Настоящая общая фармакопейная статья определяет основные требования и положения, предъявляемые к стандартным образцам (СО), которые могут применяться для оценки качества лекарственных средств (ЛС), включая биологические лекарственные средства (БЛС), и тем самым являться неотъемлемой частью фармакопейной статьи (ФС) или нормативной документации (НД).

Настоящая общая фармакопейная статья не распространяется на стандартные образцы генотерапевтических лекарственных средств и радиофармацевтических препаратов.

Цель использования СО в фармакопейном анализе - достижение надлежащего уровня контроля качества субстанций для фармацевтического применения и лекарственных препаратов. В рамках фармакопейной статьи могут использоваться только фармакопейные стандартные образцы (ФСО).

СО не предназначены для использования в качестве лекарственных средств.

Стандартные образцы (СО) - вещества, посредством сравнения с которыми осуществляется контроль качества исследуемых лекарственных средств с помощью физико-химических и биологических методов в целях подтверждения соответствия лекарственных средств требованиям нормативной документации, установленным при осуществлении государственной регистрации, и которые применяются для калибровки стандартных образцов производителя лекарственных средств, используемых для контроля качества и иных целей при обращении лекарственных средств.

Фармакопейный стандартный образец (ФСО) - стандартный образец, произведенный в соответствии с фармакопейной статьей (ФС).

Стандартный материал - материал или вещество, обладающий однородностью по одному или несколькими свойствам, которые аттестованы для определения количественных показателей качества материала, при оценке методики измерения или калибровке прибора.

Аттестация стандартных образцов - исследование, направленное на установление значений аттестованных характеристик в соответствии с программой и/или методикой испытаний, с последующим оформлением надлежащих документов (паспорт, инструкция по применению СО, макетов этикетки первичной и вторичной упаковки). Аттестация СО предполагает проведение испытаний по исследованию однородности, стабильности, определению аттестованного значения и границ его погрешности или неопределенности, определению оптимальных условий хранения и транспортировки.

Аттестуемая характеристика стандартных образцов - величина или зависимость 2 величин, характеризующая состав или свойства действующего вещества, примесей, вспомогательных веществ, аттестованное значение которых с указанием неопределенности устанавливают при аттестации СО, и приводят в паспорте на СО. Большинство СО имеют несколько аттестуемых характеристик.

Аттестованное значение стандартных образцов - значение аттестуемой характеристики СО, установленное при его аттестации и приводимое в паспорте и других документах на СО с указанием его погрешности или неопределенности. Аттестованное значение представляют числом, выражающим значение воспроизводимой СО величины в установленных единицах.

Однородность стандартных образцов - свойство СО, выражающееся в постоянстве значения аттестуемой характеристики СО, присущего любой части СО, используемой при его применении согласно назначению (т.е. идентичность содержимого каждой упаковки данной серии СО по составу, количеству, активности и стабильности содержимому всех остальных упаковок данной серии СО).

Неопределенность аттестованного значения - как правило, оценивают по стандартному отклонению аттестованного значения с определенным коэффициентом охвата или границы интервала аттестованного значения при определенном коэффициенте охвата.

Так как оценка систематической ошибки биологических методов затруднена, вследствие невозможности установления истинного значения измеряемой величины, неопределенность методики может быть оценена по результатам межлабораторного эксперимента в рамках ее валидации, проведенной в условиях воспроизводимости. Для международных СО аттестованное значение может быть приведено без указания неопределенности.

Погрешность аттестованного значения стандартных образцов - отклонение аттестованного значения от истинного значения аттестуемой характеристики экземпляра СО (при его наличии), а также любой его части (доли, навески), используемой для измерений.

Погрешность от неоднородности СО - погрешность аттестованного значения СО, обусловленная отклонением значений аттестуемой характеристики СО в любой наименьшей представительной пробе СО от его аттестованного значения.

Дополнительные характеристики стандартных образцов - значения величин, характеризующих состав или свойства СО, приводимые без указания их погрешностей или неопределенности в паспорте и других документах на СО. Дополнительные характеристики СО используются при установлении ограничений по применению СО для конкретных целей.

Стабильность стандартных образцов - свойство СО, выражающееся в неизменности значений аттестованной характеристики СО во времени при соблюдении условий хранения, транспортирования и применения.

Срок годности стандартных образцов - интервал времени, исчисляемый с даты выпуска серии СО, в течение которого гарантируется соответствие аттестованных характеристик СО характеристикам, указанным в его паспорте.

Программа аттестации стандартных образцов - раздел технической документации на СО, устанавливающий объем, виды и последовательность выполнения работ по аттестации СО, место и сроки их проведения, форму представления отчетных данных.

Методика аттестации стандартных образцов - раздел технической документации на СО, устанавливающий перечень определяемых характеристик СО, методы, средства и алгоритмы измерений, способы обработки результатов измерений и форму их представления. Программу и методику аттестации СО допускается объединять в 1 документ.

Признание (утверждение) стандартных образцов - решение уполномоченного органа о соответствии СО требованиям, распространяющегося на него нормативного документа и допуска его к применению в соответствии с назначением.

Межлабораторная аттестация стандартных образцов - аттестация СО, основанная на использовании результатов измерений, выполненных независимо в нескольких лабораториях с применением одного или нескольких методов измерений.

В зависимости от процедуры аттестации стандартные образцы могут быть первичными и вторичными. Кроме того, различают стандартные образцы следующих категорий: международные, межгосударственные (региональные), государственные, фармакопейные, отраслевые СО, а также СО предприятий.

Первичный стандартный образец - стандартный образец, обладающий необходимыми свойствами для целенаправленного использования, аттестация которого осуществляется без сравнения с существующими стандартными образцами.

Вторичный стандартный образец - стандартный образец, аттестованный в результате сравнения с первичным стандартным образцом.

Международный стандартный образец - стандартный образец, активность которого выражена в международных единицах. Эквивалентность международных единиц (МЕ) международного стандартного образца утверждена Всемирной Организацией Здравоохранения (ВОЗ).

Межгосударственный (региональный) стандартный образец - стандартный образец, признанный в рамках Европейского союза или Евроазиатского экономического союза в соответствии с установленными правилами и применяемый в государствах, присоединившихся к его признанию.

Стандартный образец предприятия - стандартный образец, утвержденный в установленном порядке и применяемый в соответствии с нормативными документами предприятия, аттестуется в установленном порядке с использованием международных или фармакопейных стандартных образцов и является, как правило, вторичным стандартным образцом. В исключительных случаях для новых лекарственных средств при отсутствии международных СО ВОЗ или фармакопейных СО эти образцы могут являться первичными СО.

СО подразделяются на химические, биологические и растительные в зависимости от природы вещества/веществ, входящих в их состав.

Химический стандартный образец. Вещество или смесь веществ, химического происхождения, которые предназначены для использования в соответствии с указаниями ФС или НД, а также отдельных общих фармакопейных статей (ОФС). Содержание субстанции в химическом СО выражается в процентах, за некоторым исключением (как правило, антибиотики), когда количественное содержание выражено в МЕ. В последнем случае СО являются вторичными, аттестованными по международным СО.

Биологический стандартный образец (препарат). Вещество или смесь веществ биологической природы, которые предназначены для использования в соответствии с указаниями ФС или НД, а также отдельных ОФС. Биологические СО являются либо первичными СО, либо вторичными, аттестованными по Международным СО. Их активность, как правило, выражается в МЕ. Могут быть использованы также другие присвоенные значения, например, титр вирусов, или число бактерий.

Растительный стандартный образец. Вещество или смесь веществ растительного происхождения. Для лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов в качестве стандартных образцов могут быть использованы биологически активные вещества растений (вещества с известной фармакологической активностью), вещества-маркеры активные и/или неактивные (химические вещества, используемые для идентификации и/или количественного определения основных веществ), а также стандартизованное лекарственное растительное сырье или экстракты. Последние должны быть охарактеризованы с использованием стандартных образцов биологически активных веществ или веществ-маркеров.

При оценке фармацевтической субстанции или лекарственного препарата различного происхождения на его соответствие требованиям ФС и/или НД используются как стандартные образцы веществ или препаратов, так и стандартные образцы возможных примесей.

Для установления подлинности лекарственных средств наряду со СО могут быть использованы эталонные ИК-спектры, приведенные в Государственной фармакопее РФ.

Стандартные образцы фармацевтических субстанций могут быть получены прямым синтезом и/или доочисткой фармацевтических субстанций до требуемой степени чистоты.

Стандартные образцы примесей могут быть получены либо прямым синтезом, либо выделением из фармацевтических субстанций, либо в процессе их получения.

Стандартные образцы биологического происхождения, как правило, представляют собой аттестованные серии препаратов биологического происхождения.

Производство стандартных образцов (в частности, биологических СО) должно осуществляться в соответствующих по классу чистоты помещениях с использованием аттестованного оборудования и валидированного процесса производства, обеспечивающего постоянство регламентированного качества материала СО.

Количество изготовленных единиц стандартных образцов, входящих в серию, должно обеспечивать не только возможность проведения аттестации СО и его дальнейшее применение по прямому назначению, но и возможность проведения мониторинга стабильности.

Содержимое всей упаковки конкретной серии должно быть идентичным по составу, количеству, активности и стабильности, все СО должны быть получены при фасовке одного и того же однородного исходного материала и обработаны в одинаковых условиях за один производственный цикл.

Стеклянные упаковки (ампулы или флаконы) должны быть изготовлены из нейтрального стекла, при этом в стекле не должно быть внутренних напряжений. Стекло должно выдерживать стерилизацию нагреванием и перепады температуры (например, быстрое охлаждение до минус 80 °C или ниже), если эти процедуры предусмотрены при производстве СО. Толщина стенок стеклянной упаковки должна быть не менее 0,5 мм для предотвращения проникновения газов.

При использовании пластиковых упаковок (пробирок, флаконов), их пригодность должна быть подтверждена экспериментально.

При наличии в процессе производства СО стадии лиофилизации используются упаковки только с ровным плоским дном (для обеспечения равномерной теплопроводности между дном упаковки и поверхностью полки).

Очистку упаковки в случае необходимости проводят различными методами. При использовании автоклавирования пар, поступающий в автоклав, не должен содержать никаких летучих или нелетучих примесей.

При осуществлении фасовки СО методом розлива для определения полученной массы следует отбирать образцы в начале, середине и конце розлива. Колебания массы при розливе, характеризуемые коэффициентом вариации, должны составлять не более 1%.

Используемые противомикробные консерванты не должны воздействовать на действующее вещество в процессе лиофилизации или влиять на его стабильность в течение срока годности.

Используемые вспомогательные вещества (наполнители) не должны влиять на результаты испытаний или тестов, для которых СО предназначен, или оказывать неблагоприятное воздействие на его активность.

Для лиофилизированных стандартных образцов должны быть установлены оптимальные условия замораживания (температура, скорость замораживания) и режим лиофилизации.

Ампулы запаивают под вакуумом или после заполнения инертным газом, например, азотом или аргоном (газ должен быть свободен от кислорода). Наличие вакуума или содержание остаточного кислорода подлежит контролю. До заполнения ампулы должны как можно меньше подвергаться воздействию атмосферного воздуха и быть защищены от действия света и влаги.

Процесс производства стандартных образцов должен быть документирован.

Стандартные образцы применяют при анализе фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов в испытаниях на подлинность, чистоту и количественное определение.

Биологические стандартные образцы также могут использоваться для определения валидационных характеристик диагностических наборов для выявления маркеров/возбудителей инфекционных заболеваний.

Каждый стандартный образец имеет определенную область применения и не может быть использован в других целях. Например, вторичный СО используется для тех же целей, что и первичный СО, согласно которого он был аттестован.

Требования к чистоте стандартного образца зависят от его предполагаемого использования.

В зависимости от поставленных задач могут быть использованы СО различных категорий: первичные СО (международные СО, СО отечественной и зарубежных фармакопей (ФСО), государственные СО), вторичные СО и химические вещества требуемой степени чистоты (для определения примесей - посторонних примесей, органических растворителей, оценки пригодности хроматографической системы и др.).

Для установления подлинности ЛС наряду со СО могут быть использованы эталонные ИК-спектры, приведенные в Государственной фармакопее РФ.

Первичный стандартный образец

При проведении аттестации первичного стандартного образца используют различные взаимодополняющие методы анализа.

Основные разделы испытаний

- Описание вещества (структурное описание) - осуществляется с помощью подходящих химических характеристик, таких как: структурная формула, эмпирическая формула и молекулярная масса. При этом могут быть использованы различные методы, включая:

- спектрометрию ядерного магнитного резонанса;

- масс-спектрометрию;

- инфракрасную спектрометрию;

- элементный анализ.

- Определение чистоты включает:

- определение содержания органических примесей подходящим методом разделения или спектрофотометрическим методом;

- определение содержания воды;

- определение содержания остаточных растворителей;

- определение потери в массе при высушивании, которое может в некоторых случаях заменить определение воды и остаточных растворителей;

- определение неорганических примесей (тяжелые металлы, сульфатная зола и др.) проводится с использованием спектрометрии индуктивно связанной плазмы, атомной спектрометрии, рентгеновской флуоресценции; результаты не используются при количественном определении устанавливаемого содержания основного компонента, за исключением значительного влияния на это содержание;

- определение чистоты абсолютным методом, например, дифференциальная сканирующая калориметрия или фазовая растворимость; результаты этих определений используются для подтверждения результатов, полученных с использованием методов разделения; они не используются при количественном определении устанавливаемого содержания основного компонента.

- Количественное определение. Содержание основного компонента обычно рассчитывают исходя из значений, полученных при определении примесей (органические примеси, неорганические примеси, вода и остаточные растворители), используя принцип материального баланса; могут применяться и другие пригодные методы.

Для биологических стандартных образцов подлинность, чистота подтверждается различными взаимодополняющими физико-химическими, иммунохимическими методами анализа (ЯМР-спектроскопия, масс-спектрометрия, ИФА, ВЭЖХ, электрофоретические и другие), а биологическая (специфическая) активность и количественное определение - биологическими, иммунохимическими, физико-химическими методами.

Для стандартных образцов, используемых только в качественных методах, количественное содержание возможно не указывать.

Отчет об аттестации стандартных образцов утверждается в установленном порядке.

Кандидаты в фармакопейные стандартные образцы испытываются с помощью различных аналитических методов. Объем испытаний и количество участвующих лабораторий зависит от используемого СО. Обычно требуется соответствие кандидата требованиям соответствующей фармакопейной статьи или ОФС Государственной фармакопеи РФ, другие подходы должны быть обоснованы.

При проведении межлабораторных испытаний СО протокол испытаний направляется каждому участнику.

Фармакопейный стандартный образец аттестуют с использованием различных аналитических методов, выбранных для подтверждения его пригодности для данного использования, включенных в разработанный нормативный документ.

Объем проводимых исследований и требования к чистоте СО зависят от его предполагаемого использования.

Фармакопейный стандартный образец для установления подлинности не требует высокой степени очистки. Для испытания на подлинность (ИК- и УФ-спектрофотометрия, хроматография) можно использовать субстанцию, полная характеристика структуры которой установлена на первой серии, произведенной согласно технологическому регламенту и соответствующей требованиям нормативного документа, без дополнительной очистки.

Если фармакопейный стандартный образец производится впервые, необходимо подтвердить его структуру различными взаимодополняющими химическими и физико-химическими методами анализа, такими как элементный анализ, ИК- и ЯМР-спектроскопия, масс-спектрометрия. Для ФСО, используемых для установления подлинности, количественное содержание не указывают.

У биологических фармакопейных стандартных образцов, предназначенных для испытания на подлинность, структура подтверждается различными взаимодополняющими физико-химическими, иммунохимическими методами анализа (ЯМР-спектроскопия, масс-спектрометрия, ИФА и другие), а биологическая (специфическая) активность - биологическими и иммунохимическими методами.

Оценка качества ФСО, используемого для определения специфической примеси, проводится по установлению подлинности и чистоты. ФСО для испытаний на посторонние примеси может представлять собой синтезированную или специально выделенную и очищенную примесь. При количественном содержании основного вещества от 95% и выше его принимают за 100%. При содержании основного вещества менее 95% в расчетах необходимо учитывать значение фактического содержания.

Если примесь не может быть получена в достаточном количестве, возможны следующие варианты:

- подготовка стандартного образца, содержащего смесь основного соединения(ий) и примеси или примесей;

- подготовка стандартного образца, содержащего смесь указанных примесей.

Содержание примеси в таком стандартном образце определяют соответствующими валидированными методами разделения.

У биологических фармакопейных стандартных образцов, предназначенных для испытания на чистоту количественное определение проводят различными взаимодополняющими физико-химическими методами анализа, устанавливая аттестованное значение для каждого используемого метода.

Оценку качества ФСО, предназначенного для количественного определения физико-химическими методами, осуществляют различными методами.

Для определения количественного содержания действующего вещества в ФСО рекомендуется использовать метод, основанный на материальном балансе: сумма всех определенных в ФСО веществ: основное вещество, вода и летучие растворители, минеральные и нелетучие органические примеси, - должна составлять 100%.

При вычислении результатов количественного определения, полученных с использованием ФСО, учитывают фактическое содержание основного вещества в ФСО.

Содержание для ФСО может приводиться в пересчете на действующую часть молекулы в соответствии с требованиями содержания действующего вещества лекарственного препарата.

Если ФСО предназначен для использования не для хроматографического метода количественного определения (например, фотометрия или спектрофотометрия в ультрафиолетовой области), необходимо убедиться в отсутствии значимого поглощения примеси(ей) при выбранной длине волны.

В случае использования селективного метода определяют количество примесей максимально возможными методами анализа.

Для ФСО, приготовленных в процессе лиофилизации, обычно содержание указывают в миллиграммах или МЕ на упаковку, поскольку затем ее содержимое извлекают количественно.

Как правило (если нет других указаний в маркировке), для ФСО, в отличие от фармацевтической субстанции, обычно не используется пересчет на безводное или сухое вещество - присвоенное значение содержания указывают "как есть".

В некоторых случаях ФСО необходимо высушивать перед использованием (не в оригинальной упаковке), и тогда содержание указывают в расчете на высушенную субстанцию. При этом в сопроводительной документации указывают условия высушивания и время, в течение которого достигается постоянство массы.

Биологические ФСО для количественного определения биологическим методом аттестуют по международному стандартному образцу и выражают активность в условных международных единицах (МЕ) или мкг/мг, единицах тканевой цитопатогенной дозы (ТИЦД), 50% летальной дозы (LD₅₀), минимальной иммунизирующей дозы (МИД). В случае отсутствия международного стандартного образца, используются значения аттестуемой характеристики биологических ФСО для оценки специфической активности, например, бляшкообразующие единицы (БОЕ), колониеобразующие единицы (КОЕ), титр вируса и др. Аттестованное значение активности рассчитывается по результатам межлабораторных испытаний. Используются различные критерии валидности результатов, включая параллелизм, линейность и квадратичное отклонение в соответствии со стандартными статистическими процедурами. Аттестованное значение биологической активности и ее неопределенности рассчитывается из статистически валидных результатов.

Испытания для ФСО, используемых в ФС на лекарственное средство растительного происхождения, зависят от типа ФСО:

- активный компонент или входящее в состав вещество-маркер (активное и/или неактивное) характеризуют испытаниями на подлинность, чистоту и содержание;

- количественное содержание для стандартного растительного сырья или экстракта устанавливают с использованием стандартного образца активного компонента или вещества-маркера.

Вторичный СО должен иметь такие же свойства, что и первичный СО, сравнением с которым утверждают вторичный СО.

Стандартные образцы для установления подлинности. Для использования в ИК-спектрометрии: полосы поглощения должны соответствовать по положению и относительной величине полосам поглощения первичного СО. Для использования в методах разделения (хроматография, электрофорез): расстояние миграции/время миграции/время удерживания вторичного СО должны быть такими же, как для первичного СО.

Стандартные образцы для испытания на посторонние примеси. Для использования в методах хроматографического разделения - то же, что и для идентификации.

Стандартные образцы для количественного анализа. Для вторичного СО проводят количественное определение относительно первичного СО с присвоенным значением количественного содержания или активности. Присвоенное значение характеристики вторичного СО должно быть близким соответствующему значению первичного СО, с которым проводят сравнение. Предварительно в протоколе аттестации определяют количество независимых повторных испытаний и используемые критерии приемлемости.

Отчет по аттестации стандартных образцов должен содержать все необходимые сведения для его утверждения (отчет для СО, предназначенного для количественного определения, включает материалы по установлению аттестованного значения и его неопределенности).

В отчет об аттестации СО включают полные сведения (все первичные данные) о выполненной работе, необходимые для экспертной оценки и метрологической экспертизы представленных материалов, в том числе:

- обоснование необходимости разработки и назначение СО;

- описание технологии получения СО или ссылка на соответствующий документ;

- методика аттестации с указанием средств измерений и их погрешности, последовательности операций, экспериментальных данных, алгоритма и результатов статистической обработки данных по установлению аттестуемых характеристик СО;

- описание процедуры и экспериментальные данные по исследованию стабильности и однородности СО;

- копии документов, подтверждающих поверку средств измерений, материалы по валидации используемых методов; проект паспорта на СО, макеты этикеток СО, инструкция по безопасному применению СО.

Упаковка стандартных образцов должна обеспечивать его стабильность в течение срока годности и быть удобной для использования.

Твердые вещества расфасовывают в индивидуальные упаковки (предпочтительно флаконы), жидкости - обычно в запаиваемые ампулы.

Для лабильных веществ необходим полномасштабный контроль за условиями внешней среды (освещение, влажность, температура).

Вся информация, необходимая для правильного использования стандартного образца, приводится на упаковке, во вкладыше или сопроводительной документации.

На этикетке упаковки стандартного образца, фармакопейного стандартного образца указывают:

Название СО, ФСО.

Количество СО, ФСО, в миллиграммах (или в миллилитрах).

Активность или процентное содержание. При отсутствии этого указания стандартный образец принимают за 100,0%.

Номер серии.

Условия хранения.

Указания по использованию: "Для количественного определения", "Для идентификации методом ИК-спектрометрии", "Для определения посторонних примесей", "Перед использованием определить содержание воды", "Перед использованием высушить" и др.

Дата выпуска.

Срок годности.

Предупредительные надписи (при необходимости).

Условия хранения и транспортирования, указания по использованию, предупредительные надписи, а также необходимые методики могут быть приведены в прилагаемой сопроводительной документации.

При отсутствии указаний об условиях высушивания, стандартный образец следует использовать в том виде, в котором он получен.

Условия хранения и транспортирования СО устанавливают на основе результатов исследования стабильности СО.

Для большинства ФСО оптимальным является хранение в защищенном от света месте при температуре (5 +/- 3) °C в упаковках, предохраняющих образцы от проникновения влаги; при этом следует избегать помещений с повышенной влажностью.

Если требуются специальные условия хранения, они должны быть указаны на этикетке, паспорте на СО и инструкции по использованию СО.

Невскрытая упаковка со СО хранится в рекомендуемых условиях и используется сразу после вскрытия (если не указаны иные условия хранения).

Для гарантии длительной пригодности следует периодически проверять стандартные образцы на сохранность в процессе хранения. Проводят исследования любых признаков разложения соответствующими методами.

Периодичность и объем проводимых испытаний зависят от физико-химических свойств образца (физического состояния, стабильности, гигроскопичности), упаковки, условий хранения и области применения.

Целесообразно проводить следующие испытания:

- определение воды, потеря в массе при высушивании и/или термогравиметрический анализ;

- определение продуктов распада методами разделения;

- другие специфичные испытания для обнаружения продуктов распада.

Срок годности биологических СО устанавливают на основе результатов исследований стабильности СО методом естественного старения. Если в качестве материала СО используется лекарственное средство, внесенное в Государственный реестр лекарственных средств РФ, стабильность которого в течение определенного срока (срока годности) определена, то срок годности СО устанавливают равным сроку годности ЛС.

Следует проводить мониторинг стабильности СО в процессе хранения. Периодичность и объем проводимых испытаний зависят от свойств образца (физическое состояние, физико-химические и биологические свойства, стабильности, гигроскопичности), упаковки, условий хранения и области применения.