ротационный вакуумный испаритель.

6.5 Пипетки требуемого размера или разные.

6.6 Ультразвуковая баня не менее 160 Вт, с регулируемым нагревом.

6.7 Горизонтальный встряхиватель с достаточной частотой 5 с^-1, длиной пути от 2 до 5 см.

6.8 Полипропиленовый или полиэтиленовый шприц объемом 2 см³.

6.9 Приборное оборудование для нижеперечисленных методов

6.9.1 Газовая хроматография (ГХ) с масс-селективным детектором (МСД).

6.9.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) с градиентом элюирования и фотометрическим детектором на диодной матрице (ФДМД) или масс-селективным детектором (МСД).

6.9.3 Тонкослойная хроматография (ТСХ) или высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ) с соответствующим детектированием.

6.9.4 Капиллярный электрофорез (КЭ) с детектором ФДМД.

Примечание - Описание оборудования приведено в приложении A.

Если нет иных указаний, применяют химические вещества аналитической чистоты.

7.1 Гидроксид натрия.

7.2 Водный раствор дитионита натрия, <1>, свежеприготовленный, для использования непосредственно после выдерживания в течение 1 ч в закрытом сосуде.

--------------------------------

<1> - концентрация по массе (масса вещества на единицу массы смеси).

7.3 Раствор гидроксида натрия, w = 2% <2>.

--------------------------------

<2> w - процентная концентрация по массе (массовая доля).

7.4 н-гексан.

7.5 трет-бутилметиловый эфир (ТБМЭ).

7.6 Хлорид натрия.

7.7 4-аминоазобензол, сверхчистый.

7.8 Внутренние стандарты для газовой хроматографии (ИС), например:

- ИС 1: нафталин-d 8 (CAS No.: 1146-65-2);

- ИС 2: 2, 4, 5-трихлоранилин (CAS No.: 636-30-6);

- ИС 3: бензидин-d 8 (CAS No.: 92890-63-6);

- ИС 4: антрацен-d 10 (CAS No.: 1719-06-8).

7.9 Стандартные растворы

7.9.1 Раствор внутреннего стандарта (ИС) в трет-бутилметиловом эфире, p = 10,0 мкг/см³.

7.9.2 Калибровочный раствор 4-аминоазобензола для проверки методики эксперимента и приготовления калибровочных растворов 4-аминоазобензола в метаноле, .

Отбор образцов проводят в соответствии с ISO 2418, измельчение образцов кожи - в соответствии с ISO 4044. Если отбор образцов в соответствии с ISO 2418 невозможен (например, извлечение из готовых изделий - обуви, одежды, и т.п.), то способ отбора образцов должен быть описан в протоколе испытаний. Все следы клея должны быть удалены механическим способом.

В случае если образец отбирают из лоскутного кожаного изделия с разноцветным рисунком, то образцы различных цветов по возможности анализируют отдельно. Для изделий, изготовленных из кожи различного качества, образцы кожи различного качества анализируют отдельно.

Кожу массой более 1,0 г, порезанную кусочками (площадью 25 мм²), или измельченный образец кожи помещают в закрытый сосуд (6.1) вместимостью 50 см³, обрабатывают порцией 20 см³ н-гексана (7.4) в ультразвуковой бане (6.6) при температуре (40 +/- 2) °C в течение 20 мин.

Декантируют слой н-гексана с образца кожи. Следует избегать потерь частиц кожи во время декантирования. Сразу после декантирования обрабатывают образец так же, как до этого, порцией 20 см³ н-гексана. Выпаривают остаток н-гексана из открытого сосуда по меньшей мере в течение ночи.

К образцу добавляют 9,0 см³ раствора гидроксида натрия (7.3). Плотно закупоривают реакционный сосуд и энергично встряхивают. Все волокна материала кожи должны быть смочены.

Затем с помощью шприца (6.8) добавляют 1,0 см³ водного раствора дитионита натрия (7.2). Образец и восстановительный раствор энергично встряхивают и выдерживают при температуре (40 +/- 2) °C в течение точного интервала времени - 30 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры (от 20 °C до 25 °C) в течение 1 мин водой или, если необходимо, охлаждающей смесью льда, воды и соли.

Добавляют 5,0 см³ трет-бутилметилового эфира (7.5) или 5,0 см³ раствора внутреннего стандарта (7.9.1) в реакционный раствор. После этого добавляют 7,0 г хлорида натрия (7.6) и встряхивают смесь непрерывно в течение 45 мин, с частотой встряхивания f = 5 с^-1 (6.7). Для полного разделения фаз смесь после встряхивания центрифугируют.

Время задержки между охлаждением и встряхиванием не должно превышать 5 мин.

Для последующего анализа переносят аликвоту фазы трет-бутилметилового эфира в подходящую виалу, которую немедленно закрывают. Выполняют обнаружение и определение 4-аминоазобензола хроматографическими методами, перечисленными в 6.9.

РЕКОМЕНДАЦИЯ - Для некоторых методов анализа может потребоваться концентрирование экстракта, полученного по 9.3, или перенос его в другой подходящий растворитель (например, метанол). Рекомендуется концентрировать экстрагированную фазу трет-бутилметилового эфира до примерно 1,0 см³ (не досуха) в вакуумном ротационном испарителе при небольшом разрежении и температуре не более 50 °C. Затем удалить остаток растворителя очень осторожно, без вакуума, посредством слабого потока инертного газа.

Примечания

1 Удаление растворителя (концентрирование в вакуумном ротационном испарителе, выпаривание досуха) может привести к значительным потерям 4-аминоазобензола, если выполнять процедуру без контроля.

2 По возможности, стараются избегать замены растворителя, поскольку в процессе анализа значительные потери анализируемого вещества могут произойти за счет матричных эффектов.

Добавляют 5,0 см³ трет-бутилметилового эфира (7.5) или 5,0 см³ раствора внутреннего стандарта (7.9.1) к 0,1 см³ калибровочного раствора 4-аминоазобензола (7.9.2). Эту смесь используют для калибровки, поскольку извлечение 4-аминоазобензола при разделении фаз с использованием данной методики составляет от 95% до 100%.

Для проверки данной методики 0,1 см³ калибровочного раствора 4-аминоазобензола (7.9.2) обрабатывают в соответствии с 9.2 и 9.3. Степень извлечения 4-аминоазобензола должна быть не менее 60%.

Обнаружение 4-аминоазобензола может быть выполнено с помощью хроматографических методов, перечисленных в 6.9. Можно также использовать другие подтвержденные методы. Количественное определение 4-аминоазобензола выполняют с помощью метода ВЭЖХ/ФДМД или КГХ/МСД. Если используют газовую хроматографию, то применяют соответствующие внутренние стандарты (7.8).

Количество 4-аминоазобензола обычно вычисляют с помощью компьютерной программы. Расчет можно осуществить вручную по площадям пиков.

Концентрацию 4-аминоазобензола рассчитывают как массовую долю, w, в миллиграммах на килограмм (мг/кг) образца, по следующей формуле:

где - концентрация 4-аминоазобензола в калибровочном растворе в мкг/см³;

A_S - площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;

A_C - площадь пика 4-аминоазобензола в калибровочном растворе, в единицах площади;

A_ISS - площадь пика внутреннего стандарта в растворе образца, в единицах площади <1>;

A_ISC - площадь пика внутреннего стандарта в калибровочном растворе, в единицах площади <1>;

V - объем образца согласно 9.3 (конечный объем образца), см³; здесь: 5,0 см³;

m_E - масса образца кожи, г.

--------------------------------

<1> Количественный анализ с помощью ГХ/МСД.

Концентрацию 4-аминоазобензола рассчитывают как массовую долю, w, в миллиграммах на килограмм (мг/кг) образца, по следующей формуле:

где - концентрация 4-аминоазобензола в калибровочном растворе, (мкг/см³);

A_S - площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;

A_C - площадь пика 4-аминоазобензола в калибровочном растворе, в единицах площади;

V - объем образца согласно 9.3 (конечный объем образца), см³; здесь: 5,0 см³;

m_E - масса образца кожи, г.

Информация о надежности метода представлена в приложении B.

Протокол испытаний должен ссылаться на данный официальный метод и содержать следующую информацию:

a) ссылку на настоящий стандарт (т.е. ГОСТ ISO 17234-2);

b) вид, происхождение и обозначение образца (неполный образец, если таковой использовался);

c) дату поступления образца и дату проведения анализа;

d) процедуру отбора образцов;

e) способ обнаружения и метод количественного определения;

f) результаты анализа, такие как концентрация и предел обнаружения 4-аминоазобензола, в миллиграммах на килограмм (мг/кг). Следует быть внимательным в интерпретации результатов при получении значения 4-аминоазобензола менее 30 мг/кг (см. приложение C).

Поскольку оснащение (6.9) лабораторий может быть различным, для хроматографических анализов невозможно представить общие инструкции. Успешно испытываются и используются следующие параметры.

--------------------------------

<1> Zorbax SB-Phenyl является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

--------------------------------

<2> Zorbax Eclipse XDB C18 является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

--------------------------------

<1> ZB-5-(Zebron) является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей данного документа и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

0,2 см³ испытуемого раствора (9.3) смешивают с 0,05 см³ соляной кислоты HCl (c = 0,01 моль/дм³) и пропускают через мембранный фильтр (0,0002 см³). Этот раствор анализируют с помощью капиллярного зонального электрофореза.

A.5.1

A.5.2

A.5.3

Примеры хроматограмм и спектров показаны на рисунках A.1 - A.4.

В таблице B.1 отражены результаты межлабораторных испытаний, выполненных для определения содержания 4-аминоазобензола в коже.

Данный официальный метод был разработан рабочей группой "Анализ запрещенных азокрасителей" немецкого учреждения BVL (Bundesamt Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherh eit, Berlin Deutschland - Федеральное ведомство по защите прав потребителей и безопасности пищевых продуктов) и оценен в межлабораторном испытании, в котором приняли участие 11 лабораторий.

a) В отношении оценки повторяемости и воспроизводимости результатов межлабораторных испытаний (по круговой схеме) необходимо учесть следующее:

1) межлабораторные испытания показали, что отношение красителя к восстановителю и "возраст" восстановителя могут оказывать решающее влияние на количественный результат. Следовательно, рекомендуется выполнять восстановительное расщепление в строгом соответствии с условиями, изложенными в 9.2 (время, температура и количество);

2) другим важным фактором является экстракция системы "жидкость - жидкость", например, разделение водной и органической фаз, для предотвращения дальнейшей реакции расщепления азогруппы 4-аминоазобензола. Поэтому настоятельно рекомендуется точно соблюдать условия, изложенные в 9.3.

b) Образец кожи для межлабораторных испытаний отобран из типового изделия, его измельчили и смешали с неокрашенной кожей. Таким образом можно снизить гомогенность материала.

c) Применение других подходящих внутренних стандартов может привести к более высокой повторяемости метода КГХ/МСД. Это условие, однако, не рассматривалось при оценке межлабораторных испытаний.

Поскольку получение аминов в очень небольших количествах может привести к ложным положительным результатам, приложение XVII Регламента REACH 1907/2006 устанавливает предельное значение как 30 мг/кг образца. Это значение применяется только к образцу материала, который является гомогенным по структуре и окрашиванию, а не к смешанному образцу гетерогенного состава.

Если обнаруженное количество 4-аминоазобензола превышает 30 мг/кг, можно предположить, что был использован определенный азокраситель. При концентрации ниже 30 мг/кг в настоящее время невозможно сделать авторитетное заявление об использовании определенных азокрасителей без получения дополнительной информации, такой, например, как тип и/или чистота использованных красителей или другого использованного сырья.

В этом контексте рекомендуется сообщать результаты анализа предлагаемым образом.

Согласно выполненному анализу азокрасителей, способных высвобождать 4-аминоазобензол в результате восстановительного расщепления азогрупп(ы), в представленном изделии обнаружено не было.

Согласно выполненному анализу предполагается, что представленное изделие изготовлено или обработано с применением азокрасителей, запрещенных в соответствии с приложением XVII Регламента REACH 1907/2006.

--------------------------------

<*> Рекомендуется использовать действующие версии этих стандартов с учетом всех внесенных в данные версии изменений.