Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат Диклофенак натрия + Левоментол + Льна посевного семян масло + Метилсалицилат, гель для наружного применения. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС "Мази" и нижеприведенным требованиям.

Содержит:

- диклофенак диэтиламина C₁₈H₂₂Cl₂N₂O₂ в количестве, эквивалентном не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества диклофенака натрия C₁₄H₁₀Cl₂NNaO₂;

- не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества левоментола C₁₀H₂₀O;

- не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества льна посевного масла жирного;

- не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества метилсалицилата C₈H₈O₃.

Описание. Содержание раздела должно соответствовать требованиям ОФС "Мази".

1. ВЭЖХ. Время удерживания основных пиков на хроматограммах испытуемых растворов должно соответствовать времени удерживания соответствующих пиков диклофенака, метилсалицилата на хроматограммах растворов стандартного образца или стандартных растворов (раздел "Количественное определение").

2. ГЖХ. Время удерживания основных пиков на хроматограммах испытуемых растворов должно соответствовать времени удерживания соответствующих пиков на хроматограммах растворов стандартных образцов/стандартных растворов левоментола, льна посевного семян масла жирного (раздел "Количественное определение").

pH. От 4,5 до 7,0 (ОФС "Ионометрия", метод 3).

Масса содержимого упаковки. В соответствии с ОФС "Масса (объем) содержимого упаковки".

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в соответствии с ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография".

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,5 мл фосфорной кислоты, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Подвижная фаза. Ацетонитрил - буферный раствор 1:1.

Испытуемый раствор. Точную навеску геля, эквивалентную около 12 мг диклофенака диэтиламина, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл метанола, энергично встряхивают в течение 10 - 15 мин, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают. Фильтруют полученный раствор через бумажный фильтр с размером пор 11 мкм, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Раствор стандартного образца примеси A диклофенака. Около 12 мг (точная навеска) стандартного образца примеси A диклофенака помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. 1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают (концентрация полученного раствора - 0,0012 мг/мл).

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Около 12 мг (точная навеска) стандартного образца примеси A диклофенака и 12 мг стандартного образца диклофенака диэтиламина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в метаноле, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают. 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают.

Примечание

Примесь A диклофенака: 1-[2,6-дихлорфенил]-1,3-дигидро-2H-индол-2-он, CAS: 15362-40-0.

Относительное время удерживания соединений. Диклофенак - 1 (около 17,4 мин), примесь A диклофенака - 0,9.

Не учитывают пики с относительными временами удерживания менее 0,4, а также пик с относительным временем удерживания 0,63 (соответствует пику метилсалицилата) на хроматограмме испытуемого раствора.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси A диклофенака и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- фактор асимметрии (As) пика диклофенака должен быть не более 3;

- разрешение (Rs) между пиками диклофенака и примеси A диклофенака должно быть не менее 2;

- относительное стандартное отклонение площадей пика примеси A диклофенака должно быть не более 5,0% (6 введений).

Содержание любой единичной примеси в процентах (X) рассчитывают по формуле:

где S₁ - площадь пика любой единичной примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика примеси A диклофенака на хроматограмме раствора стандартного образца;

a₁ - навеска геля, г;

a₀ - навеска стандартного образца примеси A диклофенака, мг;

P - содержание основного вещества в стандартном образце примеси A диклофенака, %;

L - заявленное количество диклофенака диэтиламина в 1 г геля, мг.

- единичная примесь - не более 1,0%;

- сумма примесей - не более 2,0%.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

1. Диклофенак натрия, метилсалицилат. Определение проводят методом ВЭЖХ в соответствии с требованиями ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография".

Буферный раствор. 0,5 мл фосфорной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объем водой до метки.

Подвижная фаза: Ацетонитрил - буферный раствор 1:1.

Раствор стандартного образца диклофенака диэтиламина. Около 29,0 мг (точная навеска) стандартного образца диклофенака диэтиламина, эквивалентную 25 мг диклофенака натрия, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл. Растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.

Стандартный раствор. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца метилсалицилата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 5 мл раствора стандартного образца диклофенака диэтиламина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. Точную навеску геля, эквивалентную около 12 мг диклофенака диэтиламина и 100 мг метилсалицилата, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл метанола, энергично встряхивают в течение 10 - 15 мин и доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают. Фильтруют полученный раствор через бумажный фильтр с размером пор 11 мкм, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Относительное время удерживания соединений. Диклофенак - 1 (около 11,0 мин), метилсалицилат - 0,6 (около 7,0 мин).

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику диклофенака и метилсалицилата, должна быть не менее 2000 теоретических тарелок;

- разрешение (Rs) между пиками диклофенака и метилсалицилата должно быть не менее 2;

- относительное стандартное отклонение площадей пиков диклофенака и метилсалицилата должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание диклофенака натрия C₁₄H₁₀Cl₂NNaO₂ в препарате в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика диклофенака на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика диклофенака на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска геля, г;

a₀ - навеска стандартного образца диклофенака диэтиламина, мг;

P - содержание основного вещества в стандартном образце диклофенака диэтиламина, %;

L - заявленное количество диклофенака диэтиламина в 1 г геля, мг;

318,10 - молекулярная масса диклофенака натрия;

369,29 - молекулярная масса диклофенака диэтиламина.

Содержание метилсалицилата C₈H₈O₃ в препарате в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика метилсалицилата на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика метилсалицилата на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска геля, г;

a₀ - навеска стандартного образца метилсалицилата, мг;

P - содержание основного вещества в стандартном образце метилсалицилата, %;

L - заявленное количество метилсалицилата в 1 г геля, мг.

2. Льна посевного семян масло жирное. Определение проводят методом ГХ (ОФС "Газовая хроматография", "Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах").

Натрия гидроксида раствор в метаноле 2%. 2 г натрия гидроксида растворяют в 100 мл метанола. Используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. Точную навеску геля, содержащую около 100 мг льна посевного семян масла жирного, помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 5 мл натрия гидроксида раствора 2% в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Затем через холодильник прибавляют 5 мл бора фторида раствора 14% в метаноле и кипятят еще 30 мин, после чего прибавляют через холодильник 10,0 мл гептана и кипятят 5 мин. Смесь охлаждают, прибавляют 25,0 мл насыщенного раствора натрия хлорида, встряхивают в течение 15 с и прибавляют такое количество насыщенного раствора натрия хлорида, чтобы верхний слой поднялся к горлу колбы. Отбирают 2,0 мл верхнего слоя, помещают в делительную воронку, промывают тремя порциями воды, по 2 мл каждая, и пропускают органический слой через слой натрия сульфата безводного (2 г).

Стандартный раствор льна посевного семян масла жирного 10 мг/мл. Около 100 мг (точная навеска) стандартного образца масла семян льна помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 5 мл натрия гидроксида раствора 2% в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Затем через холодильник прибавляют 5 мл бора фторида в метаноле 14% и кипятят еще 30 мин, после чего прибавляют через холодильник 10,0 мл гептана и кипятят 5 мин. Смесь охлаждают, прибавляют 25,0 мл насыщенного раствора натрия хлорида, встряхивают в течение 15 с и прибавляют такое количество насыщенного раствора натрия хлорида, чтобы верхний слой поднялся к горлу колбы. Отбирают 2,0 мл верхнего слоя, помещают в делительную воронку, промывают тремя порциями воды, по 2 мл каждая, и пропускают органический слой через слой натрия сульфата безводного (2 г).

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Для проверки пригодности хроматографической системы готовят раствора сравнения (А) и раствор сравнения (Б), как описано в ОФС "Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах".

Хроматографические условия приведены в ОФС "Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах" (метод 3, за исключением приготовления испытуемого раствора).

Если требуется линейный градиент температуры, температуру колонки увеличивают, например, со скоростью 3 °C/мин от 170 до 230 °C.

На хроматограмме раствора сравнения (Б) отношение сигнал/шум для пика метилмирастата должно быть не менее 5;

На хроматограмме раствора сравнения (А):

- разрешение между пиками метилолеата и метилстеарата должно быть не менее 1.8;

- эффективность хроматографической колонки рассчитанная по пику, соответствующему метилстеарату, должна быть не менее 30 000 теоретических тарелок.

--------------------------------

<*> Таблица "2" из текста ОФС "Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах".

Содержание льна посевного семян масла жирного в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - суммарная площадь пиков льна посевного семян масла жирного на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - суммарная площадь пиков льна посевного семян масла жирного на хроматограмме раствора стандартного образца;

a₁ - навеска геля, мг;

a₀ - навеска стандартного образца льна посевного семян масла жирного, мг;

P - содержание основного вещества в стандартном образце льна посевного семян масла жирного, %;

L - заявленное количество льна посевного семян масла жирного в 1 г геля, мг.

3. Левоментол. Определение проводят методом ГХ (ОФС "Газовая хроматография").

Раствор внутреннего стандарта. Около 210 мг (точная навеска) анетола помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. Точную навеску геля, эквивалентную около 50 мг левоментола, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объем раствора раствором внутреннего стандарта до метки. Перемешивают и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца левоментола. Около 25 мг (точная навеска) стандартного образца левоментола помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объем раствором внутреннего стандарта до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца левоментола и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца левоментола:

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику левоментола должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок;

- фактор асимметрии (As) для пика левоментола должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение отношений площадей пиков левоментола и анетола должно быть не более 5% (6 введений);

Содержание левоментола C₁₀H₂₀O в препарате в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - отношение площади пика левоментола к площади пика анетола на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - отношение площади пика левоментола к площади пика анетола на хроматограмме раствора стандартного образца;

a₁ - навеска геля, г;

a₀ - навеска стандартного образца левоментола, мг;

P - содержание основного вещества в стандартном образце левоментола, %;

L - заявленное количество левоментола в 1 г геля, мг.

Хранение. Содержание раздела приводится в соответствии с требованиями ОФС "Хранение лекарственных средств".