Методические указания разработаны Всесоюзным научно-исследовательским институтом фармации (Брутко Л.И., Щедриной Л.Е., Потемкиной С.П.) совместно с Московской городской санэпидстанцией (Тарсковой Н.Н., Кашинцевой И.А.).

Предназначены для контрольно-аналитических лабораторий, бактериологических лабораторий санэпидстанций, лечебно-профилактических учреждений.

Причиной пирогенности дистиллированной воды, предназначенной для изготовления инъекционных растворов, а также самих инъекционных растворов является заражение их микроорганизмами и продуктами их распада.

Известно, что причиной пирогенности в подавляющем большинстве случаев является грамотрицательные (пирогенобразующие) микроорганизмы, в составе клеточной оболочки которых имеются липополисахариды. Грамположительные микроорганизмы, как правило, не вызывают пирогенной реакции - их пирогенная активность в 10000 - 100000 раз меньше, чем у грамотрицательных микроорганизмов.

При пересмотре нормативов предельного содержания микроорганизмов в растворах для инъекций была учтена избирательная идентификация грамотрицательных (пирогенобразующих) микроорганизмов.

Методика избирательного обнаружения грамотрицательных микроорганизмов, по количеству которых можно судить о пирогенности растворов, вводится как дополнение к пункту 3.1.1 вышеуказанных методических указаний.

Предлагаемая методика позволит бактериологическим лабораториям санэпидстанций, лечебно-профилактических учреждений, а также контрольно-аналитическим лабораториям, контролирующим растворы для инъекций, более целенаправленно проводить эти исследования.

1 мл исследуемого образца, взятого непосредственно перед стерилизацией, засевают по 0,5 мл на поверхность двух чашек Петри с мясо-пептонным агаром и термостатируют в течение 5 суток при температуре 30 - 35 °C. На предметные стекла пипеткой наносят капли 3% раствора гидроксида калия, одна капля служит контролем, а в другие петлей вносят каждый вид выросших колоний микроорганизмов и тщательно перемешивают. Если в течение 60 секунд происходит образование желеобразной массы, суспензия тянется за петлей, образуя нити, то исследуемый раствор содержит пирогенобразующие микроорганизмы. Если образования геля не происходит, раствор остается гомогенным, то в исследуемом растворе отсутствуют пирогенобразующие микроорганизмы.

ПРИМЕЧАНИЕ: применяемые предметные стекла, пипетки должны быть вымыты хромовой смесью и простерилизованы.