Собранные осенью с начала созревания семян до конца вегетации и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего травянистого растения цимицифуги даурской - Cimicifuga dahurica (Turcz.) Maxim., семейства лютиковых - Ranunculaceae.

Содержит не менее 3,0% суммы тритерпеновых гликозидов в пересчете на 27-деоксиактеин в сухом сырье.

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС "Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы".

Цельное сырье. Корневища горизонтальные, слегка коленчато-изогнутые, внутри часто полые, длиной 5 - 20 см, толщиной 1 - 2,5 см, поверхность корневища слегка морщинистая. На верхней стороне корневища имеются остатки полых стеблей, от нижней стороны корневища отходят корни; корни шнуровидные, ломкие.

Цвет корневищ и корней темно-коричневый, излом желтоватый. Запах характерный, слабый.

Измельченное сырье. Смесь кусочков корневищ различной формы и шнуровидных корней, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Цвет от светло-желтого до темно-коричневого. Запах характерный, слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС "Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения".

Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепарата поперечного среза корневища должна быть видна покровная ткань, представленная пробкой, состоящей из 5 - 6 рядов клеток. Клетки коровой паренхимы слегка тангентально вытянуты. Во вторичной коре хорошо различаются участки флоэмы, над которыми располагаются большие группы лубяных волокон с толстыми стенками. Линия камбия хорошо выражена. Древесина состоит из радиально расположенных рядов паренхимных клеток с утолщенными стенками и сосудов, лежащих одиночно или группами по 2 - 4. За счет чередования темных участков древесины со светлыми многорядными сердцевинными лучами наблюдается лучистое строение. В центре корневища обычно имеется полость.

При рассмотрении поперечного среза корня должен быть виден эпидермис. Кора отделена от центрального цилиндра хорошо выраженной, темноокрашенной эндодермой. Паренхимные клетки коры округлые, крупнее, чем у корневища, и тангентально вытянуты. Ксилема разделена 4 многорядными сердцевинными лучами, состоящими из округлых клеток. Паренхимные клетки ксилемы с утолщенными стенками, сосуды располагаются одиночно, реже группами по 2 - 3. Флоэма отделена от ксилемы слабо выраженным камбием.

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат - вода - бутанол 12,5:25:50.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г измельченного сырья, прибавляют 10 мл спирта 50% и перемешивают на магнитной мешалке в течение 1 ч. Полученное извлечение центрифугируют при скорости 7500 об/мин в течение 5 мин, затем фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор сравнения. В 5 мл метанола растворяют 1 мг стандартного образца эсцина и 1 мг стандартного образца 27-деоксиактеина и перемешивают.

Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в метаноле.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 100 - 105 °C в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией серовато-синего цвета (эсцин) и над ней зона адсорбции с флуоресценцией фиолетового или темно-фиолетового цвета (27-деоксиактеин).

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией серовато-синего цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца эсцина и зона адсорбции с флуоресценцией фиолетового или темно-фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца 27-деоксиактеина (тритерпеновые гликозиды); допускается обнаружение других зон адсорбции.

Влажность. Не более 13,0% (ОФС "Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения").

Зола общая. Не более 10,0% (ОФС "Зола общая").

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 4,0% (ОФС "Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте").

Измельченность сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС "Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, - не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, - не более 5%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС "Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Корневищ с неотделенными остатками оснований стеблей длиной до 2 см. Цельное сырье - не более 5%.

Органическая примесь. Не более 1%.

Минеральная примесь. Не более 2%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС "Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Радионуклиды. В соответствии с ОФС "Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Зараженность вредителями запасов. В соответствии с ОФС "Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Кислотный реагент. В фарфоровый стакан помещают 50,0 мл уксусной кислоты безводной, осторожно при перемешивании прибавляют 50,0 мл серной кислоты концентрированной и выдерживают в течение 1 ч при комнатной температуре. Срок годности раствора 2 ч.

Подготовка концентрирующего патрона (с октадецилсилил силикагелем (C18), 50 мкм, 500 мг/3 мл). Концентрирующий патрон последовательно промывают 4 мл метанола, затем 4 мл воды. При этом, после каждой промывки поверх слоя сорбента колонки должен оставаться слой элюента около 1 мм; сорбент патрона не должен быть сухим.

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,5 г (точная навеска) измельченного сырья, прибавляют 30,0 мл спирта 50% и нагревают на водяной бане при температуре 70 +/- 5 °C в течение 30 мин при постоянном перемешивании. Полученное извлечение фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл. Вату помещают в колбу для экстрагирования. Экстракцию повторяют еще дважды, фильтруя извлечение в ту же мерную колбу. После охлаждения объем раствора доводят спиртом 50% до метки и перемешивают. Полученный раствор центрифугируют со скоростью 7500 об/мин в течение 10 мин, затем фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл.

Испытуемый раствор. В фарфоровую чашку помещают 20,0 мл исходного раствора и упаривают на водяной бане при температуре не выше 65 °C досуха. Сухой остаток растворяют в 10,0 мл спирта 50%. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, доводят объем раствора спиртом 30% до метки, перемешивают и фильтруют через беззольный фильтр. Затем 1,0 мл фильтрата пропускают через предварительно подготовленный концентрирующий патрон. По окончании элюирования патрон промывают 6,0 мл свежеприготовленной смеси растворителей вода - метанол 9:1.

Сорбированные на патроне вещества элюируют 6,0 мл свежеприготовленной смесью растворителей хлороформ - метанол 75:25. Элюат собирают в фарфоровую чашку и упаривают на водяной бане при температуре не выше 65 °C досуха. Сухой остаток растворяют в 8,0 мл уксусной кислоты безводной. В коническую колбу вместимостью 25,0 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и прибавляют 5,0 мл кислотного реагента. Выдерживают в жидкостном термостате в течение 25 мин при температуре 60 +/- 1 °C, охлаждают до комнатной температуры.

Раствор сравнения. В коническую колбу помещают 5,0 мл уксусной кислоты безводной и 5,0 мл кислотного реагента. Перед измерением оптической плотности раствор выдерживают при температуре 60 +/- 1 °C в течение 25 мин и охлаждают до комнатной температуры.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 460 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы тритерпеновых гликозидов в пересчете на 27-деоксиактеин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;

a - навеска сырья, г;

87,7 - удельный показатель поглощения продукта реакции 27-деоксиактеина с кислотным реагентом при длине волны 460 нм ;

W - влажность сырья, %.

В соответствии с ОФС "Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".

В соответствии с ОФС "Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".