Главная // Актуальные документы // Методические указанияСПРАВКА
Источник публикации
"Методические указания по контролю содержания вредных веществ на кожных покровах и спецодежде. Выпуск 1". М., МП "Рарог", 1992
Примечание к документу
Документ включен в
Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (
Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
Название документа
"Методические указания по хроматографическому измерению содержания метилтестостерона и метандростенолона на коже"
(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 N 5122-89)
"Методические указания по хроматографическому измерению содержания метилтестостерона и метандростенолона на коже"
(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 N 5122-89)
Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
В.И.ЧИБУРАЕВ
28 сентября 1989 г. N 5122-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ
МЕТИЛТЕСТОСТЕРОНА И МЕТАНДРОСТЕНОЛОНА НА КОЖЕ
CH CH
/ \ 3 | 3
/ \│_____|_
H C │ │ │ OH
/ \ 3 /|\ H /|\ /
/ \│/ | \ / | \ /
│ │ H │ H
//\ //\ /
O \ // \ /
C H O М.м. 302,5
20 30 2
17альфа-Метиландростен-4-ол-17бета-он-3 (метилтестостерон)
CH CH
/ \ 3 | 3
/ \│_____|_
H C │ │ │ OH
// \ 3 /|\ H /|\ /
// \│/ | \│/ | \ /
│ │ H │ H
//\ //\ /
O \ // \ /
C H O М.м. 300,4
20 28 2
17альфа-Метиландростадиен-1,4-ол-17бета-он-3 (метандростенолон)
Таблица 12
┌─────────────────┬──────────────────────┬──────────┬─────────────────────┐
│ Наименование │ Агрегатное состояние │Т. пл., °C│ Растворимость │
│ вещества │ │ │ │
├─────────────────┼──────────────────────┼──────────┼─────────────────────┤
│Метилтестостерон │Белый кристаллический │162 - 168°│Практически │
│(МТ) │порошок │ │нерастворим в воде, │
│ │ │ │легко растворим в 95%│
│ │ │ │этаноле │
│Метандростенолон │Белый с желтоватым │162 - 170°│Очень мало растворим │
│(МАС) │оттенком │ │в воде, легко │
│ │кристаллический │ │растворим в 95% │
│ │порошок │ │этаноле │
└─────────────────┴──────────────────────┴──────────┴─────────────────────┘
1. Характеристика методики
Определение основано на хроматографическом выделении анализируемых веществ в тонком слое сорбента с последующим проявлением хроматограмм раствором фосфорномолибденовой кислоты и денситометрировании окрашенных зон.
В качестве смывающей жидкости используется этиловый спирт.
Диапазон измеряемого содержания в смыве МТ 0,00014 мг/кв. см - 0,0014 мг/кв. см; МАС от 0,006 до 0,06 мг/кв. см.
Определение избирательно на стадиях сушки, просеивания и фасовки.
Граница суммарной погрешности измерения не превышает +/- 25%.
ПДУ концентраций МТ на коже 0,0003 мг/кв. см; МАС - 0,002 мг/кв. см.
МТ - фармакопейный.
МАС - фармакопейный.
| | ИС МЕГАНОРМ: примечание. ГОСТ 5963-67 утратил силу на территории Российской Федерации с 1 января 2002 года в связи с введением в действие ГОСТ Р 51723-2001 (Постановление Госстандарта России от 23.03.2001 N 130-ст). | |
Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67.
Углерод четыреххлористый, ГОСТ 20228-74, х.ч.
Фосфорномолибденовая кислота, ТУ 6-09-3540-78, ч.д.а., 10-процентный раствор.
Система растворителей: смесь четыреххлористого углерода с ацетоном в соотношении 4:1 (по объему).
Проявляющий реактив: готовят перед употреблением, смешивая 10 мл 10-процентного раствора фосфорномолибденовой кислоты с 0,1 мл концентрированной серной кислоты.
Основные стандартные растворы МТ и МАС с концентрацией 1 мг/мл готовят растворением 0,1 г каждого вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл. Растворы устойчивы в течение месяца.
Стандартные растворы с концентрациями МТ 10 - 20 - 40 - 60 - 80 - 100 мкг/мл, МАС - 50 - 100 - 200 - 300 - 400 - 500 мкг/мл готовят путем соответствующего разбавления 95% этанолом исходных стандартных растворов. Растворы устойчивы в течение 7 дней.
Марлевые тампоны.
3. Приборы, аппаратура, посуда
Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75, размером 95 x 165 мм.
Пульверизатор стеклянный.
Хроматографические пластинки "Силуфол" UV-254, размером 75 x 150 мм.
Пипетки,
ГОСТ 1770-74, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл с делениями.
| | ИС МЕГАНОРМ: примечание. Взамен ГОСТ 10394-72 Постановлением Госстандарта СССР от 15.07.1982 N 2670 с 1 января 1984 года введен в действие ГОСТ 25336-82. | |
Стаканы лабораторные стеклянные, ГОСТ 10394-74, вместимостью 25 мл.
| | ИС МЕГАНОРМ: примечание. Взамен ГОСТ 10515-75 Постановлением Госстандарта СССР от 15.07.1982 N 2670 с 1 января 1984 года введен в действие ГОСТ 25336-82. | |
Пробирки градуированные с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75, вместимостью 15 мл.
Колбы грушевидные, ГОСТ 10394-72, вместимостью 25 мл.
Вакуумная установка.
Сушильный шкаф.
Пинцет медицинский.
Денситометр "БИАН-170".
Условия проведения смыва
Трафарет размером 36 кв. см накладывают на исследуемый участок кожного покрова работающего двумя марлевыми тампонами, смоченными в спирте, проводят смыв, затем сухим тампоном промокают смываемый участок кожи. Все тампоны складывают в пробирку или стакан. Одновременно проводят контрольный смыв с кожи у работающих, не контактирующих с МТ и МАС.
Условия анализа
Тампоны тщательно промывают двумя порциями спирта по 5 мл каждая, сливают полученный раствор в грушевидную колбу и упаривают под вакуумом при температуре 60 - 70 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл спирта и используют для анализа.
При хроматографировании смыва с чистой кожи на пластинке "Силуфол" образуется слабо окрашенная полоса. С целью исключения влияния "фона" на результаты анализа для приготовления шкалы стандартов используют спирт, полученный после смыва с чистой кожи.
Для очистки сорбента пластинку помещают в камеру для
хроматографирования с системы растворителей четыреххлористый углерод-ацетон
(4:1) и закрывают крышкой. Край пластинки погружают в растворитель
подвижной фазы не более чем на 0,5 см. После того как подвижная фаза дойдет
до конца пластинки, последнюю вынимают из камеры и сушат на воздухе 3 - 5
мин. На подготовленную таким образом пластинку, на линию старта (от края 1
см), наносят при помощи микропипетки по 0,05 мл растворов пробы шкалы
стандартов (размер пятен не должен превышать 0,5 см). Пластинку высушивают
на воздухе в течение 3 мин. и помещают в ту же камеру с системой
растворителей. После поднятия подвижной фазы на высоту 10 см от стартовой
линии пластинку из камеры вынимают и оставляют на воздухе под вытяжным
шкафом до полного испарения растворителей (3 - 5 мин.). Затем пластинку
опрыскивают проявляющим реактивом помещают в сушильный шкаф на 2 мин. при
температуре 100 °С. Анализируемые вещества проявляются на хроматограмме в
виде синих пятен на желтом фоне с R МТ = 0,38 +/- 0,02; R МАС =
f f
0,28 +/- 0,02.
Количественное измерение содержания МТ и МАС в анализируемом объеме проводят по отношению интегральных значений содержаний вещества в пробах и "свидетелях" с помощью денситометра "БИАН-170".
Содержание МТ и МАС в мг/кв. см (C) вычисляют по формуле:
Q
C = -,
S
где Q - количество вещества во всей пробе, мг;
S - площадь исследуемой части тела, кв. см.