4-Амино-1-(2-дезокси-2,2-дифтор--D-эритро-пентофуранозил)пиримидин-2(1H)-она гидрохлорид

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% гемцитабина гидрохлорида C₉H₁₁F₂N₃O₄·HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в ацетоне.

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца гемцитабина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция дает характерную реакцию на хлориды (ОФС "Общие реакции на подлинность").

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей").

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании "Прозрачность раствора", должна выдерживать сравнение с эталоном BY₇ (ОФС "Степень окраски жидкостей").

pH. От 2,0 до 3,0 (1% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Удельное вращение. От +43,0 до +50,0 в пересчете на сухое вещество (1,0% раствор субстанции в воде, ОФС "Поляриметрия").

Вода. Не более 1,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют около 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза A (ПФА). Доводят pH раствора натрия дигидрофосфата моногидрата с концентрацией 13,8 г/л до 2,5 +/- 0,1 фосфорной кислотой концентрированной.

Подвижная фаза B (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. Около 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в 25,0 мл воды.

Раствор сравнения. 10 мг стандартного образца примеси A (цитозин - 4-аминопиримидин-2(1H)-он, CAS 71-30-7) растворяют в 10 мл воды, прибавляют 5,0 мл испытуемого раствора и доводят водой до 50,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят водой до 100,0 мл.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (R) между пиками примеси A и гемцитабина должно быть не менее 10;

- фактор асимметрии пика (A_s) гемцитабина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика гемцитабина должно быть не более 2,0% (6 определений).

Относительные времена удерживания соединений: гемцитабин - 1,0 (около 8 мин); примесь A - около 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A должна быть не более площади пика примеси A на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика гемцитабина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- суммарная площадь пиков всех примесей (кроме примеси A) не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжелые металлы", метод 2, в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции (ОФС "Сульфатная зола"), с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<*> Контроль по показателю качества "Бактериальные эндотоксины" проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси".

Испытуемый раствор. Около 25 мг (точная навеска) субстанции растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до 250 мл.

Раствор сравнения. Около 25 мг (точная навеска) стандартного образца гемцитабина гидрохлорида растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 250 мл.

В изократическом режиме при использовании ПФА не менее 5 раз хроматографируют раствор сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика гемцитабина должно быть не более 2,0% (6 определений).

Содержание гемцитабина гидрохлорида C₉H₁₁F₂N₃O₄·HCl в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, мг;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание основного вещества в стандартном образце гемцитабина гидрохлорида, %.

Хранение. В защищенном от света месте при температуре не выше 25 °C.