N-[(2RS)-2-Метил-2,3-Дигидро-1H-индол-1-ил]-3-сульфамоил-4-хлорбензамид

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% индапамида C₁₆H₁₆ClN₃O₃S в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96%, очень мало растворим в хлороформе, практически нерастворим в воде.

Подлинность.

1. ИК-спектр. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области частот от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца индапамида.

2. УФ-спектр. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001% раствора субстанции в спирте 96% в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум поглощения и плечи при тех же длинах волн, что и спектр аналогичного раствора стандартного образца индапамида (соответственно при 242 нм, при 279 нм и 287 нм).

Угол вращения. От - 0,02 до + 0,02° (1% раствор субстанции в спирте 96%, ОФС "Поляриметрия").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе "Количественное определение".

Вводят в хроматограф по 10 мкл испытуемого и каждого из стандартных растворов. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 2,5 раза превышать время удерживания основного пика. Чувствительность настраивают таким образом, чтобы высота основного пика на хроматограмме стандартного раствора B была не менее 15% полной шкалы прибора.

На хроматограмме стандартного раствора D разрешение (R) между пиком индапамида и метилнитрозоиндолина должно быть не менее 4,0; на хроматограмме стандартного раствора B для пика индапамида отношение сигнал/шум должно быть не менее 6.

На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси N-(2-метил-1H-индол-1-ил)-3-сульфамоил-4-хлорбензамида не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме стандартного раствора A (не более 0,3%); площадь любого дополнительного пика не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме стандартного раствора B (не более 0,1%); сумма площадей всех дополнительных пиков на хроматограмме испытуемого раствора не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме стандартного раствора B (не более 0,5%). Не учитывают пики, площадь которых составляет менее половины площади основного пика на хроматограмме стандартного раствора B (0,05%).

Метилнитрозоиндолин. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Растворы защищают от света и используют сразу лее после приготовления или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Буферный раствор pH 2,8. 1,5 г триэтиламина растворяют в 900 мл воды, прибавляют фосфорную кислоту концентрированную до pH и разбавляют водой до объема 1000 мл.

Подвижная фаза. Ацетонитрил-тетрагидрофуран-буферный раствор pH 2,8 (7:20:73).

Раствор метилнитрозоиндолина. Около 1,25 мг (точная навеска) стандартного образца метилнитрозоиндолина [(2RS)-2-метил-1-нитрозо-2,3-дигидро-1H-индол] растворяют в ацетонитриле и разбавляют тем же растворителем до объема 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора разбавляют ацетонитрилом до объема 100 мл.

Раствор сравнения. 0,025 г субстанции растворяют в 1,0 мл раствора метилнитрозоиндолина и разбавляют водой до объема 10 мл. Полученный раствор выдерживают в течение 1 ч при температуре 4 °С и фильтруют.

Испытуемый раствор. 0,025 г субстанции растворяют в 1,0 мл ацетонитрил а и разбавляют водой до объема 10,0 мл. Полученный раствор выдерживают в течение 1 ч при температуре 4 °С и фильтруют.

Хроматографические условия.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографируют раствор сравнения. Хроматографическая система считается пригодной, если коэффициент p/v (отношение высоты пика метилнитрозоиндолина к высоте нижней точки кривой, соединяющей пик метилнитрозоиндолина с пиком индапамида) составляет не менее 6,7; отношение сигнал-шум для пика метилнитрозоиндолина не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика метилнитрозоиндолина должна быть не более разности площадей пиков метилнитрозоиндолина на хроматограммах раствора сравнения и испытуемого раствора (0,0005%).

Вода. Не более 3,0% (ОФС "Определение воды"). Около 0,1 г (точная навеска) субстанции растворяют в 10 мл смеси хлороформ-метанол (9:1) и титруют реактивом К.Фишера.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжелые металлы" в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС "Сульфатная зола").

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ. Растворы защищают от света и используют сразу же после приготовления или хранят при температуре 4 °С.

Раствор натрия эдетата. 0,2 г натрия эдетата растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза. Уксусная кислота ледяная-ацетонитрил-метанол-раствор натрия эдетата (0,1:17,5:17,5:65).

Испытуемый раствор. Около 0,05 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 17,5 мл смеси ацетонитрил-метанол (1:1), доводят объем раствором натрия эдетата до метки и перемешивают.

Стандартный раствор A. Около 30 мг (точная навеска) стандартного образца примеси N-(2-метилиндол-1-ил)-3-сульфамоил-4-хлорбензамида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 35 мл смеси ацетонитрил-метанол (1:1), доводят объем раствором натрия эдетата до метки и перемешивают. 1,0 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 35 мл смеси ацетонитрил-метанол (1:1), доводят объем раствором натрия эдетата до метки и перемешивают.

Стандартный раствор B. 1,0 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора смесью ацетонитрил-метанол-раствор натрия эдетата (17,5:17,5:65) до метки и перемешивают. 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора смесью ацетонитрил-метанол-раствор натрия эдетата (17,5:17,5:65) до метки и перемешивают.

Стандартный раствор C. Около 0,05 г (точная навеска) стандартного образца индапамида помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 17,5 мл смеси ацетонитрил-метанол (1:1), доводят объем раствора раствором натрия эдетата до метки и перемешивают.

Стандартный раствор D. Около 0,025 г (точная навеска) стандартного образца индапамида и около 0,045 г (точная навеска) стандартного образца метилнитрозоиндолина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 17,5 мл смеси ацетонитрил-метанол (1:1), доводят объем раствора раствором натрия эдетата до метки и перемешивают.

Хроматографические условия.

Колонку уравновешивают подвижной фазой до достижения стабильной базовой линии. Хроматографируют испытуемый раствор и стандартный раствор C, время удерживания основного пика индапамида должно быть около 10 мин.

Время регистрации хроматограммы должно не менее чем в 2 раза превышать время удерживания пика индапамида.

Относительное стандартное отклонение площади пика индапамида должно быть не более 2,0%; фактор асимметрии пика индапамида должен быть не более 2,0; эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику индапамида, должна быть не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание индапамида C₁₆H₁₆ClN₃O₃S в субстанции в пересчете на безводное, свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где: S - площадь пика индапамида на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика индапамида на хроматограмме стандартного раствора C;

a₀ - навеска стандартного образца индапамида, г;

a - навеска субстанции, г;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание C₁₆H₁₆ClN₃O₃S в стандартном образце, %.

Хранение. В хорошо укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.