ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-(Пиридин-4-илметилиден)гидразин-1-карботиоамида перхлорат.

Содержит не менее 98,5% и не более 101,5% тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората C₇H₈N₄S·HClO₄ в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Желтый или желтый с зеленоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде и диметилформамиде, мало растворим в спирте 60% и воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях"). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 380 нм должен иметь максимум при 317 нм (раздел "Количественное определение").

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды и прибавляют 1 каплю метиленового синего раствора 0,15%; должно появиться сине-зеленое окрашивание.

3. Качественная реакция. При сжигании крупинок субстанции на медной проволоке пламя горелки должно окрашиваться в зеленый цвет (хлориды).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 236 до 242 °C (с разложением, ОФС "Температура плавления", метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Раствор уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 19 мл уксусной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил - раствор уксусной кислоты 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) тиосемикарбазида (гидразин-1-карботиоамид [79-19-6]), растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора А и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают 5 мл испытуемого раствора и 5 мл стандартного раствора А.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл стандартного раствора Б и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тиоуреидоиминометилпиридиния перхлорат - 1 (около 17 мин); тиосемикарбазид - около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тиосемикарбазида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками тиосемикарбазида и тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (A_S) тиосемикарбазида и тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората должен быть не более 2,0 для каждого;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков тиосемикарбазида и тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание тиосемикарбазида в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика тиосемикарбазида на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика тиосемикарбазида на хроматограмме стандартного раствора Б;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска тиосемикарбазида, мг;

P - содержание основного вещества в тиосемикарбазиде, %.

Допустимое содержание примесей. Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС "Хроматография"):

- тиосемикарбазид - не более 0,5%;

- любая другая примесь - не более 0,6%;

- сумма любых примесей (кроме тиосемикарбазида) - не более 1,0%;

- сумма всех примесей - не более 1,5%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 28 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 60% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 60% до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 317 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения спирт 60%.

Содержание тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората C₇H₈N₄S·HClO₄ в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;

a - навеска субстанции, г;

1019 - удельный показатель поглощения тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората ;

W - потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.