МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СЕРЫ В РАСТЕНИЯХ
И КОРМАХ РАСТИТЕЛЬНОГО
ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Москва
ФГНУ «Росинформагротех»
2004

СОДЕРЖАНИЕ

1. Сущность метода. 1

2. Аппаратура, материалы и реактивы.. 1

3. Подготовка к анализу. 2

3.1. Приготовление осаждающего раствора с желатином.. 2

3.2. Приготовление раствора серы массовой концентрацией 0,1 мг/см3 2

3.3. Приготовление растворов сравнения. 2

3.4. Приготовление щелочного раствора трилона Б. 2

4. Проведение анализа. 3

4.1. Минерализация растительных образцов. 3

4.2 Турбидиметрическое определение серы.. 3

5. Обработка результатов. 3

6. Требования по технике безопасности. 4

 

Предназначены для специалистов агропромышленного комплекса, занимающихся вопросами контроля содержания серы в растениях и кормах растительного происхождения.

1. СУЩНОСТЬ МЕТОДА

Метод основан на извлечении серы из растительного материала путем минерализации его смесью азотной и хлорной кислот, перевода в сульфаты и определении в виде взвеси сульфата бария турбидиметрическим методом. В качестве стабилизатора взвеси используется раствор желатина.

2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

Для проведения анализа используют:

фотоэлектроколориметр;

весы лабораторные 2 класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г и 4 класса точности с наибольшим пределом взвешивания 400 г по ГОСТ 24104;

весы торсионные с погрешностью не более 1 мг;

установку для минерализации растительных образцов с терморегулятором или плитку электрическую с твердым керамическим покрытием, или плитку электрическую с песчаной баней;

пробирки термостойкие вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336 для минерализации растительного материала;

колбы мерные термостойкие вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770 для минерализации растительного материала;

колбы конические стеклянные вместимостью 50 - 100 см3 по ГОСТ 25336;

дозаторы с погрешностью дозирования не более 1 % или пипетки и бюретки 2 класса точности по ГОСТ 20292;

посуду мерную лабораторную вместимостью 1000 и 100 см3 по ГОСТ 1770;

кислоту азотную по ГОСТ 4461, концентрированную, х.ч.;

кислоту хлорную, 57 %-ный раствор, х.ч.;

кислоту соляную по ГОСТ 3118, х.ч. или ч.д.а.;

натрий сернокислый, безводный по ГОСТ 4166, х.ч.;

желатин по ГОСТ 11293;

натрий гидроокись по ГОСТ 4328, ч.д.а., раствор с массовой долей 0,5 %;

соль динатриевую этилендиамин N1, N1, N1, N1, - тетрауксусной кислоты, 2-водную (трилон Б) по ГОСТ 10652, ч.д.а.;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709.

3. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

3.1. Приготовление осаждающего раствора с желатином

200 см3 дистиллированной воды наливают в стакан из термостойкого стекла вместимостью 500 см3, помещают на плитку и нагревают до 60 - 70 °С. Снимают стакан с плитки и помещают в него 0,6 г желатина, взвешенного с погрешностью не более 0,1 г. Содержимое стакана размешивают стеклянной палочкой до полного растворения желатина. Полученный раствор охлаждают при комнатной температуре, переливают в колбу с притертой пробкой и оставляют на 16 - 18 ч в холодильнике при 4 °С. По истечении этого времени раствор желатина достают из холодильника и оставляют в лаборатории на 2 ч для достижения комнатной температуры. Затем в него помещают 2,0 г бария хлористого, взвешенного с погрешностью не более 0,1 г, и перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения. Приготовленный раствор хранят в склянке с притертой пробкой в холодильнике не более 7 суток. Перед использованием раствор оставляют в лаборатории на 2 ч для достижения комнатной температуры.

3.2. Приготовление раствора серы массовой концентрацией 0,1 мг/см3

0,443 г сернокислого натрия, высушенного до постоянной массы при температуре 100 - 105 °С, взвешивают с погрешностью не более 0,001 г, помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см3, растворяют в дистиллированной воде, доводят объем раствора до метки и тщательно перемешивают. Раствор хранят в холодильнике не более трех месяцев.

3.3. Приготовление растворов сравнения

В мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают указанные в таблице объемы раствора, приготовленного по п. 3.2, и добавляют из бюретки по 1 см3 азотной кислоты. Объемы растворов доводят до меток дистиллированной водой и тщательно перемешивают.

Характеристика растворов

Номер раствора сравнения

1

2

3

4

5

6

7

Объем раствора, приготовленного по п. 3.2

0

2

4

7

10

13

16

Концентрация серы в пересчете на 100 см3 минерализата (S, мг/100 см3)

0

0,2

0,4

0,7

1,0

1,3

1,6

3.4. Приготовление щелочного раствора трилона Б

30 г трилона Б растворяют в 1000 см3 раствора гидроокиси натрия с массовой долей 0,5 %.

Раствор используют для мытья кювет фотоэлектроколориметра и колб, в которых к минерализату добавляют осаждающий раствор.

4. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

4.1. Минерализация растительных образцов

Пробы воздушно-сухого растительного материала, измельченного и просеянного через сито с отверстиями 0 1 мм, массой 0,200 г взвешивают с погрешностью не более 0,001 г.

Пробы помещают в пробирки, если используются специальные установки для минерализации с гнездами для пробирок, или в мерные колбы вместимостью 100 см3 из термостойкого стекла в случае использования для этой цели плитки с термостойким покрытием или с песчаной баней.

К пробам добавляют по 2 см3 смеси 1:1 по объему азотной и хлорной кислот, помещают в установку для минерализации или на плиту и затем нагревают. Если установка для минерализации растительных проб имеет терморегулятор, устанавливают температуру 170 - 180 °С, отклонение температуры от установившегося значения в рабочей камере нагревателя не более ±10 °С. Минерализацию на плитке проводят, не допуская бурного кипения. При минерализации вначале идет выделение бурых паров окислов азота, затем белых паров хлорной кислоты. Данная стадия минерализации длится примерно 2 ч.

После прекращения заметного выделения белых паров пробы охлаждают до комнатной температуры, затем к ним добавляют по 1 см3 концентрированной соляной кислоты и снова ставят на минерализацию.

На этой стадии минерализация продолжается до полного обесцвечивания растворов в пробирках или колбах, на что уходит примерно 1 ч. Минерализат охлаждают. Если озоление растительных образцов проводили в пробирках, их содержимое переносят в мерные колбы вместимостью 100 см3, осторожно смывая дистиллированой водой стенки и дно пробирок, и затем доводят до метки.

Если минерализацию проводили в мерных колбах, их содержимое доводят до метки дистиллированной водой. Содержимое колб перемешивают и оставляют на некоторое время для перемешивания всех компонентов.

Одновременно проводят контрольный (холостой) опыт, проводя его через все стадии анализа, исключая взятие пробы растительного материала.

4.2 Турбидиметрическое определение серы

Из растворов сравнения (п. 3.3) и минерализатов (п. 4.1) отбирают по 10 см3 и помещают в чистые, сухие конические колбы вместимостью 50 - 100 см3. К ним приливают по 10 см дистиллированной воды, перемешивают с пробой. Затем добавляют по 1 см3 осаждающего раствора с желатином, приготовленного по п. 3.1, и снова содержимое колб тщательно перемешивают в течение нескольких секунд.

Фотометрирование взвеси проводят через 40 мин после прибавления осаждающего раствора с желатином в кювете с толщиной просвечиваемого слоя 20 мм относительно раствора сравнения № 1 при длине волны 420 Нм. Перед помещением в кювету содержимое колбы тщательно перемешивают. Взвесь оптически устойчива в течение 4 ч. Если при фотометрировании минерализата показания прибора выше, чем для самого концентрированного раствора сравнения (№ 7, см. таблицу на стр. 4), анализ повторяют. При этом объем анализируемой пробы уменьшают и затем доводят дистиллированной водой до 10 см3.

5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ

По результатам фотометрирования растворов сравнения строят градуировочный график. По оси абсцисс откладывают концентрацию серы в растворах сравнения в пересчете на 100 см3 минерализата, по оси ординат - соответствующие им показания фотоэлектроколориметра. По градуировочному графику находят содержание серы в мг в 100 см3 минерализата.

Если объем анализируемой пробы менее 10 см3, результат, найденный по графику, увеличивают во столько раз, во сколько раз была разбавлена проба.

Содержание серы в растениях (X, % на воздушно-сухое вещество) рассчитывают по формуле

где а - содержание серы в 100 см3 минерализата, найденное по графику, мг S;

б - содержание серы в 100 см3 раствора контрольного опыта, найденного по графику, мг S;

н - навеска воздушно-сухого растительного материала, г;

1000 - коэффициент пересчета концентрации серы из мг в г;

100 - коэффициент пересчета, %.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое двух повторных определений. Результаты вычисляют до третьего десятичного знака и округляют до второго десятичного знака.

Допустимые расхождения между результатами двух повторных определений (d) и результатами, полученными в разных условиях (D) при доверительной вероятности р = 0,95 не должны превышать следующих значений:

где  - среднее арифметическое результатов двух повторных определений, %;

 - среднее арифметическое результатов двух испытаний, выполненных в разных условиях, %.

Допускается проведение анализа без повторных определений при наличии в партии исследуемых проб стандартных образцов (СО). В этом случае (при обязательном проведении выборочного статистического контроля сходимости повторных определений) за результат испытания принимают результат единичного определения, если разница между воспроизведенной и аттестованной в СО массовой доли серы не превышает

D = 0,21Хатт + 0,023,

где Хатт - аттестованное значение определяемого компонента, взятое из свидетельства на СО.

6. ТРЕБОВАНИЯ ПО ТЕХНИКЕ БЕЗОПАСНОСТИ

6.1. Требования по технике безопасности должны осуществляться в соответствии с ГОСТ 12.1.007, ГОСТ 12.1.004, ГОСТ 12.0.004 и ГОСТ 12.1.010 и инструкцией по технике безопасности для агрохимических лабораторий.

6.2. Все работы по минерализации растений должны выполняться в вытяжном шкафу.

Работу с концентрированной азотной кислотой и смесью кислот следует выполнять в защитных очках и перчатках.

6.3. Все виды работ может проводить специалист, владеющий техникой подготовки проб, приготовления реагентов для анализа и техникой проведения анализа. Он должен пройти инструктаж по технике безопасности.