4-Амино-2-гидроксибензойная кислота.

Содержит не менее 98,5% и не более 100,5% аминосалициловой кислоты C₇H₇NO₃ в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый порошок.

<*> Темнеет на свету.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Растворим в спирте 96%, мало растворим в воде и эфире.

<*> Растворяется в разбавленных растворах азотной кислоты и в натрия гидроксида растворе концентрированном.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях"). Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 250 мг субстанции, растворяют в 3 мл натрия гидроксида раствора 1 М и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и 12,5 мл фосфатного буферного раствора pH 7,0 (1), доводят объем раствора водой до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы поглощения при 265 нм и 299 нм. Отношение значений оптических плотностей A₂₆₅/A₂₉₉ должно быть 1,53 +/- 0,03.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% и 0,1 мл раствора железа(III) хлорида; должно появиться фиолетово-красное окрашивание. Полученный раствор выдерживают в течение 3 ч; не должно быть осадка.

4. Качественная реакция. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды должен давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС "Общие реакции на подлинность").

Температура плавления диацетильного производного. От 191 до 197 °C (ОФС "Температура плавления", метод 1). В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г субстанции, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и нагревают на водяной бане для выпаривания в течение 30 мин, прибавляют 40 мл воды, фильтруют, охлаждают и выдерживают до выпадения кристаллического осадка. Осадок собирают на фильтре, тщательно промывают водой и высушивают в эксикаторе в течение 1 ч при температуре 105 °C.

pH раствора. От 3,0 до 3,7 (насыщенный раствор в воде, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,2 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,7 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в ацетонитриле и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50,0 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг 3-аминофенола (примесь A) и 5,0 мг месалазина (примесь B), растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Примечание

Примесь A: 3-аминофенол [591-27-5].

Примесь B (месалазин): 5-амино-2-гидроксибензойная кислота [89-57-6].

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, испытуемый раствор и раствор сравнения.

Относительное время удерживания соединений. Аминосалициловая кислота - 1 (около 17 мин); примесь A - около 0,31; примесь B - около 0,39.

Для идентификации примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площадь пика примеси A умножают на 0,62.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать трехкратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);

- площадь пика примеси B не должна превышать двадцатикратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,6 площади пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03%).

Хлориды. Не более 0,042% (ОФС "Хлориды"). Растворяют 0,12 г субстанции в 2 мл азотной кислоты разведенной 16%, прибавляют 23 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Вода. Не более 0,5% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Раствор тетрабутиламмония гидроксида. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,54 г тетрабутиламмония гидроксида, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор тетрабутиламмония гидроксида - динатрия гидрофосфата раствор 0,05 М - натрия дигидрофосфата раствор 0,05 М 150:425:425.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 100 мг (точная навеска) парацетамола, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) субстанции и растворяют в 15 мл ПФ, прибавляют 2,5 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты и растворяют в 15 мл ПФ, прибавляют 2,5 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Аминосалициловая кислота - 1; парацетамол - около 0,83.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (R_S) между пиками аминосалициловой кислоты и парацетамола должно быть не менее 1,7;

- относительное стандартное отклонение отношений площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола должно быть не более 1,0% (6 введений).

После использования колонку промывают в течение 30 мин смесью метанол - вода - фосфорная кислота 77:23:0,6 и затем в течение 30 мин смесью метанол - вода 50:50.

Содержание аминосалициловой кислоты C₇H₇NO₃ в субстанции в процентах (X) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле:

где B₁ - отношение площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола на хроматограмме испытуемого раствора;

B₀ - отношение площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты, мг;

P - содержание аминосалициловой кислоты в фармакопейном стандартном образце аминосалициловой кислоты, %;

W - потеря в массе при высушивании, %.

В герметично закрытой упаковке, в защищенном от света месте.