1. Общие положения.

1.1. Аспергиллез пчел (аспергилломикоз, каменный расплод) инфекционная болезнь взрослых пчел и расплода, вызываемая грибом Aspergillus flavus, а также A. fumigatus, A. niger.

1.2. Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, обнаружения характерных изменений у пчел и расплода, результатов микроскопического исследования препаратов и наличия типичных колоний в посевах.

1.3. В лабораторию направляют не менее 50 живых пчел с клиническими признаками болезни или столько же трупов из свежего подмора подозреваемых семей и вырезки расплода с погибшими личинками (10 x 15 см). Материал посылают в стеклянных банках с притертыми пробками. Срок доставки в лабораторию - в течение суток с момента отбора материала.

2. Лабораторные исследования.

2.1. Лабораторные исследования включают внешний осмотр пчел и личинок, микроскопическое исследование соскобов и выделение культуры возбудителя.

2.2. При осмотре пчел и личинок обращают внимание на наличие на поверхности тела грибного налета желто-зеленого или черного цвета в зависимости от вида поражающего гриба. Налет также хорошо заметен на дне ячейки после извлечения из нее личинки, которая может прикрепляться к ячейке сота разросшимся мицелием, высохшие личинки имеют твердую консистенцию (каменный расплод).

2.3. Для микроскопического исследования готовят препараты. Соскобы с поверхности погибших пчел, личинок, а также сотов помещают на предметное стекло в каплю раствора, состоящего из равных частей спирта, воды и глицерина, покрывают покровным стеклом и исследуют под малым и средним увеличением микроскопа.

2.4. С целью выделения культуры возбудителя заболевания кусочки трупов пчел и личинок помещают в чашки Петри на агар Чапека и культивируют при 25 - 30 °C. Для предупреждения роста посторонней микрофлоры к среде добавляют антибиотики (пенициллин 50 ЕД/мл, стрептомицин 100 ЕД/мл).

Через 3 - 4 дня на среде появляются желто-зеленые мелкозернистые колонии гриба A. flavus с воздушным мицелием по краям. Мицелий белого или желтого цвета с отходящими от него многочисленными конидиеносцами, на концах которых имеются булавовидные утолщения, несущие радиально расположенные одноярусные или двухъярусные стеригмы с цепочками бесцветных округлых конидий 3 - 6 мкм в диаметре.

В посевах из патологического материала колонии A. fumigatus темно-зеленого цвета, A. niger черно-коричневого.

2.5. Лабораторный диагноз на аспергиллез считают установленным при обнаружении характерных изменений у пчел и расплода и возбудителя болезни в препаратах из материала от них или выделении культуры возбудителя даже при отсутствии характерных изменений у пчел.

2.6. Срок проведения лабораторных исследований до 5 дней.