ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3,5-Дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-7-(-D-глюкопиранозилокси)-8-(3-метилбут-2-ен-1-ил)-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он.

Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола C₂₆H₃₀O₁₁ в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. От белого с сероватым или зеленоватым оттенком до светло-желтого с сероватым или зеленоватым оттенком мелкокристаллический порошок со слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, практически нерастворим в воде.

<*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 320 нм должен иметь максимум при 291 нм и минимум при 251 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 2 мл спирта 96%, прибавляют 20 мг магния и 0,3 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; в течение 1 мин должно появиться окрашивание от красного до красно-фиолетового.

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси. Сумма примесей - не более 4,0%. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза А (ПФА). Муравьиная кислота безводная - вода 2:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Муравьиная кислота безводная - ацетонитрил 2:1000.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объем раствора метанолом до метки.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Время удерживания глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола - около 13 мин.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола и ближайшей примеси должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (A_S) глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должно быть не более 2,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание суммы примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС "Хроматография").

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1% от суммы площадей всех пиков, и пики со временем удерживания от 3 до 24 мин.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,7% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,3% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная - ацетонитрил - вода 2:250:748.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола и испытуемый раствор.

Время удерживания глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола - около 13 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола:

- фактор асимметрии пика (A_S) глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должно быть не более 2,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола C₂₆H₃₀O₁₁ в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола на хроматограмме раствора стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, мг;

P - содержание глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола в фармакопейном стандартном образце глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, %;

W - потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищенном от света месте.