Редакционная коллегия:

Калинин В.А. - к.с.н., профессор, зав. кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н.

Российский институт лекарственных культур: Борисов Г.С. - зав. КТЛ РРСТАЗР: Федорова Н.Е. - к.х.н., МНИИГ им. Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Диметипин-2,3-дигидро-5,6-диметил-1,4-дитин-1,1,4,4-тетраоксид является действующим веществом дефолианта "Харвейд" Юнироял, США.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: .

Молекулярная масса 210,3.

В чистом виде - белое кристаллическое вещество, Т. пл. 162 - 167 °C. Растворимость: (г/100 г растворителя при 25 °C) в хлороформе - 6,8; дихлорметане - 13,9; диоксане - 13,9; этилацетате - 6,7; ацетоне - 18,6; толуоле - 1,7; этаноле - 1,5; воде - 0,3.

Рекомендуется в качестве дефолианта на хлопчатнике, льне, подсолнечнике. МДУ и ПДК не установлены.

для крыс 1180 мг/кг.

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении диметипина из воды хлороформом, почвы - водой, семян - смесью ацетонитрил-вода, очистке экстракта перераспределением в органический растворитель, дополнительной очистке экстрактов из семян на колонке с окисью алюминия с последующим определением препарата методом ГЖХ с детектором постоянной скорости рекомбинации электронов.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода.

Минимально детектируемое количество - 0,5 нг (чувствительность детектора). Линейный динамический диапазон - 0,5 - 4 нг.

Нижний предел определения, мг/кг, мг/л

вода - 0,0015

почва - 0,01

льносемена - 0,02

семена хлопчатника - 0,02.

Среднее значение определения, %

вода - 94,6

почва - 86,3

льносемена - 78,6

семена хлопчатника - 76,4.

Стандартное отклонение, %

вода - 3,6

почва - 7,4

льносемена - 8,6

семена хлопчатника - 8,9.

Относительное стандартное отклонение, %

вода - 2,8

почва - 4,1

льносемена - 4,3;

семена хлопчатника - 4,9.

Доверительный интервал при P = 0,95, n = 15, %

вода - 94,6 +/- 3,4

почва - 86,3 +/- 5,7

льносемена - 78,6 +/- 6,0

семена хлопчатника - 76,4 +/- 7,2.

Дистиллированная вода.

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-11-8-71.

Этилацетат, ч.д.а., ГОСТ 22300-76.

Ацетонитрил, х.ч., МРТУ 6-09-3534-74.

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Окись алюминия нейтральная, Хемапол.

Сульфат натрия, безводный, ГОСТ 4166-76.

Хроматон N-супер (0,125 - 0,160 мм) с 3% OV-120, Хемапол.

Диметипин, ан. стандарт, фирма Юнироял.

Стандартный раствор диметипина в ацетоне с концентрацией 100 мкг/мл. Рабочий раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл получают путем соответствующего разбавления стандартного раствора (100 мкг/мл).

Хроматограф "Цвет-106" с детектором постоянной скорости рекомбинации электронов.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.

Микроразмельчитель тканей РТ-2, ТУ 64-1-1505-73.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Делительные воронки на 500, 100 мл, ГОСТ 10054-75.

Колбы плоскодонные, конические на 250, 500 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы круглодонные на 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Мерные цилиндры на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 0,1 и 1 мл, ГОСТ 1770-74.

Колбы грушевидные на 50 мл, ГОСТ 10384-72.

2.4.1. Отбор проб

Пробы для анализа отбирают согласно "Унифицированным правилам отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденным зам. Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 г., N 2051-79.

Почва. 10 г воздушно-сухой, просеянной через сито 2 мм почвы, гомогенизируют с 200 мл дистиллированной воды в микроразмельчителе тканей в течение 3-х минут при скорости вращения ножа-размельчителя 5000 об/мин. Затем суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 минут, фильтруют, а твердый остаток повторно гомогенизируют с 200 мл воды, центрифугируют, фильтруют и фильтраты объединяют в делительной воронке.

Из водного раствора диметипин извлекают этилацетатом (хлороформом) дважды по 100 мл. Объединенный этилацетат осушают и упаривают, на ротационном испарителе досуха при температуре не более 40 °C. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и аликвоту 2 - 5 мкл хроматографируют.

Вода. 100 мл воды экстрагируют этилацетатом (хлороформом) дважды по 100 мл и в дальнейшем поступают так, как описано для почвы.

Семена (лен, хлопчатник). 5 г измельченных льносемян экстрагируют 100 мл смеси ацетонитрил-вода (2:1) при встряхивании в течение часа. Раствор фильтруют, промывают остаток в колбе 50 мл смеси ацетонитрил-вода и фильтруют. Объединенный фильтрат переносят в делительную воронку, добавляют 150 мл воды и препарат экстрагируют хлороформом дважды по 100 мл. Хлороформ сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель упаривают на ротационном испарителе до объема 1 - 2 мл. Для очистки образца в широкий бюкс присыпают 10 г окиси алюминия и количественно переносят хлороформный экстракт на сорбент. Растворитель удаляют в вытяжном шкафу, помещая бюкс на песочную баню с температурой 40 °C. Сорбент тщательно перемешивают и переносят в хроматографическую колонку с ватным тампоном. Диметипин элюируют 300 мл воды со скоростью вытекания элюата из колонки 90 - 100 капель в минуту (скорость регулируют с помощью вакуума, создаваемого водоструйным насосом). Из водного раствора диметипин экстрагируют этилацетатом (хлороформом) дважды по 100 мл. Дальнейшие процедуры аналогичны описанным для почвы.

Условия хроматографирования.

Колонка спиральная 1800 x 3 мм, заполненная хроматоном N-супер с 3% OV-210.

Расход носителя (азот ос.ч.) - 30 мл/мин.

Продувка детектора - 150 мл/мин.

Температура колонки - 180 °C.

Температура испарителя - 240 °C.

Температура детектора - 280 °C.

Время удерживания - 10 минут.

Линейный динамический диапазон - 0,5 - 4 нг.

Скорость диаграммной ленты - 240 мм/час.

Рабочая шкала электрометра - .

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки.

Количество диметипина в пробе рассчитывают по формуле:

X - количество диметипина, мг/л, мг/кг;

C - количество диметипина в стандартном растворе, введенного в хроматограф;

- высота пика стандартного раствора, введенного в хроматограф, мм;

- высота пика препарата в анализируемой пробе, мм;

- объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;

- объем анализируемой пробы, мкл;

P - масса анализируемой пробы, г, мл.

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.

Разработчики: А.Ф. Скурьят, Л.В. Зубкевич, Н.В. Петрашкевич, Н.В. Петрученя, Г.К. Карченя (Белорусский НИИ защиты растений).