Редакционная коллегия:

Калинин В.А. - к.с.н., профессор, зав. кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н.

Российский институт лекарственных культур: Борисов Г.С. - зав. КТЛ РРСТАЗР: Федорова Н.Е. - к.х.н., МНИИГ им. Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Метамитрон-4-амино-3-метил-6-фенил-1,2,4-триазин-5-(4Н)-он является действующим веществом гербицидного препарата голтикс Байер, Германия.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: .

Молекулярная масса: 202,1.

Белое кристаллическое вещество, Т. пл. 166,6 °C. Растворимость в воде 1,8 г/л, плохо растворим в большинстве органических растворителей (в хлористом метилене, циклогексане 1,0 - 5,0%; в изопропиловом спирте, толуоле до 1%).

Давление паров (t° = 20 - 70 °C). Неустойчив в сильно щелочных средах, более устойчив в нейтральной и кислой средах.

Метамитрон (голтикс) применяется для борьбы с сорными растениями при возделывании сахарной свеклы (3 - 5 кг/га). для экспериментальных животных 1000 - 3000 мг/кг. ДОК (Западная Европа) в сахарной свекле 0,05 мг/кг.

2.1.1. Принцип метода

Методика определения метамитрона основана на концентрировании препарата из воздуха на фильтре, экстракции гербицида органическим растворителем и определении анализируемого соединения тонкослойной хроматографией.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Предел измерения в анализируемом объеме - 0,2 мкг.

Предел измерения в воздухе - 0,005 мг/м3.

Диапазон измеряемых концентраций - 0,005 - 0,01 мг/м3.

Граница суммарной погрешности - +/- 14%.

Определению не мешают бетанал, ленацил, триамин, метафос, ТХА (трихлорацетат натрия).

Метамитрон, аналитический стандарт, фирма "Байер" (Германия).

Ацетон, ГОСТ 2603-79, ч.д.а.

Гексан, ТУ 6-09-3375-78, х.ч.

Этилацетат, ГОСТ 22300-76, х.ч.

Хлороформ, ГОСТ 215-74.

Бензол, ГОСТ 5955-78, ч.д.а.

Этанол, ректификат, ГОСТ 5962-81.

Кислота серная, ГОСТ 4204-77, ч.д.а.

Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.

Стандартные растворы метамитрона, содержащие 10, 50, 100 мкг/мл препарата. Стандартные растворы следует хранить в темном прохладном месте не более двух месяцев.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-317-74.

Источник УФ-света (лампа типа ПРК-4).

Хроматоскоп.

Водоструйный насос КМ 1230, ТУ 64-1-816-72.

Колбы (для концентрирования ОКШ-50-14/23 ТС; ГОСТ 10394-72.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, 100 мл.

Цилиндры, мензурки, пробирки.

Микропипетки 0,1; 1, ГОСТ 20292-74.

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол".

Бумажные фильтры обеззоленные "синяя лента", диаметр 5,5 - 6,0 см, ТУ 6-09-1678-77.

Фильтродержатель.

Пипетки на 1; 5; 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.

Весы аналитические ВЛА-200 М.

Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-75.

Камера для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-75.

Воздух со скоростью 2 - 5 л/мин аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента", закрепленный в фильтродержатель.

Продолжительность отбора пробы - 30 мин.

Длительность хранения проб в стеклянной таре в затемненном от света месте не более 5-ти суток.

2.5.1. Приготовление растворов и проявляющих реактивов

1. Раствор азотнокислого серебра.

2 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, затем доводят объем жидкости до 100 мл. Раствор хранят в холодильнике в затемненном месте.

2. Проявляющий реактив - бромфеноловый реагент.

Смесь растворов бромфенолового синего (БФС) и азотнокислого серебра. Готовят два раствора: 1. 0,5%-ный водно-ацетоновый (1:3) раствор азотнокислого серебра. 2. 10 мл 6%-ного раствора бромфенолового синего в ацетоне. Раствор 2 разбавляют раствором 1 до объема 100 мл. Хранят проявляющий реактив в темном прохладном месте. Годен к употреблению в течение 3 - 5 дней.

После обработки хроматограмм бромфеноловым реагентом фон осветляют обработкой пластин 2%-ным водным раствором лимонной кислоты или 5%-ным водным раствором уксусной кислоты.

2.5.2. Приготовление пластин "Силуфол"

Пластинку "Силуфол" помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон - 25%-ный аммиак в соотношении 7:3 (по объему).

Глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 мм. После подъема фронта растворителя до верхнего конца пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе под слоем осушителя.

2.6.1. Подготовка проб к анализу

Бумажный фильтр из фильтродержателя переносят в делительную воронку, заливают 15 - 20 мл этилацетата и препарат экстрагируют в течение 10 - 15 мин при перемешивании. Экстракцию повторяют дважды свежими порциями этилацетата. Объединенный экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия и затем упаривают на ротационном испарителе при температуре 40 °C досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана.

2.6.2. Условия хроматографирования

0,2 мл полученного раствора наносят микропипеткой на очищенную пластинку "Силуфол". Рядом с пробой наносят стандартные растворы, содержащие 1, 5, 10 мкг метамитрона. Пластинку помещают в камеру для хроматографирования, заполненную смесью растворителей:

бензол - ацетон 2:1 ; ,

хлороформ - ацетон 2:1 ;

хлороформ - этанол 9:1 .

После подъема фронта растворителя от линии старта на высоту 10 см хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают в вытяжном шкафу до испарения растворителей и проявляют одним из проявляющих реагентов. В случае использования бромфенолового синего препарат проявляется в виде синих пятен; при использовании 2%-ного раствора азотнокислого серебра - в виде коричневых. При просматривании пластин под хроматоскопом метамитрон обнаруживается в виде темно-синих пятен на желтом флуоресцирующем фоне.

2.6.3. Обработка результатов анализа

Количество метамитрона в пятне определяют путем сравнения размера пятен пробы и стандартов. Содержание гербицида в пробе рассчитывается по формуле:

где X - концентрация препарата в воздухе рабочей зоны, мг/м3;

J - количество препарата в пятне пробы, найденное путем сравнения со стандартом, мкг;

V - окончательный объем экстракта в пробе, мл;

- объем пробы воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям, л;

0,2 - объем экстракта пробы, нанесенной на пластинку, мл.

Соблюдать все необходимые требования техники безопасности при работе в химических лабораториях, а также правила производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений систем МЗ СССР (N 2455-81 от 20.10.81).

Разработчики: Н.И. Рева, В.Н. Ракитский (УкрНИИГИНТОКС); П.М. Кислумко, А.М. Борисевич (БелНИИЗР), А.А. Ляпкало (Рязанский мед. институт).