Главная // Актуальные документы // Методические указания
СПРАВКА
Источник публикации
М.: Агропромиздат, 1986
Примечание к документу
Название документа
"Методические указания по лабораторной диагностике некробактериоза"
(утв. Минсельхозом СССР 12.02.1985)


"Методические указания по лабораторной диагностике некробактериоза"
(утв. Минсельхозом СССР 12.02.1985)


Содержание


Утверждены
Главным управлением ветеринарии
Минсельхоза СССР
12 февраля 1985 года
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ НЕКРОБАКТЕРИОЗА
1. Общие положения.
1.1. Некробактериоз - острая контагиозная болезнь всех видов животных и птиц, проявляющаяся гнойно-некротическим распадом соединительной и мышечной тканей.
1.2. Возбудитель болезни Fusobacterium necrophorum - строгий анаэроб, представляет собой грамотрицательную неподвижную, не образующую спор полиморфную палочку.
1.3. Диагноз на некробактериоз ставят на основании клинических, эпизоотологических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований.
1.4. Для исследования в лабораторию направляют трупы мелких животных целиком, от крупных животных - пораженные ткани и части паренхиматозных органов с некротическими очагами.
Для прижизненного исследования из мест поражения берут соскобы на границе здоровой и некротизированной тканей. Материал направляют в свежем виде или консервируют 30%-ным раствором глицерина.
1.5. Исследование на некробактериоз включает микроскопию мазков из патологического материала, посевы на питательные среды и заражение лабораторных животных.
2. Микроскопическое исследование.
2.1. Из некротизированных тканей делают мазки и окрашивают по Муромцеву, Романовскому-Гимзе или синькой Леффлера, а также по Граму.
2.2. В мазках из патологического материала, взятого на границе здоровой и некротизированной тканей, возбудитель имеет вид грамотрицательных, а при окраске специальными методами - зернистоокрашенных нитей различной длины, в старых очагах - коротких палочек и даже кокков.
3. Бактериологическое исследование.
3.1. Высевы из патологического материала делают в среду Китта-Тароцци, МПБ и на МПА. Кроме того, можно использовать сывороточно-глюкозный агар (чашки с агаром помещают в анаэробные условия, которые создают одним из общепринятых методов).
Среду Китта-Тароцци перед посевом регенерируют - прогревают в кипящей водяной бане в течение 20 - 30 мин, после чего быстро охлаждают до 45 - 50 °C.
Посевы инкубируют при 37 - 38 °C до 5 сут, просматривая ежедневно.
3.2. На среде Китта-Тароцци F. necrophorum через 13 - 24 ч образует интенсивную муть вначале в нижних слоях среды, а позднее - и в верхних, газообразование очень слабое. Просветление бульона наступает на 5 - 8-е сут, при этом на дно пробирки выпадает крошковатый осадок.
При микроскопии мазков из культуры обнаруживают зернистоокрашенные длинные переплетающиеся нити, местами в них могут быть колбовидные расширения.
3.3. На чашках с сывороточно-глюкозным агаром в строго анаэробных условиях через 48 - 72 ч появляются мелкие росинчатые колонии, в дальнейшем колонии увеличиваются в размерах и принимают более очерченную круглую или продолговатую форму с зоной гемолиза.
В связи с тем, что получение чистой культуры F. necrophorum из первичного материала на плотных средах затруднительно, выделение ее целесообразно проводить биологическим методом.
4. Биологическое исследование.
4.1. Одновременно с посевами проводят заражение кролика. Из патологического материала готовят суспензию на физиологическом растворе 1:10. Полученную суспензию в дозе 0,5 - 1 мл вводят под кожу средней трети наружной поверхности уха. Для заражения можно использовать суточную бульонную культуру возбудителя в тех же дозах.
Наблюдение за зараженными животными ведут в течение 10 сут.
4.2. При наличии в патологическом материале или исследуемой культуре F. necrophorum у кролика на месте инъекции через 3 - 4 дня развивается некроз. Из очага некроза делают мазки и окрашивают, как описано в п. 2.1. При обнаружении в мазках зернистоокрашенных нитей, характерных для возбудителя некробактериоза, биопроба считается положительной.
5. Диагноз на некробактериоз считают установленным в случаях:
выделения из патологического материала культуры со свойствами, характерными для возбудителя некробактериоза, и развития некротического очага у кролика на месте введения суспензии исходного материала или культуры с последующим обнаружением в мазках из этого очага типичных микроорганизмов;
развития у зараженного кролика некротического очага на месте введения материала и обнаружения в мазках из него типичных микробов, даже при отсутствии роста возбудителя в посевах из исходного материала.
6. Срок исследования - до 10 дн.