Методические указания предназначены для специалистов, занимающихся экспериментальным обоснованием ПДК вредных веществ в воде водных объектов, а также для органов санитарно-эпидемиологической службы, контролирующих санитарное состояние водоемов рекреационно-оздоровительного водопользования, в том числе морских вод. Они определяют общие принципы и методические особенности изучения и регламентации в воде водных объектов химических веществ кожно-резорбтивного действия с целью повышения надежности гигиенических нормативов в интересах охраны здоровья населения.

Методические указания разработаны Львовским медицинским институтом Минздрава УССР и Институтом общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР при участии и использовании материалов НИИ гигиены труда и профзаболеваний Минздрава ГССР, Новосибирской обл. СЭС, ВНИИГИНТОКС Минздрава СССР, Киевского НИИ гигиены труда и профзаболеваний Минздрава УССР, Львовского медицинского института Минздрава УССР.

1.1. Настоящие Методические указания являются дополнением к "Методическим указаниям по разработке и научному обоснованию предельно допустимых концентраций вредных веществ в воде водоемов" (N 1296-75) и "Методическим указаниям по применению расчетных и экспресс-экспериментальных методов при гигиеническом нормировании химических соединений в воде водных объектов" (N 1943-78). В развитие требований, изложенных в названных документах, при проведении токсикологических исследований дополнительно предусматривается качественная (все вещества) и количественная (по показаниям) оценка кожно-резорбтивного действия регламентируемых веществ.

1.2. Выявление кожно-резорбтивного действия является обязательным элементом исследований по регламентации содержания химических веществ в воздухе рабочей зоны, учитывается при установлении абсолютной величины соответствующих ПДК и оговаривается в их официальных перечнях. Пометку "опасно при поступлении через кожу" имеет около 25% веществ, ПДК которых включены в ГОСТ 12.1.005-76 "Система стандартов безопасности труда. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования". Этой величиной примерно оценивается и общее количество химических соединений, в отношении которых может потребоваться углубленное изучение кожно-резорбтивного действия в плане гигиены воды и санитарной охраны водоемов хозяйственно-питьевого и рекреационно-оздоровительного назначения.

1.3. Необходимость специального изучения кожно-резорбтивного действия веществ при их поступлении в организм из водной среды вытекает из анализа современных научных данных, а также результатов поисковых исследований, проведенных во Львовском медицинском институте при гигиеническом нормировании в воде водоемов инсектоакарицида циодрина и полупродуктов его производства и в Институте общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР при гигиенической оценке термальных вод, используемых в системах горячего водоснабжения, и загрязненных морских вод, используемых в рекреационно-оздоровительных целях:

а) доказана проницаемость кожи для воды и водных растворов (эмульсии) веществ, относящихся к различным классам химических соединений, причем некоторые из них всасываются из водных смесей лучше, чем чистые вещества;

б) увлажнение кожи, повышение температуры воды (до температуры тела человека и выше) и комбинация этих факторов обычно существенно усиливают всасывание веществ через кожу;

в) погружение тела в воду (водоем, плавательный бассейн, ванна) или обливание (душ) сопряжены с резким увеличением площади контакта (практически до 100% поверхности тела против 5 - 10% в условиях профессионального воздействия); в то же время многие соединения, изученные в интересах гигиены труда, имеют низкие кожно-оральные коэффициенты уже при минимальной площади контакта;

г) в сопоставлении с потенциальной опасностью кожно-резорбтивного действия веществ в условиях профессионального воздействия существует повышенная потенциальная опасность интоксикации при купании детей (в особенности первого года жизни) в связи с большей всасываемостью и часто более высокой токсичностью веществ для детского организма;

д) ряд химических соединений способен к временному депонированию в толще кожи, что при повторном воздействии может повлечь за собой относительное усиление их кумулятивного действия;

е) исследование кожно-резорбтивного действия ряда веществ в экспериментальных условиях, приближенных к реальным условиям водопользования, подтвердило возможность относительного увеличения токсичности и степени выраженности кумулятивных свойств отдельных веществ при перкутанном поступлении по сравнению с пероральным введением.

1.4. Гигиеническая целесообразность изучения кожно-резорбтивного действия веществ с ориентацией на возможное поступление из воды, подаваемой централизованными системами хозяйственно-питьевого водоснабжения, определяется требованиями ГОСТа 2874-73 "Вода питьевая", согласно которому (п. 1.5.3) допускается присутствие в воде химических веществ, являющихся промышленными и сельскохозяйственными загрязнителями водоисточников, в концентрациях, не превышающих нормативы, установленные Министерством здравоохранения СССР для источников централизованного водоснабжения.

1.5. Материалы, характеризующие кожно-резорбтивное действие химических веществ, регламентируемых в воде водных объектов, в объеме требований настоящих Методических указаний, включаются в отчет о выполненной работе, оформляемый в соответствии с ГОСТом 19600-74 "Отчет о научно-исследовательской работе. Общие требования и правила оформления". Один экземпляр отчета должен направляться в Секцию гигиены воды и санитарной охраны водоемов Проблемной комиссии АМН СССР "Научные основы гигиены окружающей среды" для рассмотрения в установленном порядке и последующего хранения в библиотечном фонде Секции.

2.1. Поступление вещества из водной среды через кожу представляет собой такую же объективную реальность, как и любой другой путь поступления, и его гигиеническое значение подлежит независимой оценке на основе соответственно адаптированных общих принципов регламентации веществ при раздельном и одновременном поступлении различными путями. Для некоторых веществ, нормируемых в воде водных объектов, количественная характеристика их кожно-резорбтивного действия может оказать решающее влияние на величину ПДК.

2.2. Целесообразность экспериментального изучения кожно-резорбтивного действия конкретного вещества определяется на основании данных литературы, включая официальные перечни ПДК вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а для органических соединений - сведения о коэффициентах распределения "октанол/вода". Исследованию подлежат в первую очередь вещества, предназначенные для широкого внедрения в народное хозяйство.

2.3. Изучение кожно-резорбтивного действия регламентируемого вещества целесообразно проводить параллельно изучению его токсических свойств при пероральном введении. Последнее проводится в полном объеме, предусмотренном методическими документами, названными в п. 1.1, и играет определяющую роль в общей токсикологической характеристике исследуемого вещества.

2.4. При обосновании ПДК веществ, способных всасываться через кожу, сохраняет силу принцип лимитирующего признака вредности, но концентрация, принимаемая во внимание по санитарно-токсикологическому признаку, должна быть установлена с учетом кожно-резорбтивного действия нормируемого вещества и возможности его одновременного поступления через желудочно-кишечный тракт и через кожу.

2.5. Основная токсикометрическая информация о кожно-резорбтивном действии изучаемого вещества должна быть получена в эксперименте на лабораторных животных при единых условиях постановки опытов, наиболее адекватных реальным условиям водопользования.

2.6. Учитывая дополнительный характер соответствующих исследований, а также существенно более высокую проницаемость кожи лабораторных животных по сравнению с кожей человека, содержание и объем этих исследований могут быть сведены к минимуму, абсолютно необходимому для оценки опасности вещества при поступлении из воды через кожу. Абсолютно необходимыми являются: определение токсичности и степени кумуляции изучаемого вещества при кожном пути поступления, а также исследование его аллергенных свойств при внутрикожной сенсибилизации. Общие требования к проведению аллергологических исследований принимаются в соответствии с "Методическими указаниями по изучению аллергенного действия веществ, загрязняющих водоемы" (N 2185-80).

2.7. Если вещество, проникающее через кожу, одновременно является облигатным или аллергическим раздражителем кожи, его резорбтивное действие следует изучать на уровнях концентраций, безвредных при эпикутанном воздействии. Кожно-онкогенное действие вещества изучается по показаниям и независимо от его способности вызывать другие эффекты при эпи- и перкутанном воздействии.

2.8. В целях сопоставимости количественных характеристик действия веществ при пероральном и перкутанном поступлении планирование эксперимента в каждом случае должно предусматривать выявление и формализацию зависимости "доза (концентрация) - эффект" и вероятностную оценку эффективных (в том числе минимально эффективных) и максимальных неэффективных доз и концентраций вещества с пересчетом соответствующих доз при пероральном поступлении на концентрацию в воде.

3.1. Рекомендуемая схема обязательных исследований и этапность их выполнения представлены на рис. 3.1. Условия постановки опытов, регламентируемые впервые настоящими Методическими рекомендациями, излагаются в п. 3.4 и разделах 4 и 5. Схема рассчитана на получение независимой токсикометрической информации, достаточной для объективной оценки кожно-резорбтивного действия веществ в рамках общей программы исследований по экспериментальному обоснованию их ПДК в воде водных объектов.

3.2. Ключевое значение имеет установление факта резорбции вещества через кожу. При отрицательном результате дальнейшие исследования не проводятся, при положительном - переходят к количественной оценке кожно-резорбтивного действия вещества.

3.3. Из числа известных методических приемов, используемых для выявления способности вещества всасываться через кожу, предпочтительно проведение опытов на белых крысах, хвосты которых на 2/3 длины погружают в исследуемое вещество (экспозиция 4 часа однократно или повторно в течение 10 - 15 дней), одновременно оценивается местное действие вещества на кожу. Доказательствами кожно-резорбтивного действия являются: гибель животных, клинические проявления интоксикации, сдвиги по наиболее чувствительным (при пероральном введении) тестам, наличие вещества или его метаболитов в крови и тканях. Аналогичные исследования могут быть проведены при погружении животных в водные растворы вещества (см. раздел 4). Отсутствие токсического действия при поступлении вещества через кожу целесообразно подтверждать исследованием соответствующих биохимических и физиологических показателей.

3.5. Количественной характеристикой аллергенных свойств вещества является максимально неэффективная доза (МНД) при внутрикожной сенсибилизации морских свинок (светлой масти), определяемая по тестам, обычно используемым в экспериментальной аллергологии для оценки сенсибилизирующих доз. Внутрикожная сенсибилизация коррелирует с всасыванием веществ через кожу. Оценку разрешающей дозы в ряде случаев можно заменить проверкой рекомендуемой ПДК в аутоэксперименте методом кожных проб.

3.6. Другие токсикологические (вплоть до токсиколого-геронтологических) и специальные (генетические, эмбриологические и т.д.) количественные характеристики кожно-резорбтивного действия веществ в общем случае находят путем экстраполяции экспериментальных данных, полученных при пероральном введении. По усмотрению исследователя, соответствующие данные (полностью или частично) могут быть получены также непосредственно в эксперименте при перкутанном воздействии. Различия в проницаемости кожи животных и человека могут быть рассчитаны на основе "правила массы тела" (Г.Н. Красовский) с учетом соотношений площади поверхности тела к массе (В.Д. Гостинский и Г.Б. Красноневцева).

3.7. Кроме исследований, включенных в схему на рис. 3.1, для обобщенной оценки допустимой концентрации по санитарно-токсикологическому признаку вредности следует учесть характер комплексного действия вещества при поступлении через желудочно-кишечный тракт и через кожу. С этой целью в дополнительном остром опыте на белых крысах определяется коэффициент комплексного действия по Finney в модификации Ю.С. Кагана или методом двух точек.

4.1. Купание животных (каждого в отдельности) проводят в обычных стеклянных банках емкостью 1 л, примерно на 3/4 заполненных водой с испытуемыми концентрациями вещества. Животных погружают в воду до шеи. В случае нелетучих веществ банку закрывают пластмассовой крышкой с несколькими небольшими отверстиями для обмена воздуха в подкрышечном пространстве. В случае летучих веществ голову животного предварительно пропускают через крышку с отверстием достаточно большого диаметра, после чего тело животного погружают в воду, одновременно закрывая банку крышкой. Для лучшей фиксации животного и герметизации банки поверх крышки накладывают простое устройство, состоящее из двух пластмассовых полуколец с эластичной прокладкой по внутреннему краю, подгоняя диаметр отверстия к размерам шеи животного. Перед началом исследований целесообразно адаптировать животных к процедуре купания путем погружения в подогретую до 37 - 38 °С водопроводную воду на 1 час ежедневно в течение 3 - 4-х дней.

--------------------------------

<*> Если в координатах (E, lg C) линейность отсутствует, переходят к другой подходящей системе координат (напр., E, C).

где:

y = E;

x = lg C;

a - угловой коэффициент;

b - свободный член.

Два последних находят из нормальной системы Гаусса:

При невозможности установить одночасовую МНК в соответствии с требованиями п. п. 4.6 - 4.8 прибегают к оценке этой МНК методом одной точки.

5.1. Техника постановки опытов принимается согласно п. 4.1. Экспозиция во всех случаях - 1 час.

6.1. Потенциальная опасность смертельного и несмертельного острого отравления, а также хронического отравления, характеризуется коэффициентами возможности отравления при поступлении вещества через кожу:

6.3. Относительную опасность одного и того же вещества при многократном пероральном и перкутанном поступлении характеризуют сопоставлением изоэффективных и максимальных неэффективных величин.

6.4. Для определения допустимой концентрации (ДК) нормируемого вещества в воде по санитарно-токсикологическому признаку вредности сопоставляют найденные в подострых (хронических, пожизненных) опытах нижние доверительные границы двух концентраций: кожно-резорбтивной МНК и пересчитанной на концентрацию в воде оральной МНД. Учитывают также коэффициент комплексного действия (К), установленный в остром опыте. Значение ДК находят по формуле:

6.6. Нормативы веществ кожно-резорбтивного действия рекомендуются с пометкой "опасно при поступлении через кожу".

1. Беруашвили Ц.А. Гигиеническая оценка сероводородных термальных вод, используемых в системе горячего водоснабжения. "Гиг. и сан.", 1980, N 6, с. 11 - 13.

2. Гжегоцкий М.Р. Методические особенности изучения и регламентации в воде водоемов химических веществ кожно-резорбтивного действия (на примере циодрина и полупродуктов его производства). Автореф. дисс. канд. К., 1981.

3. Голубев А.А., Люблина Е.И., Толоконцев Н.А., Филов В.А. Количественная токсикология (избранные главы), Л., "Медицина", 1973.

4. Гостинский В.Д., Краснопевцева Г.Б. Количественные аспекты экстраполяции экспериментальных данных с животных на человека при поступлении химических веществ через кожу. "Гиг. труда и проф. забол.", 1979, N 10, с. 30 - 32.

5. Каган Ю.С. Способ количественной оценки комбинированного и комплексного действия на организм химических и физических факторов внешней среды. "Гиг. и сан.", 1973, N 12, с. 89 - 91.

6. Коплаков Ф.И. Проницаемость кожи. М., "Медицина", 1973.

7. Красовский Г.Н. Моделирование интоксикаций и обоснование условий экстраполяции экспериментальных данных с животных на человека при решении задач гигиенического нормирования. Автореф. дисс. докт. М., 1973.

8. Красовский Г.Н., Жолдакова З.И., Егорова Н.А. Методические основы ускоренного гигиенического нормирования вредных веществ. В сб.: Проблема пороговости в токсикологии. М., 1979, с. 27 - 50.

9. Кундиев Ю.И. Всасывание пестицидов через кожу и профилактика отравлений. К., "Здоровье", 1975.