1.1. Промежуточными (дополнительными) хозяевами гельминтов являются моллюски, орибатидные клещи, муравьи, мошки, дождевые черви.

1.2. Исследование промежуточных (дополнительных) хозяев на личинки гельминтов проводят в летние месяцы в местностях (хозяйствах), неблагополучных по данным гельминтозам.

1.3. Для исследования в лабораторию направляют промежуточных (дополнительных) хозяев по 10 - 20 экз., собранных на увлажненном участке луга, в мелком водоеме, на прибрежье болота, в луже, пруде, муравейнике с пастбища.

Отобранные пробы помещают в пробирки, закрывают пробками и доставляют в лабораторию в день отбора.

2.1. Исследование малого (усеченного) прудовика - промежуточного хозяина фасциолы обыкновенной. Моллюск имеет коническую тонкостенную раковину серовато-желтого цвета с 5 - 6 оборотами, устье - яйцевидной формы, повернутое вправо, сверху тупоугловатое.

Моллюска кладут на предметное стекло, отрезают ножницами верхушку раковины, переносят в каплю воды и исследуют под лупой. Моллюска можно исследовать целиком. Для чего его кладут на предметное стекло, накрывают другим стеклом, нажимают большими пальцами и исследуют в раздавленном препарате под лупой.

При микроскопии необходимо учитывать, что личинка (церкарий) - подвижна, молочного цвета, похожа на головастика, имеет ротовую и брюшную присоски, глотку, кишечные стволы.

2.2. Исследование орибатидного клеща - промежуточного хозяина мониезии жвачных. Это мелкие, темного цвета клещи.

Клеща кладут в каплю воды на предметное стекло, под лупой расщепляют панцирь и в полости тела находят личинок. При этом учитывают, что личинка (цистицеркоид) - шаровидной формы, покрыта толстой оболочкой, внутри тела расположен сколекс с четырьмя присосками и шейкой.

2.3. Исследование муравьев - дополнительных хозяев дикроцелий и промежуточных хозяев различных давэниат птиц.

Муравья кладут на предметное стекло, отсекают скальпелем брюшко, которое помещают в каплю воды и расщепляют препаровальными иглами под бинокулярной лупой или малым увеличением микроскопа.

При микроскопии учитывают, что личинка дикроцелии (метацеркарий) - овальной или яйцевидной формы, у нее хорошо различимы присоски, глотка, пищевод, кишечные стволы. Личинка давэниат (цистицеркоид) - также овальной или яйцевидной формы, внутри у нее сколекс и шейка, на сколексе заметны присоски и крючья.

2.4. Исследование мошек семейства симулиид - промежуточных хозяев онхоцерков крупного рогатого скота.

У мошки отделяют грудь с хоботком, которые помещают в каплю физиологического раствора на предметное стекло и вскрывают препаровальными иглами под лупой.

При микроскопии надо учитывать, что неинвазионные личинки находятся в грудке, инвазионные - в хоботке. Инвазионная личинка - удлиненной или сосискообразной формы, имеются пищевод, кишечник, нервное кольцо.

2.5. Исследование олигохет (дождевых червей) - промежуточных хозяев метастронгилюсов свиней и резервуарных - аскаридат.

Дождевых червей убивают, добавляя в пробирку несколько капель 1%-ного раствора формалина. Затем дождевого червя кладут на предметное стекло, разрезают ножницами кутикулу в передней четверти тела, отделяют пищевод, зоб, мускулистый желудок с окружающими кровеносными сосудами и помещают на предметное стекло, затем накрывают другим предметным, стекла сжимают и исследуют в раздавленном препарате под бинокулярной лупой.

2.6. Органы червей и моллюсков можно исследовать биохимическим методом - путем переваривания в искусственном желудочном соке (пепсин - 5 г, соляная кислота концентрированная - 10 мл, теплый физиологический раствор (43 °C) - 1000 мл). Органы червей и моллюска размельчают на предметном стекле, переносят в марлевый мешочек, кладут в воронку аппарата Бермана, заливают теплым искусственным желудочным соком в соотношении 1:15 и ставят в термостат при 43 °C на . Затем пробирку аппарата Бермана отсоединяют, отстаивают в течение 5 - 10 мин, надосадочную жидкость отсасывают, а каплю осадка помещают на предметное или часовое стекло и исследуют под лупой.

При микроскопии необходимо учитывать, что у инвазионной личинки метастронгилюса задний конец острый, передний - тупой, недалеко от хвостового конца имеется маленький кутикулярный шип; личинка аскариды - белого цвета, имеет пищевод, кишечник в виде трубки.

3. Результат исследования считают положительным при обнаружении в препаратах личинок гельминтов.

4. Срок микроскопического исследования - 2 дня.

Сбор и учет гельминтов при вскрытиях животных. Червей из органов или их содержимого извлекают препаровальной иглой или кисточкой и помещают цестод, скребней и трематод в воду, а нематод - в 3%-ный раствор формалина. Оставлять гельминтов сухими на воздухе даже на короткое время не следует, так как в них проникает воздух, они становятся малопригодными для определения. Одновременно туда же помещают этикетку, написанную карандашом или тушью с указанием вида животного, органа, числа гельминтов, района, хозяйства, даты вскрытия и фамилии вскрывавшего. Пробирку закупоривают корковой пробкой и заливают воском или парафином.

Фиксация гельминтов. Круглых червей и пузырчатые формы ленточных червей фиксируют, сохраняют в жидкости Барбагалло (1000 мл воды, 30 г формалина и 9 г поваренной соли). Цестод, скребней и трематод, чтобы предварительно умертвить, промывают водой, в которой выдерживают несколько часов; затем для хранения переносят в 70%-ный спирт. Ленточных червей и трематод после промывания водой помещают между двумя предметными стеклами (мелкие формы между покровными стеклами). На препараты для их прессования кладут груз. В таком виде червей помещают в бактериологическую чашку, в которую осторожно наливают 70%-ный спирт. Через 10 - 12 ч их можно переложить в пробирку с тем же 70%-ным спиртом.

При полных гельминтологических вскрытиях и макрогельминтоскопиях фекалий не полностью просмотренные материалы (сливы) часто фиксируют 5 - 10%-ным раствором формалина, чтобы материал был пригоден для последующих исследований.

Обнаружение гельминтов при патологоанатомических вскрытиях и боенском осмотре. У жвачных животных могут быть замечены невооруженным глазом следующие гельминты:

в брюшной полости - цистицерки тонкошейные (на серозных покровах), сетарии;

в мозгу - ценуры, элафостронгилы;

в конъюнктивальной полости, слезных железах и их протоках - телязии;

в пищеводе (под слизистой оболочкой) - гонгилонемы;

в рубце - парамфистомататы, пигаргинемы;

в сычуге - гемонхи, парабронемы, пигаргинемы, трихостронгилиды;

в тонких кишках - аноплоцефаляты (мониезии, тизаниезии и др.), буностомы, аскаридаты (неоаскариды, аскариды), трихостронгилиды, скрябинемы;

в толстых кишках - эзофагостомы, хабертии, трихоцефалы (власоглавы);

в печени - фасциолы, дикроцелии, эхинококки (личиночная пузырчатая стадия);

в поджелудочной железе - эуритремы;

в альвеолах, бронхиолах, бронхах, трахее - диктиокаулы, протострогилы, мюллерии;

в легких - эхинококки (личиночная пузырчатая стадия);

в кровеносной системе - орнитобильхарции (в кровеносных сосудах печени), дипеталонемы (в кровеносных сосудах легких, печени, семенников, сосудах брыжейки, в полостях сердца у верблюдов);

в поперечнополосатой мускулатуре - цистицерки бычьи (у крупного рогатого скота), цистицерки овечьи (у ряда мелких животных);

в подкожной клетчатке - парафилярии (у крупного рогатого скота);

в шейных и гастролинеальной связках крупного рогатого скота - онхоцерки;

в коже крупного рогатого скота - стефанофилярии, рабдитиды.

У лошади и осла:

в брюшной полости - цистицерки тонкошейные (на серозных покровах), сетарии;

в мозгу - ценуры (личиночная стадия);

в сердце, глазах, межмышечной соединительной ткани - финны, сетарии;

в желудке - трихостронгилиды, физоцефалюсы свиней (факультативно);

в тонких кишках - аноплоцефалы, параскариды, трихонематиды, физоцефалюсы свиней (факультативно);

в толстых кишках - аноплоцефалы, оксиурисы, делафондии половозрелые (личинки делафондии - в узелках слизистой, в артериальной системе, печени, легких); альфортии половозрелые (личинки альфортий - под серозными покровами брюшной полости и в слизистой); стронгилюсы половозрелые (личинки стронгилюсов - в поджелудочной железе и слизистой); трихонематиды половозрелые (личинки трихонематид - в слизистой);

в печени - фасциолы, дикроцелии, сетарии;

в селезенке - сетарии;

в трахее и бронхах - диктиокаулы;

в подкожной клетчатке - парафилярии;

в выйной связке и сухожилиях сгибателей - онхоцерки (личиночная стадия).

У свиней:

в брюшной полости - цистицерки тонкошейные (на серозных покровах);

в мышце сердца, межмышечной соединительной ткани - финны (личиночная стадия), спарганумы;

в слизистой пищевода и глотки - гонгилонемы жвачных;

в желудке - аскаропсы, физоцефалюсы, оллуланы;

в тонких кишках - эхинохазмусы, лентецы широкие, аскариды, глобоцефалюсы, физоцефалюсы, тизаниезии (факультативно), оллуланы;

в толстых кишках - власоглавы, эзофагостомы, трихинеллы (половозрелые);

в желчных ходах печени - фасциолы, описторхисы;

в печени и легких - эхинококки (личиночная стадия);

в задних долях бронхов - метастронгилюсы;

в поперечнополосатой мускулатуре - личинки (трихинеллы).

У плотоядных:

в лобных пазухах - скрябингилы;

в правом желудочке сердца и в легочной артерии - дирофилярии сердца;

в опухолях аорты, пищевода, желудка - спироцерки;

в тонких кишках - эхинохазмусы, метагонимусы, алярии, мезоцестоидесы, дипилидиумы, эхинококки, цепень гидатигенный, цепень мультицепс, цепень пизиформный, лентец широкий, токсаскарисы, токсокары, трихинеллы (половозрелые), анкилостомы, унцинарии, капиллярии;

в толстых кишках - власоглавы;

в желчных ходах печени - описторхисы, клонорхисы;

в желчном пузыре, реже в поджелудочной железе - клонорхисы;

в разветвлениях бронхов, реже в печени и в других органах - парагонимусы, томинксы, филярииды;

в почечной лоханке, реже в брюшной полости - диоктофимы;

в мочевом пузыре - капиллярии;

в подкожной клетчатке - дирофилярии подкожной клетчатки;

в поперечнополосатой мускулатуре - личинки трихинелл.