Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат стрептомицина сульфат, порошок для приготовления раствора для внутримышечного введения. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС "Лекарственные формы для парентерального применения" и ниже приведенным требованиям.

Содержит не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества стрептомицина в пересчете на сухое вещество.

Описание. Порошок белого или почти белого цвета. <*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

1. Тонкослойная хроматография (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). 0,5 М раствор калия дигидрофосфата.

Испытуемый раствор. 10 мг препарата растворяют в 10 мл воды.

Раствор сравнения А. 10 мг стандартного образца стрептомицина сульфата растворяют в 10 мл воды.

Раствор сравнения Б. 10 мг стандартного образца стрептомицина сульфата, 10 мг стандартного образца канамицина моносульфата и 10 мг стандартного образца неомицина сульфата растворяют в 10 мл воды.

Раствор 1,3-дигидроксинафталина. 0,2 г 1,3-дигидроксинафталина с содержанием основного вещества не менее 98% помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор серной кислоты. 600 мл воды помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, осторожно по стенке при постоянном перемешивании и охлаждении прибавляют 255 мл серной кислоты концентрированной, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор 1,3-дигидроксинафталина в растворе серной кислоты. Смешивают равные объемы раствора 1,3-дигидроксинафталина и раствора серной кислоты.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, раствора сравнения А и раствора сравнения Б. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают раствором 1,3-дигидроксинафталина в растворе серной кислоты и выдерживают при температуре 150 °C в течение 5 - 10 мин. Пластинку охлаждают и просматривают при дневном свете.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора сравнения Б четко обнаруживаются 3 зоны адсорбции.

Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора должна находиться на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А.

2. Качественная реакция. 8 мг препарата растворяют в 4 мл воды, прибавляют 1 мл 1 М раствора натрия гидроксида. Нагревают на водяной бане в течение 4 мин. Полученный раствор нейтрализуют 2 М раствором хлористоводородной кислоты и прибавляют 0,1 мл 1% раствора железа (III) хлорида; раствор должен окраситься в фиолетовый цвет.

3. Качественная реакция. 0,1 г препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 1 мл 0,1% раствора и 2 мл 1,5% раствора натрия гипохлорита; наблюдается красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Препарат дает характерную реакцию на сульфаты (ОФС "Общие реакции на подлинность").

Прозрачность раствора. 25% свежеприготовленный раствор препарата в воде, свободной от углерода диоксида, должен выдерживать сравнение с эталоном II (ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей").

Цветность раствора. 25% свежеприготовленный раствор препарата в воде, свободной от углерода диоксида, должен выдерживать сравнение с эталоном GY₅ и Y₅ (ОФС "Степень окраски жидкостей").

pH. От 4,5 до 7,0 (25% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Механические включения. Видимые. В соответствии с ОФС "Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах".

Невидимые. В соответствии с ОФС "Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения".

Стрептомицин B. Испытание проводят методом ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная - метанол - толуол 1:1:2.

Испытуемый раствор. Около 0,2 г препарата помещают в колбу для перегонки вместимостью 50 мл, растворяют при энергичном перемешивании в 5 мл свежеприготовленной смеси серная кислота концентрированная - метанол 3:97. Содержимое колбы кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают, промывают холодильник 10 мл метанола, собирая смывы в колбу с раствором, и доводят объем полученного раствора метанолом до 20 мл.

Стандартный раствор. Около 36 мг (точная навеска) D-маннозы помещают в колбу для перегонки вместимостью 50 мл, растворяют при энергичном перемешивании в 5 мл свежеприготовленной смеси серная кислота концентрированная - метанол 3:97. Содержимое колбы кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают, промывают холодильник 10 мл метанола, переносят количественно полученный раствор в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора метанолом до метки. 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора метанолом до метки.

Полученный раствор содержит эквивалент 0,03% раствора стрептомицина B (1 мг D-маннозы соответствует 4,13 мг стрептомицина B).

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают по 1 мл испытуемого и стандартного растворов.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, стандартного раствора и раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом, предварительно насыщая камеру парами растворителей в течение не менее 12 ч. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и опрыскивают свежеприготовленной смесью равных объемов 0,2% раствора 1,3-дигидроксинафталина в спирте 96% и 20% раствора серной кислоты. Пластинку выдерживают при температуре 110 °C в течение 5 мин, охлаждают и просматривают при дневном свете.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы видны 2 четко разделенные зоны адсорбции.

Зона адсорбции стрептомицина B на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции, полученную на хроматограмме стандартного раствора (не более 3%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 7,0% (ОФС "Потеря в массе при высушивании"). Около 1,0 г (точная навеска) препарата сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60 °C и остаточном давлении, не превышающем 0,7 кПа (5 мм рт. ст.) в течение 3 ч.

Однородность массы. В соответствии с ОФС "Однородность массы дозированных лекарственных форм".

Аномальная токсичность. Препарат должен быть нетоксичным (ОФС "Аномальная токсичность"). Тест-доза: 1,3 мг препарата в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг стрептомицина (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС "Стерильность").

Количественное определение. Проводят определение в соответствии с ОФС "Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар".

Хранение. В плотно закрытой упаковке, в защищенном от света месте.