Редакционная коллегия:

Калинин В.А. - к.с.н., профессор, зав. кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н.

Российский институт лекарственных культур: Борисов Г.С. - зав. КТЛ РРСТАЗР: Федорова Н.Е. - к.х.н., МНИИГ им. Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Клофентезин-3,6-Бис(2-хлорфенил)-1,2,4,5-тетразин является действующим веществом акарицидного препарата "Аполло", фирма Агрево, Германия.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: .

Молекулярная масса: 303,2.

Красное кристаллическое вещество без запаха, Т. пл. 182 - 186 °C. Растворимость (в г/л) при 25 °C: в хлороформе 50, в бензоле 2,5, в ацетоне 5, в циклогексане 1,7, в этаноле 1, в гексане 1, в воде < 0,001. Давление паров 13 фПа (25 °C). Коэффициент распределения октанол-вода 150. Слабо воспламеняем. Действующее вещество и препаративная форма акарицида стабильны на свету, воздухе и при нагревании.

Выпускается в виде 50%-ного с.п. и 50%-ного суспензионного концентрата. Применяется для борьбы с травоядными клещами на фруктовых деревьях, цитрусовых, виноградниках и декоративных культурах при нормах расхода 0,2 - 0,6 г/га, на хлопчатнике 0,5 - 1,0 кг/га.

для крыс < 3200 мг/л. Нетоксичен для пчел, малотоксичен для птиц.

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на определении клофентизина газожидкостной и тонкослойной хроматографией после концентрирования его из воздуха на фильтре и экстракции органическим растворителем.

2.1.2. Избирательность метода

Определению не мешают наполнители технического препарата.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Предел измерения в анализируемом объеме экстракта методом ГЖХ - 2 нг, методом ТСХ - 3 мкг. Чувствительность определения в воздухе (при отборе 100 л) - 0,01 мг/м3. Диапазон измеряемых концентраций 0,01 - 0,1 мг/м3.

Граница суммарной погрешности +/- 18%.

Для ГЖХ.

Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ 9293-74.

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2601-79.

Хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.

Натрий сульфат безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.

Клофентизин, ан. стандарт, фирма АгрЕво.

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.

Стандартный раствор клофентизина, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением в ацетоне 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл. Хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.

Для ТСХ.

Аммиак водный, 25%, ч.д.а., ГОСТ 3760-79.

Ацетон, ч., ГОСТ 2601-79.

Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.

Нитрат серебра, ч., ГОСТ 1277-75.

Пластинки "Силуфол" (Хемапол, ЧССР).

Сульфат натрия безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.

Подвижная фаза гексан - ацетон (4:1 по объему).

Проявляющий реагент: растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 - 10 мл аммиака (d = 0,90 г/см3) и доводят объем раствора до 200 мл ацетоном.

Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации электронов (ДПР) типа "Цвет", "Кристалл" и др.

Электроаспиратор, ТУ 64-1-862-77.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-79.

Колонка стеклянная 1000 x 3 мм.

Микрошприц МШ 10 М на 10 мкл, ТУ 283-3-106.

Лампа ртутно-кварцевая, ТУ 61-1-16-18-77.

Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.

Колбы грушевидные, круглодонные на 25, 50, 250 мл, ГОСТ 23932-79.

Камера хроматографическая, ГОСТ 23932-79.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.

Фильтродержатель.

Воздух со скоростью 5 л/мин аспирируют 20 мин через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр "синяя лента". Рекомендуется отобрать 3 параллельные пробы (хранят в холодильнике не более 2-х месяцев).

2.5.1. Газохроматографический метод

Бумажный фильтр из фильтродержателя после отбора пробы помещают в коническую колбу, заливают 20 мл ацетона и содержимое встряхивают в течение 20 мин. Экстракцию повторяют еще раз. Экстракты объединяют, ацетон сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до 1 мл, аликвоту вводят в хроматограф, а оставшийся экстракт повторно концентрируют до объема 0,1 - 0,2 мл и наносят на хроматографическую пластинку.

Условия хроматографирования.

Хроматограф с ДПР.

Температура колонки - 220 °C, испарителя - 240 °C, детектора - 240 °C.

Вводимый объем - 5 мкл.

Шкала электрометра - .

Носитель - Хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм).

Неподвижная фаза - 5% SE-30.

Длина колонки - 1000 x 3 мм.

При указанных условиях хроматографирования препарат дает три пика: один основной (t уд. 4,8 мин) и два других (t уд. 2,5 мин и 7,4 мин).

Линейный диапазон детектирования (по основному пику) 2 - 25 нг.

Минимально детектируемое количество (основной пик) - 2 нг.

Для количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе и стандартном растворе (при условии, что пики близки по величине, определение ведется в линейном динамическом диапазоне детектора).

Содержание клофентизина в пробе рассчитывают по формуле:

где - концентрация клофентизина в стандартном растворе, мкг/мл;

- площадь пика стандарта, мм2;

- площадь пика пробы, мм2;

- объем стандарта, введенный в хроматограф, мкл;

- объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;

- общий объем пробы после упаривания, мл;

- объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям, л.

2.5.2. Метод тонкослойной хроматографии

Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 - 0,2 мл, количественно наносят на пластинку "Силуфол". Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием клофентизина 3,0; 5,0; 10,0 мкг. Образцы хроматографируют в смеси растворителей гексан - ацетон (4:1). Клофентизин в стандартном растворе и пробе обнаруживается на пластинке в виде пятна красного цвета.

Для повышения надежности идентификации пластинку после хроматографирования можно обработать водно-ацетоновым раствором аммиаката серебра и после этого поместить на 30 мин под УФ-облучение. Клофентизин обнаруживается в виде серо-черного пятна. Величина .

Содержание хлофентизина в исследуемой пробе вычисляют по формуле:

где A - количество препарата, найденное по хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям, л.

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.

Разработчики: Д.Б. Гиренко (УкрНИИГИНТОКС г. Киев).