Настоящая фармакопейная статья распространяется на Красавки экстракт густой, получаемый из листьев или травы красавки белладонны - Atropa belladonna L. сем. пасленовых - Solanaceae экстракцией спиртом 20% при соотношении сырье:экстракт густой (4:1), применяемый для производства лекарственных препаратов.

Описание. Густая масса темно-коричневого цвета характерного запаха.

Раствор стандартного образца (СО) атропина сульфата. 0,01 г СО атропина сульфата растворяют в 10 мл спирта 70% и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес.

В колбу с притертой пробкой вместимостью 25 мл помещают 0,2 г экстракта и растворяют в 0,5 мл воды при перемешивании. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл аммиака раствора концентрированного 25%, 5 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин, затем добавляют 2 г натрия сульфата безводного и снова взбалтывают в течение 3 мин. Хлороформное извлечение фильтруют через вату (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полосы длиной 20 мм и шириной не более 2 мм 100 мкл (0,1 мл) испытуемого раствора, рядом наносят 50 мкл (0,05 мл) раствора СО атропина сульфата. Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей метанол - хлороформ - аммиака раствор концентрированный 25% (20:10:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом Драгендорфа, просматривают при дневном свете и фиксируют результаты разделения в течение не более 10 мин.

На хроматограмме раствора СО атропина сульфата должна обнаруживаться зона адсорбции красновато-оранжевого цвета на желтом фоне.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться доминирующая зона адсорбции красновато-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции СО атропина сульфата, допускается обнаружение других зон адсорбции красно-оранжевого цвета.

1. К 0,02 г экстракта прибавляют 5 мл хлороформа, 2 капли воды, 1 каплю аммиака раствора концентрированного 25% и взбалтывают; в УФ-свете (365 нм) должна наблюдаться флуоресценция голубого цвета (отличие от белены экстракта).

2. 0,1 г экстракта помещают в делительную воронку, приливают 5 мл воды, добавляют 0,5 мл аммиака раствора 25%, 10 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин. Хлороформное извлечение фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного в фарфоровую чашку. Хлороформ выпаривают на водяной бане досуха. К сухому остатку прибавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха. После охлаждения к сухому остатку прибавляют 1 мл ацетона и 4 каплями 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового; должно наблюдаться быстро исчезающее фиолетовое окрашивание (алкалоиды группы тропана).

Потеря в массе при высушивании. Не менее 25%. В соответствии с требованиями ОФС "Потеря в массе при высушивании".

Тяжелые металлы. Не более 0,01%. В соответствии с требованиями ОФС "Экстракты".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Содержание суммы алкалоидов в пересчете на гиосциамин должно быть от 1,4 до 1,6%.

Раствор стандартного образца (СО) атропина сульфата. Около 0,1160 г (точная навеска) СО атропина сульфата, предварительно высушенного при температуре 135 °C до постоянной массы, количественно переносят 10 мл воды в делительную воронку, прибавляют 0,5 мл аммиака концентрированного раствора и извлекают последовательно 20 мл; 15 мл; 15 мл хлороформа при взбалтывании в течение 3 мин. Хлороформные извлечения фильтруют через фильтр с 2 г натрия сульфата безводного, смоченного 5 мл хлороформа, в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают (раствор А).

Срок годности раствора 6 месяцев.

10 мл полученного раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают (раствор Б). 1 мл раствора содержит 0,0001 г атропина основания.

Срок годности раствора 1 месяц.

3 мл раствора Б стандартного образца атропина помещают в делительную воронку, прибавляют 7 мл хлороформа, 0,5 мл раствора бромтимолового синего, 10 мл 0,2 М фосфатного буферного раствора с pH 7,5 и далее проводят определение аналогично определению испытуемого раствора.

Раствор бромтимолового синего. 0,15 г бромтимолового синего и 0,15 г натрия карбоната безводного растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании. После охлаждения объем раствора доводят водой до метки и перемешивают.

Срок годности раствора 1 месяц.

Раствор борной кислоты. 0,5 г борной кислоты растворяют в смеси 25 мл спирта 95% и 20 мл воды при нагревании в мерной колбе вместимостью 250 мл, охлаждают, доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают.

Срок годности раствора 6 месяцев.

Около 0,5 г (точная навеска) экстракта помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 10 мл 0,2 М фосфатного буферного раствора с pH 7,5, доводят объем раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и дают отстояться.

2,0 мл полученного раствора помещают в делительную воронку, прибавляют 8 мл 0,2 М фосфатного буферного раствора с pH 7,5, добавляют 0,5 мл раствора бромтимолового синего, 10 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин. Хлороформное извлечение фильтруют через бумажный фильтр с 10 г натрия сульфата безводного, смоченного хлороформом, в мерную колбу вместимостью 50 мл. Фильтр промывают 3 мл хлороформа. Извлечение повторяют еще 2 раза по 10 мл хлороформа. Полученные извлечения фильтруют через тот же фильтр в ту же мерную колбу. В ту же мерную колбу прибавляют 10 мл борной кислоты раствора, доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают (испытуемый раствор).

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют хлороформ.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца атропина сульфата.

Содержание суммы алкалоидов в пересчете на гиосциамин в экстракте

в процентах (X) вычисляют по формуле:

где

A - оптическая плотность испытуемого раствора;

A_о - оптическая плотность раствора СО атропина сульфата;

a - навеска экстракта, г;

a_о - навеска СО атропина сульфата, г;

289,38 - молекулярная масса атропина основания, г;

694,8 - молекулярная масса атропина сульфата, г;

18,02 - молекулярная масса воды, г.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Экстракты".