МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТАЧИГАРЕНА В ВОДЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания тачигарена в воде при санитарном контроле.

1. Краткая характеристика препарата

Действующее начало препарата тачигарен (Ф-319) - 3-окси-5-метил-изоксазол. Чистое вещество - бесцветные игольчатые кристаллы с температурой плавления 86 - 87 °С, стабильное к действию кислот и щелочей. Растворимость в воде при 25 °С: 85 г в 100 мл. Хорошо растворим в метаноле, этаноле, ацетоне. Препарат рекомендуется для протравливания семян сахарной свеклы. Применяется в виде 70-процентного смачивающего порошка. ПДК тачигарена в воде в настоящее время не установлена.

2. Методика определения тачигарена в воде

2.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции тачигарена из воды органическим растворителем с последующим определением с помощью тонкослойной хроматографии. Минимально открываемое количество тачигарена на тонкослойных хроматограммах 5 мкг.

2.2. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице

Таблица

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТАЧИГАРЕНА В ВОДЕ С ПОМОЩЬЮ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Диапазон определяемых концентраций 0,1 - 1,0 мг/л

2.3. Реактивы и растворы

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-71.

Эфир для наркоза, Фармакопея СССР (перегнанный).

н-Гексан, ч., МРТУ 6-09-2937-66 (перегнанный).

Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-68.

Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-66.

Натрий хлористый, х.ч., ГОСТ 4233-66.

Крахмал картофельный растворимый для йодометрии, ГОСТ 10163-62.

Стандартный раствор тачигарена в н-гексане с содержанием 0,5 мг/мл. Помещают 50 мг тачигарена в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки н-гексаном.

Азотнокислое серебро, ч.д.а., ГОСТ 1277-63.

Бромфеноловый синий, ч.д.а., ТУ МГ УХП 271-59.

Проявляющий реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 0,05 г бромфенолового синего, 10 мл ацетона и доводят до метки 0,5-процентным водно-ацетоновым раствором азотнокислого серебра (0,5 г азотнокислого серебра растворяют в смеси 24 мл ацетона и 76 мл дистиллированной воды).

Силикагель КСК, № 2, ГОСТ 3956-76 , ТУ 6-09-2523-72. Для приготовления сорбционной массы для хроматографических пластинок 1 г крахмала заваривают в 15 мл дистиллированной воды, прибавляют еще 110 мл воды, 40 г силикагеля, измельченного и просеянного через сито 100/120 меш, и тщательно перемешивают. Это количество сорбционной массы равномерно наносят на 15 пластинок. Пластинки сушат на воздухе и хранят в эксикаторе.

2.4. Приборы и посуда

Делительные воронки на 1 л, ГОСТ 8613-75.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Грушевидные колбы на 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Водяная баня, ТУ 46-22-603-75.

Вакуумный водоструйный стеклянный насос, ГОСТ 10696-75.

Стеклянный лабораторный холодильник, ХПТ, ГОСТ 9499-70.

Камера хроматографическая, 150×200, 105×165 мм, ГОСТ 10565-63.

Эксикатор, ГОСТ 6371-73.

Микропипетки, ГОСТ 20292-74.

Медицинский шприц на 1 мл.

Стеклянные пластинки, 9×12 см.

Сито капроновое, 100/120 меш.

Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок.

Электроплитка, ТУ 92-275-76.

Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76Е.

Камера для обработки пластинок, ТУ 25-11-430-70.

2.5. Проведение определения

Пробу воды (250 - 750 мл) помещают в делительную воронку, добавляют хлористый натрий из расчета 3,3 г на 10 мл воды, энергично встряхивают до полного растворения соли и экстрагируют тачигарен диэтиловым эфиром (100, 50 и 50 мл). В случае объема пробы воды 250 мл объем экстрагента может быть уменьшен (50, 25 и 25 мл). Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 15 - 30 минут при периодическом встряхивании и упаривают растворитель на ротационном испарителе (температура водяной бани не выше 30 °С) до небольшого объема (~1 мл). Упаренный экстракт количественно наносят на хроматографическую пластинку с тонким слоем силикагеля КСК, скрепленного крахмалом, с помощью медицинского шприца на 1 мл. Слева и справа от пробы наносят по два пятна (5 и 10 мкг) стандарта тачигарена в виде раствора в н-гексане и проводят хроматографирование в системе растворителей бензол - ацетон (3:1). Для хроматографирования используют насыщенную камеру. Для насыщения стенки камеры обкладывают фильтровальной бумагой, которая касается смеси растворителей и пропитывается. Через два часа быстро открывают крышку камеры и помещают пластинку для развития хроматограммы. После окончания процесса хроматографирования (подъем фронта растворителя на 11,5 см) пластинку извлекают из камеры, сушат на воздухе в вытяжном шкафу и обрабатывают проявляющим реактивом. При наличии в пробе тачигарена на пластинке появляется светло-желтое пятно на синем фоне с величиной R_f = 0,88 ± 0,02. Оценку качества тачигарена на хроматограмме проводят путем визуального сравнения размера и интенсивности окраски пятен стандарта с пятном пробы.

2.6. Обработка результатов анализа

Для определения содержания тачигарена в воде используют следующую формулу:

где:

Д - содержание тачигарена в воде, мг/л;

A - количество тачигарена в пробе, найденное визуальным сравнением со стандартным пятном, мг;

a - объем пробы, мл;

R - процент определения, найденный предварительно, %.

3. Настоящие Методические указания разработаны В.Д.Чмилем, Е.В.Безкровной и А.С.Меженной (ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев).

4. Требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами.